分光光度法快速测定食品中微量甲醛

Ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ
ｉｎ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏ－ａｍｏｕｎｔｓ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｉｎ ｆｏｏｄｓｔｕｆｆｓ ａｎｄ ｂｙ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｆｌｏｗ－ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，
１■ 鼬收……矿率
本法ＡＨＭＴ法本法ＡＨＭＴ法本法ＡＨＭＴ法 Ｐｒｅｓｅｎｔ ＡＨＭＴ Ｐｒｅｓｅｎｔ ＡＨＭＴ Ｐｒｅｓｅｎｔ ＡＨＭＴ
ｍｅｔｈｏｄ ｍｅｔｈｏｄ ｍｅｔｈｏｄ ｍｅｔｈｏｄ ｍｅｔｈｏｄ ｍｅｔｈｏｄ
腐竹 海蛰 香菇 粉丝１ 粉丝２
２６４．０
２７１．０
５８．８
５８．１
３４０．０
３３４．０
万方数据
苯三酚光度法对甲醛含量的测定。
ｌ试验部分
１。１仪器与试剂 ＦＩＡＳ ４００流动注射仪；ＳＰ－２０００（７２２）型可见分
光光度计；Ｕｖ－７５３０Ｇ紫外可见分光光度计。 甲醛标准溶液：吸取甲醛溶液（含甲醛３６％～
３８％质量分数）２．８ ｍＬ于１ Ｌ容量瓶中，加 １ ｔｏｏｌ·Ｌ－１硫酸溶液０．５ ｍＩ。，用水稀至刻度，用碘 量法标定［２１。取上述标准溶液稀释ｌｏ倍作为储备 液，此溶液置于室温下可使用１个月。
ｓａｍｐｌｅ Ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ３５
ｐｅｒ ｈｏｕｒ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔＯ ｂｅ ０．０２３ ｍｇ·Ｌ～．Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆ
ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｔｅｓｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｆｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ７ ｍｇ·Ｌ一１ ｆｏｒ １１ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ。ｖａｌｕｅ ｏｆ ＲＳＤ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｗａｓ
·５５】 ·
万方数据
大。试验选择间苯三酚质量浓度为２ ｇ·Ｌ～，停流 时间为５７ Ｓ。 ２。５注样体积、停流位置的选择
试验了采样体积为１２０，２００，３００，４００，５００ １２Ｉ。 时对测定的影响，结果表明：吸光度随采样体积增大 迅速增大，当采样体积大于４００弘Ｌ时吸光度增加幅 度较小，试验选择４００／ｚＬ采样环；当停流位置（即注 样开始后的时间）在１３～１７ ｓ时吸光度最大，试验 选择注样１５ Ｓ后停流。 ２．６反应温度的选择
２０．１
２０．３
பைடு நூலகம்３．２０
３．０９
５．０ ５．Ｏ ５．０ ５．Ｏ ５．０
５．０ ５．Ｏ ５．０ ５．０ ５．Ｏ
９４．５ ９９．３ ９８．５ ９８．１ ９５．６
０．２９％．Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｏｄｓｔｕｆｆ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｂｙ ｓｔｅａｍ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａ Ｈ３ Ｐ０４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ
ｄｉｓｔｉｌｌａｔｅ ｗａｓ ａｂｓｏｒｂｅｄ ｉｎ ｄｉＬ ＫＯＨ ｓｏｌｕｔｉｏｎ．
试验结果表明：用单因素法优化流速，载流与显 色剂的流速分别为１．７，０．１８ｍＬ·ｍｉｎ一１时吸光度 最大。反应管长为９０ ｃｍ时吸光度最大。试验选用 ９０ ｃｍ的反应管，并在其两端各编结了３０ ａｍ的编 结反应器，使Ｓｃｈｌｉｅｒｅｎ效应［８］影响最小。 ２．３氢氧化钾浓度的选择
随氢氧化钾浓度增大，吸光度迅速增加，当氢氧 化钾浓度为０．４ ｍｏｌ·Ｌ－１时达到极大值，随后缓慢 降低。经研究，氢氧化钾浓度过高，甲醛和显色剂不 稳定，Ｓｃｈｌｉｅｒｅｎ效应大，且显色反应和褪色反应速 度过快，停流时间不易控制。试验选择氢氧化钾浓 度为０．４ ｍｏｌ·Ｌ～。 ２．４显色剂浓度的选择
表１测定结果及回收率试验（＾＝５）
Ｔａｂ．１ Ａｎａｌｙｔ．ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ５ ｓａｍｐｌｅｓ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ
样品名称 Ｓａｍｐｌｅ
ｌ＇“ｌＴｌｅ
Ａｍ学ｔ品’。鬻ｆ ＨＣ值ＨＯ
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流动注射分光光度法快速测定食品中微量甲醛
李紫薇，陆慧慧，陶冠红。 （苏州大学化学化工学院，苏州２１５１２３）
摘要：在０．４ ｍｏ卜Ｉ。＿１氢氧化钾溶液中甲醛与间苯三酚反应生成一种不稳定的橙色化合物，
其吸收峰位于４７４ ｎｍ波长处。以此反应为基础提出了微量甲醛的分光光度测定方法，并采用流
动注射技术，对显色反应的过程进行了严格控制并及时地测定所生成的不稳定橙色化合物的吸光
按试验方法制作工作曲线，甲醛的质量浓度在 １０ ｍｇ·Ｉ。－１以内呈线性。回归方程为Ｙ＝０．００４ ９７ ＋Ｏ．０３９ ９８ Ｃ，相关系数为０．９９９ ８。对７ ｍｇ·Ｌ＿１ 甲醛标准溶液测定，相对标准偏差（７＂／一１１）为 ０．２９％，检出限（３ｄ）为０．０２３ ｍｇ·Ｉ。～。 ２．９样品分析
按试验方法对样品进行预处理后进行测定，结 果见表１。本法测定结果与国标ＡＨＭＴ法［２］测定 结果相比较，两种方法测得值有良好的一致性。
（ＡＨＭＴ）法和乙酰丙酮法等旧Ｊ。脚Ｈ法、 （ＭＢＴＨ）、４一氨基一３一联氨一５一巯基一１，２，４一三氮杂茂
ＡＨＭＴ法和乙酰丙酮法是检测空气中甲醛的国家 标准方法，这三种方法反应时间都较长，ＭＢＴＨ试
收稿日期ｊ ２００６—１２—２８ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（２０３４５００６，２０５７５０４３） 作者简介：李紫薇（１９７０一），女，新疆伊犁人，讲师，硕士研究 生，从事分析化学教学及仪器分析方法的研究与应用． ＊联系人 ·５５０－
试验分别考察了一定浓度的间苯三酚溶液、含 １０％（体积分数，下同）乙醇的间苯三酚溶液和含一 定量氢氧化钾的间苯三酚碱性溶液的稳定性。间苯 三酚溶液和含ｌｏ％乙醇的间苯三酚溶液稳定性较 好，保存时间长；间苯三酚碱性溶液稳定性较差， ｐＨ值越高越不稳定，需临用新配。上述三种间苯 三酚溶液对峰高影响无明显差异。试验选择间苯三 酚溶液作为显色剂。
ｔｈｅ ｃｏｕｒｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｓｔｒｉｃｔｌｙ ａｎｄ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｔｉｍｅｌｙ．Ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｗａｓ ｋｅ！ｐｔ ｗｉｔｈｉｎ １０ ｎａｇ·Ｌ～．
中图分类号：０６５７．３２
文献标识码：Ａ
文章编号：１００１－４０２０（２００８）０６－０５５０－０３
Ｆｌｏｗ Ｉｎｊ ｅｃｔｉｏｎ－Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｃｒｏ－ａｍｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｉｎ Ｆｏｏｄｓｔｕｆｆｓ
ＬＩ Ｚｉ－ｗｅｉ，ＬＵ Ｈｕｉ－ｈｕｉ，ＴＡｏ Ｇｕａｎ－ｈｏｎｇ‘ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍ．ａｎｄ Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｕｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｕｚｈｏｕ ２１５１２３，Ｃｈｉｎａ）
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｆｌｏｗ ｉｎｊｅｃｆｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ；Ｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ；Ｆｏｏｄｓｔｕｆｆｓ；Ｓｔｅａｍ
ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ
目前，测定微量甲醛的比色方法有变色酸法、品 红一亚硫酸钠法、碘一淀粉褪色法［１］、酚试剂法
问苯三酚溶液：称取问苯三酚０．２０ ｇ溶于 ７０ ｍＬｚＫ中，加水定容至１００ ｍＬ［５｜，置棕色瓶中，于 阴凉处保存。
试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。 １．２分析步骤
流动注射分析过程如图１所示，包括采样和注 样。采样时间为３０ Ｓ，使试样充满采样环，同时，间 苯三酚溶液与载流混合，建立基线；注样１５ Ｓ后停 流５７ ｓ，使显色反应达到较完全，然后程序又回到采 样步骤，开始下一次分析；残留于流路的样品在采样 步骤中被冲净。每次分析需１０２ Ｓ，检测波长为 ４７４ ｎｍ。
剂和ＡＨＭＴ试剂价格高并需进口，ＭＢＴＨ试剂不 稳定，ＡＨＭＴ法显色不稳定；乙酰丙酮需用沸水浴 加热、蒸馏等步骤。品红一亚硫酸钠法需使用高浓度 的硫酸；碘一淀粉褪色法灵敏度较高，但反应时间长 且显色反应不够稳定。近年，有报道使用间苯三酚 进行甲醛的定性检测［３】，定量测定的应用也有报 道［４．５］，均采用分光光度法，由于问苯三酚与甲醛反 应生成的有色产物褪色很快，用普通分光光度法测 定其准确性不可靠，有文献提出该显色反应只能用 于定性不可用于定量ｒ６】。本试验利用流动注射分析 法的混合过程和反应时间的高度重现性，实现了间
备液配制成合适的浓度，按试验方法进行测定。 样品中加入０．４ ｍｏｌ·Ｌ－１氢氧化钾溶液，使之
与载流中氢氧化钾浓度相同，以消除折光效应的 影响。
２结果与讨论
２．１测定波长的选择
采用手工法将１０ ｍｇ·ｒ１甲醛标准溶液
（Ｏ．４ ｍｏｌ·Ｌ一１氢氧化钾）和２ ｇ·Ｌ＿１间苯三酚溶 液依次加入比色管（体积比１：１０），反应约８０ Ｓ时， 有色产物浓度最大，稳定约１５ ｓ后开始衰退。以试 剂空白为参比，在生成物稳定时间内进行波长扫描， 结果表明：有色物质在４７４ ｎｍ波长处有最大吸收。 试验选择４７４ ｎｍ作为测定波长。 ２．２流速、反应管长的选择
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ａｎ ａｌｋａｌｉｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ０．４ ｍｏｌ·Ｌ～ＫＯＨ，ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｗａｓ ｒｅａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ ｔｏ
ｒｍ ｆｏｒｍ ａｎ ｕｎｓｔａｂｌｅ ｏｒａｎｇｅ ｃｏｌｏｒｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔ ｗｉｔｈ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｍａｘｉｍａ ａｔ ４７４
度。甲醛质量浓度在１０ ｍｇ·Ｌ＿１以内与吸光度呈线性关系，在采样频率为每小时３５个样品的条
件下，所得检出限为０．０２３ ｍｇ·Ｌ～。在７ ｍｇ·Ｌ＿１浓度水平条件下连续测定１１次，测得相对标
准偏差为０。２９％，试样中微量甲醛先从磷酸溶液中用蒸汽蒸馏法分离并吸收于氢氧化钾溶液中。
关键词：流动注射分析；分光光度法；甲醛；间苯三酚；食品；蒸汽蒸馏
Ｒ——２ ｇ－Ｌ叫间苯三酚溶液（ｓｙｍ－ｂｅｎｚｅｎｅｔｒｉ０１）
Ｓ一甲醛标准溶液或待测液（ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）
图ｌ流动注射流路图 Ｆｉｇ．１ ＦＩＡ ｍａｎｉｆｏｌｄ
１．３样品处理 称取经粉碎样品（粉丝、腐竹、香菇等）５～２５ ｇ
于蒸馏瓶中，加去离子水８０ ｍＩ。，磷酸（１＋９）溶液 １０ ｍＩ。，硫酸钠１０ ｇ，石蜡２．５ ｍＬ，冷凝管下端插入 装有１０ ｇ·Ｉ。－１氢氧化钾溶液１ ｍＩ。的１００ ｍＩ．容量 瓶中，容量瓶置于冰水浴中，通水蒸汽进行蒸馏，收 集蒸馏液１００ ｍＬ。同时作空白蒸馏［７］。将样品制
Ｓ
１．７ ｍＬ·ｒａｉｎ １．７ｍＬ·ｒａｉｎ
Ｐ１，Ｐ２——蠕动泵（ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃ ｐｕｍｐｓ）
Ｒｃ．一反应管（ｒｅａｃｔｉｏｎ ｃｏｉｌ）Ｖ一采样阀（ｉｎｊｅｃｔｏｒ ｖａｌｕｅ） Ｄ一检测器（ｄｅｔｅｃｔｏｒ）ＷＩ一废液（ｗａｓｔｅ） Ｃ．一载流（ｃａｒｒｉｅｒ）（０．４ ｍｏｌ·Ｌ一１ ＫＯＨ溶液）
试验考察了反应温度分别为１５，１７，２０，２５，３０， ３５℃时对测定的影响。结果表明：当反应温度高于 １７℃时吸光度基本无明显变化，试验选择室温条件 下测定，无需加热。 ２．７共存物质的影响
当甲醛质量浓度为７ ｍｇ·Ｌ～，允许相对偏差 在士５％时，下列倍数的离子对测定无影响：８００倍 的苯酚；５００倍的ＣＨ３ＣＯＯ一、ＮＨ才、ＮＯｆ；２００倍的 乙醇；１００倍的Ｓ＠一；５倍的甲醇、乙醛；ｌ ０００倍丙 酮、糠醛、葡萄糖；１０ ０００倍Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｃ１、Ｎ（耳。 ２．８工作曲线、精密度与检出限
试验结果表明：间苯三酚质量浓度在０．２５～ ２ ｇ·Ｌ－１之间，吸光度随间苯三酚质量浓度的增大 先增大；当间苯三酚浓度大于ｌ ｇ·Ｌ叫时吸光度无 明显变化；间苯三酚浓度为２ ｇ·Ｌ＿时，在停流时 间内有色物质已明显衰退。试验考察了当问苯三酚 质量浓度为２ ｇ·Ｌ～，停流时间分别为５５，５７，６２， ７２ ｓ的吸光度。当停流时间为５７ Ｓ时，吸光度最