消毒与灭菌技术

一般为0.1～0.4w/m2 通风管内流通空气可采用
大于100w/m2的大剂量
24
消毒与灭菌技术
－辐射灭菌法 ̶非电离辐射：紫外线
一般6－15m3房间装30w紫外灯一只； 灯距地面2.5—3m 温度10－55℃，湿度45﹪－60﹪ 应在操作前照射1－2h,操作时关闭。
25
消毒与灭菌技术
超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉 碎细胞、提取抗原）
干燥与低温抑菌
8
消毒与灭菌技术
̶ 热力灭菌法
原理
使微生物蛋白质变性凝固；
酶失活；
微生物体内的DNA断裂。
方法
干热灭菌法 湿热灭菌法
热力灭菌法
9
焚烧----最彻底的灭菌方法
烧灼----直接用火焰灭菌方法
如接种环、试管口、三角瓶口
杀菌机理：含有微细小孔<0.22μm,只允 许液体或气体及孔径<0.22μm的颗粒通过， 细菌不能滤过。
不能除病毒、支原体 适用范围：血清、毒素、输液、生物制品、
抗生素以及空气等的除菌。
30
过滤灭菌
31
32
消毒与灭菌技术
－物理灭菌法
方法
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
穿透力弱，温度不易
价廉
易贮藏
44
消毒与灭菌技术
̶ 常用的消毒防腐剂及应用
类 型
名称及使用方法
醇 70%—75%乙醇
类
作用原理
脱水、蛋白质变性
应用范围
皮肤、器皿
醛 0.5%—10%甲醛 类 2%戊二醛（pH=8）
蛋白质变性
房间、物品消毒（不 适合食品厂）
酚 3%—5%石炭酸
类 2%来苏儿（煤酚皂）
3%—5%来苏儿
氧 0.1%高锰酸钾 化 3%过氧化氢
除对热敏感的药物外其他药物均可选用
12
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法
高采用高压饱和蒸汽杀灭微生 物，是最有效的灭菌方法 115 ℃,70.91kPa,30min 121℃，103.1kPa,15-20’
手提式灭菌锅
13
注射液
培养基
灭菌箱
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法
第二章 消毒与灭菌技术
1
消毒与灭菌技术
̶ 教学内容
§1 基本概念 §2 物理方法 §3 化学方法 §4 制药工业中的消毒与灭菌（♫）
2
第一节 基本概念
3
消毒与灭菌技术
̶ 基本概念
灭菌－杀灭或除去所有微生物的繁殖体和芽
胞。
消毒－杀灭或除去病原微生物。
防腐－抑制微生物的生长与繁殖。抑菌剂或防 腐剂。
剂 0.2%—0.5%过氧乙酸
破坏细胞膜、蛋白质变 地面、器具
性
皮肤
地面、器具
氧化蛋白质活性基团， 皮肤、水果、蔬菜
酶失活
皮肤、物品表面
水果、蔬菜、塑料等
45
消毒与灭菌技术
̶ 常用的消毒防腐剂及应用
类型 名称及使用方法
作用原理
应用范围
重 0.05%—0.1%升汞 金 2%红汞 属 0.1%—1%硝酸银 盐 0.1%—0.5%硫酸铜 类
间歇蒸汽灭菌法
反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）
巴氏消毒法
较低的温度 61 ℃ 30mim/71 ℃ 30s（杀致病菌）
11
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：湿热灭菌特点
蒸气比热干空气穿透力强， 所以灭菌效 力高于干热灭菌法。
灭菌效果可靠,简便、经济、易控制 制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。
高压蒸汽灭菌
温度/℃ 压力/kPa(kg/cm2) 时间/min
110
40.52(0.4)
40
115
70.91(0.7)
30
120
101.3(1.0)
20
125
141.82(1.4)
15
130
182.34(1,8)
10
热压灭菌所需温度与相当压力及时间
14
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法
100℃ 5’(杀繁殖体)，2h(杀芽 胞) 适用对象：注射器 和外科器械的消毒。
20
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：巴氏消毒法
巴氏消毒法（杀致病菌） 61℃ 30’或71℃ 15’’ 82℃处理4秒
适用对象：奶制、 果汁、酒、 糖浆等 食品消毒。
21
消毒与灭菌技术
－影响热力灭菌的因素
微生物的种类和数量 灭菌温度与作用时间（灭菌温度与时间成反比） 被灭菌物品的性质（所含营养、pH）
常用方法
过滤 化学消毒剂 紫外线照射
50
制药工业中的消毒与灭菌 ̶ 空气中微生物的控制－过滤
初效过滤器 中效过滤器
空气净化系统
高效过滤器
超净工作台或生物安全柜
̶ 气体消毒与灭菌:环氧乙烷灭菌法
环氧乙烷 混合气体
12%环氧乙烷 88%氟里昂
10%环氧乙烷 90%二氧化碳
41
消毒与灭菌技术
气体灭菌法:环氧乙烷灭菌法
环氧乙烷 维持时间
浓度850~900mg/L 45℃,维持3h
浓度450mg/L 45℃维持5h
相对湿度：40%~60% 温度：22~55 ℃
42
体物料。 有可能使药效活性降低，使用中注意安全
保护。
28
消毒与灭菌技术
－滤过灭菌法
指药液通过无菌滤器，除去活的和死的微 生物而得到无菌滤液的方法。
特点： （1)适用于很不耐热的药物溶液的除菌 （2)必须无菌操作（滤球 、容器 、药 液、环境无菌等过程）。
29
消毒与灭菌技术
－滤过除菌法
杀菌机理：产生游离基,破坏DNA。 特点：射线穿透力强、被灭菌物体温度变化小 适用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的
消毒-不破坏其营养成分
27
消毒与灭菌技术
－辐射灭菌法特点
适用于热敏性药物的灭菌； γ射线穿透力强,特别适用于已包装密封的
药品消毒灭菌可防二次污染 ； 杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固
药典规定160170℃2h 均匀，温度高，不适
或140℃，3h
于大部分药品
湿 热压灭菌
98kPa(1kg/cm2), 穿透力强，效果可
15-20min
靠，适用广
热 流通蒸汽 100℃，30-60min
不能杀灭细菌芽胞
灭 菌
33
100℃，30min + 室 间歇灭菌 温24h，重复操作3
次以上
适于必须加热灭菌而 又不耐高温者；时间 长，效果不理想；须 加抑菌剂
类型百度文库
名称及使用方法
卤素及其 化合物
0.2—0.5mg/L氯 气 10%—20%漂白粉 0.5%—1%漂白粉 2.5%碘酒
染料 2%—4%龙胆紫
酸类
0.1%苯甲酸 0.1%山梨酸
作用原理 破坏细胞膜、蛋 白质
与蛋白质的羧基 结合
应用范围 饮水、游泳池 水 地面 水、空气等 皮肤 皮肤、伤口
食品防腐 食品防腐
消毒与灭菌技术
－物理灭菌法
200-300nm， 紫外线灭菌 254nm最强
用于空气灭菌和表面灭菌， 效果与微生物敏感性有关， 对酵母菌和霉菌力弱
微波灭菌
2450MHz，3- 强热效应，快速高效，适于
6min
热不稳定者
辐 γ射线 射 灭 β射线 菌
34
60Co 穿透力强
由电子加速器产 生，穿透力弱， 灭菌效果差
无菌操作：防止微生物进入工作对象的方 法。
无菌制剂－系指采用某一无菌操作方法或 技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和 芽胞的一类药物制剂。
6
第二节 物理方法 （P30）
7
消毒与灭菌技术
̶ 物理灭菌法
热力灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌） 辐射灭菌法（紫外线、电离幅射、微波） 滤过除菌法（除菌滤器、适用物品） 其他
47
第四节
制药工业中的消毒 与灭菌
48
消毒与灭菌技术
̶ 制药工业中的消毒与灭菌
空气中微生物的控制 水中微生物的控制 设备的消毒灭菌 墙壁、地面、天花的消毒灭菌 原辅料药的消毒灭菌 操作人员的卫生控制 药物制剂的消毒灭菌 无菌操作法
49
制药工业中的消毒与灭菌 ̶ 空气中微生物的控制
脂溶剂等） 菌体成分氧化、水解或结构改变（氧化剂、卤素、
醛、酚等）
37
消毒与灭菌技术
̶ 化学消毒：气体灭菌法
使用能形成气体或蒸汽的化学药品 适用于不耐热又不能过滤的药品（混悬
液、固体药物等 环氧乙烷灭菌法（制药设备、注射器、生物制品） 甲醛蒸汽熏蒸灭菌法（车间、制药设备） 其他蒸汽熏蒸灭菌法
－辐射灭菌法 ：非电离辐射：紫外线
杀灭繁殖体需3~5s 杀灭芽孢需10min以上 紫外灯必须无尘、无油垢 可在使用前照射1~2h，操作时关闭 紫外灯有效使用期为3000h
26
消毒与灭菌技术
－辐射灭菌法 ：电离辐射
包括：β射线（电子束灭菌，适用薄、密度低
的物料）
60Co － γ射线（同位素辐射灭菌法）
22
消毒与灭菌技术
－热力灭菌法：湿热灭菌与干热灭菌的比较
同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热
23
消毒与灭菌技术
̶ 辐射灭菌法 ̶ 非电离辐射：紫外线
波长240-300nm（254nm） 杀菌机理：干扰DNA的复制与转录 特点：紫外线穿透力较弱 房间静态空气消毒时剂量
不升高温度，设备费用高， 辐射能引起一些药物pH值、 含量、活性等改变，某些制 品不宜选用
第三节 化学方法（P37）
35
消毒与灭菌技术
̶ 化学消毒法
利用化学药物（消毒防腐剂）破 坏微生物的化学组成、物理结构和生 理活动，达到防腐灭菌目的。
36
消毒与灭菌技术
̶ 化学消毒剂作用机制
促进菌体蛋白质变性凝固（酚、醇、醛、酸碱类等） 干扰细菌酶系统和代谢（氧化剂、重金属盐类等） 损伤细菌细胞膜，增加其通透性（表面活性剂、
38
消毒与灭菌技术
̶ 化学消毒：气体灭菌法
环氧乙烷：车间、制药设备、注射器、生物制品 甲醛溶液：车间、制药设备 醋酸、乳酸 丙二醇 臭氧
39
消毒与灭菌技术
̶ 气体灭菌法:环氧乙烷灭菌法
减压 灭菌
排气
器
预热
灭菌物品
通环氧 乙烷混 合气体
抽真空 排除环 氧乙烷
送无菌 空气
40
消毒与灭菌技术
软包装灭菌器
高压蒸汽灭菌器
15
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌 常用设备
手提式热压灭菌器 （科研、检验、医务室）
16
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法）
高压蒸汽灭菌 注意事项
灭菌初期先排净锅内冷空气; 灭菌时间：从达到规定压力和温度开始计； 锅内水分要充足; 灭菌物品装量不宜太满; 灭菌结束需缓慢减压； 灭菌结束，趁热取出物品。
除菌:用冲洗、过滤等机械手段除去微生物的方法 化疗：用对病原菌有毒力但对机体无害的化学物质
4杀灭或抑制机体内病原微生物的方法
消毒与灭菌技术
̶ 基本概念
无菌－在一定范围内没有活的微生物存在。。 无菌操作法－防止细菌进入机体或对象的技术。
无菌车间
5
无菌操作台
消毒与灭菌技术
̶ 基本概念
消毒与灭菌技术
－化学消毒：浸泡与表面消毒法
0.1%新洁尔灭（苯扎溴铵） 0.2%—0.5%过氧乙酸 2%煤酚皂溶液（来苏水）
70%—75%乙醇：皮肤、直接 接触药物的仪器设备
洁净区地 面、门、 墙、玻璃 窗、天花 板、清洁间 水池和清洁 工具的消毒
43
选择适当的消毒剂
有效
低毒
低破坏 方便
蛋白质变性、酶失活 变性、沉淀蛋白
蛋白质变性、 酶失活
非金属器皿、体温计 皮肤、粘膜、伤口 皮肤、新生儿眼睛 防治植物病害
表 0.05%—0.1%
蛋白变性、破坏细胞 皮肤、粘膜、器械
面 新洁尔灭（苯扎溴铵） 膜
活
性 0.05%—0.1%
皮肤、金属、棉织品、
剂
杜灭芬
塑料
46
消毒与灭菌技术
̶ 常用的消毒防腐剂及应用
17
消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法： 流通蒸汽灭菌法
水蒸汽100℃ 30-60’(杀繁殖体) 适用对象：不需杀死芽孢的物体的消毒。 适用于一些注射剂生产，尤其是1－2ml注射剂
及不耐高热的品种。 若在药液中加入抑菌剂（0.1%~0.5%苯酚等），
可杀死芽孢
此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。
干烤----加热160-170℃ 2h
玻璃器皿、陶瓷 红外线----热效应，与干烤类似
灭菌效果：可杀死营养体和芽胞
10
效果比干热好
高压蒸汽灭菌法（热压灭菌法）
最有效的湿热灭菌法 121 ℃ 15-20mim（杀芽胞)
煮沸消毒法
水煮100 ℃ 5mim(杀繁殖体)-2h(杀芽胞)
流通蒸汽消毒法
水蒸汽100 ℃ 15-30mim(杀繁殖体)
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消毒与灭菌技术
－ 湿热灭菌法：低温间歇灭菌法
将灭菌物体置于60~80℃ ，1h后，置 于20~25℃ ，24h。反复三次(杀芽胞）
适用对象
不宜高压灭菌的培养基 不耐热的药物和营养物 发酵车间的管道等 中药注射剂常用该法
缺点：时间长、功效低，消灭芽孢效果差
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消毒与灭菌技术
－湿热灭菌法：煮沸灭菌法 煮沸灭菌法