辅助生育技术

辅助生育技术的研究进展

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摘要：辅助生育技术（ＡＲＴ），指采用医疗辅助手段使不育夫妇妊娠的技术，主要包括人工授精和体外受精—胚胎移植及其衍生技术两大类。衍生的技术主要有卵细胞浆内单精子注射术、胚胎植入前遗传学诊断、卵母细胞的体外成熟、胚胎冷冻、培育新组织器官-治疗性克隆、卵子重建。

关键词：辅助生育技术、人工授精、体外受精—胚胎移植、衍生技术

世界卫生组织８０年代中末期在２５个国家的３３个研究中心组织了一次采用标准化诊断的不孕症夫妇调查，其结果表明：发达国家约有５％—８％的夫妇受到不孕症的影响，而发展中国家某些地区不孕症患者达３０％。全世界的不孕症人数约为５０００－８０００万。【１】据不完全统计，中国夫妇中不孕症患者约占２％－６％，且在不断上升。【２】在这种现状之下，辅助生育技术的解决迫在眉睫。

一、人工授精（AI）

人工授精，指将男性精液用人工方法注入女性子宫颈或宫腔内以协助受孕的方法。

人工授精主要用于由男性原因造成的不孕，如严重的尿道下裂、逆行射精、勃起障碍、无精症、少精症、弱精症、精液不液化症。有些女性方面造成的不孕也能采用人

工授精，如阴道痉挛、宫颈细小、宫颈黏液异常、性交后试验欠佳等。另外，有一些特殊情况，如免疫学原因的不孕，夫妇双方均是同一种常染色体隐性遗传病的杂合体或男性患常染色体显性遗传病，也可用人工授精的方法获孕和避免不健康后代出生。

人工授精的研究进展：人工授精早在19世纪末已有记载。由于男性不育和男女双方因素不育在不孕症中占有相当的比例。所以人工授精成为了重要治疗手段。但由于人工授精尤其是供精者人工授精涉及到法律、道德、伦理等社会问题及遗传病、传染病发生等一系列问题，因此必须严格掌握切莫滥用。人工授精技术真正成功地应用于临床始于20世纪50年代。1953年美国首先应用低温储藏的精子进行人工授精成功。我国湖南医学院于1983年用冷藏精液人工授精成功。1984年上海第二医学院应用精子洗涤方法人工授精成功。国内北京、青岛、广州等地也均先后开始了人工授精工作。

二、体外受精与胚胎移植

体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ），指用人工方法获取卵子，体外受精，培养后移植到已婚妇女子宫内着床，发展成胎儿分娩，由于这一过程最早是在试管内进行，故称之为试管婴儿。

IVF-ET的研究进展：第一例试管婴儿成功出生之前，科学家们做了很多工作。1944年，美国人洛克和门金首次尝试。而华裔科学家张明觉为此做出了很大贡献；1945年，他开始进行兔子的体外受精；1950年，提出精子获得问题；1 959年，“试管兔”出生；1969年，完成人的卵子体外受精，但未移植；1974年，建立技术程序。之后，英国的斯特普托和爱德华兹共同努力，于１９７８年７月１５日23时47分，在英国的奥尔德姆市ＢｏｕｒｎＨａｌｌ医院出生了世界首例试管婴儿露易丝〃布朗。1981年12月，美国首例试管婴儿出生；1983年10月，日本首例试管婴儿诞生；1985年4月，台北首例试管婴儿出生；1986年12月，香港首例试管婴儿出生。我国大陆第一例试管婴儿于1988年3月10日,诞生于北京医科大学第三附属医院妇产科,其创始人为张丽珠教授。此后10年间，各地相继开展试管婴儿技术并有成功报道。近两年，我国试管10多个增至目前的100多个【３】

三、衍生技术（源于ＩＶＦ－ＥＴ，是它进一步的研究发展）（１）卵母细胞浆内单精子注射受精（ICSI）

ICSI是将单个精子直接注入卵细胞浆内，使其受精，又称第二代试管婴儿。

ICSI的研究进展：ICSI最初应用于严重男性不育。目前的资料仍然提示从睾丸获得的精子进行ICSI后的成功率

较一般ICSI的成功率为低。由于ICSI在克服受精困难中的明显效果，其应用范围有逐渐扩大的趋势，包括既往常规I VF受精失败、不明原因不育等，甚至有的对于年龄大于38岁的妇女直接使用ICSI。有的作者在卵子数目较少时为了保证受精，亦采用ICSI。但Bhattacharya近期报导ICSI对非男性因素的治疗却没有优越性。目前，对ICSI的安全性的担忧越来越多，也有更多的资料提示ICSI可能带来的问题。一些前瞻性研究认为，畸形精仍然以常规IVF为首选的治疗方法。因此，应该在有明确的受精障碍的证据的情况下使用ICSI，ICSI并不能够提高无ICSI指征的辅助生殖技术的成功率；此外，应该有一定的遗传筛查技术作为支持。根据目前对“ICSI可能将与不育相关的遗传缺陷强行传递到下一代”这一问题的认识，目前通行的ICSI前仅进行染色体核型的筛查可能仍然是不够充分的，有可能忽略了许多与精子生成障碍有关的基因微缺失等问题。建议有关方面组织力量，调查国人的与精子生成障碍有关的遗传缺陷的高发原因，建立必要的遗传筛查手段和规范。对常规IVF受精失败再次ICSI（late ICSI）受精的技术，其最终妊娠率很低。1 995年Fishel合理首次报导圆形精细胞卵浆内注射(ROSI)受精获得妊娠成功，曾轰动一时，但由于确认精细胞困难以及未成熟精子受精可能带来的问题难以估计，因此其受关注的程度渐渐下降。【4】

（2）胚胎植入前遗传学诊断（PGD）

PGD指在胚胎植入之前的阶段对配子或胚胎进行遗传学的检测，将诊断为无遗传性疾病表型的胚胎移植入子宫后建立妊娠，从而防止遗传病患儿的妊娠和出生。

PGD的研究进展：其概念最早于1967年由Edward和Gardne r提出。首次的妊娠成功于1990年分别由Handyside和Ver linsky报道。估计目前全球已超过50多个中心建立了PGD 技术，大约已进行了5000个PGD临床治疗周期，诞生了超过1000个正常婴儿。国内首例PGD婴儿于1999年由中山大学附属第一医院报道。约于2002年中进行的初步统计显示中国内地已有6个辅助生殖中心建立了PGD技术，共完成8 0个治疗周期并获得19例的临床妊娠，成功率为23.8%，当时已分娩12个正常的婴儿，全部均实现了PGD的目的。还没有足够的资料说明表明PGD的安全性如是否会导致先天异常的发生。PGD技术还有待发展，但其在优生优育中蕴含的巨大潜力是不可低估的。随着人类对疾病基因的深入了解以及诊断技术的提高，PGD的应用将越更为广泛。【5】

（3）卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）

IVM首先由Cha报道功从手术穿剌卵巢获得不同成熟阶段的未成熟卵母细胞，在体外培养为成熟卵母细胞后进行体外受精和胚胎移植。随后Alan Trounson报道在阴道B超引导下穿剌未接受促激素剌激的PCOS患者卵巢的2-10mm直径