第4节 影响分离的因素与操作条件选择

1. 环境中有机氯农药残留量分析
固定相：薄壳型硅胶(37 ～50m) 流动相：正己烷 流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm2.5mm(内径) 检测器：差示折光检测器
可对水果、蔬菜中的农药 残留量进行分析。
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2. 稠环芳烃的分析
稠环芳烃多为致癌物质。
固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：20%甲醇-水 ～100%甲醇 线性梯度淋洗，2%/min 流 速：1mL/min 柱 温：50 º C 柱 压：70 104 Pa 检测器：紫外检测器
basic principle and main separating types
第三节 固定相与流动相
stationary phase and mobile phase
第四节 影响分离的因素与操作条件选择
factors influenced separation and choice of operation condition
3.固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其 选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱 的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
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二、分离类型选择
choice of separation types
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三、 HPLC的应用
application of HPLC
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四、制备型液相色谱
preparative liquid chromatography
获得高纯物质（色谱纯）的有效方法。 半制备柱（内径8mm，长度15 ～ 30cm），一次制备量 ０.1～１mg；
1.色谱柱的柱容量（柱负荷）
对分析柱：不影响柱效时的最大进样量； 对制备柱：不影响收集物纯度时的最大进样量；
1. 影响分离的因素与提高柱效的途径
在高效液相色谱中, 液体的扩散系数仅为气体的万分之一 ，则速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，即：
• H=A+Cu
故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。
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•
液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故
降低传质阻力是提高柱效主要途径。
超载：进样量超过柱容量。柱效迅速下降，峰变宽。
超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子k降 低10%为宜。
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2. 液相制备色谱的方法
收集组分时，通常有以下情况： （1）可获得良好分离，主峰 使用制备柱，超载提高效率； （2）两主成分之间的小组分； 超载，分离切分使待分离组分成 为主成分（富集）后，再次分离 制备。
第五节 离子色谱法
ion chromatograph
第六节 超临界流体色谱
supercritical fluid chromatograph
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结束
第四节 影响分离的因素与操 作条件的选择
factors influenced separation and choice of operation condition
四、液相制备色谱
preparative liquid chromatography
Biblioteka Baidu
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一、影响分离的因素
factors influenced separation
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3. 制备型液相色谱
制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大、进
样量大、采用制备柱；柱后馏分收集器。
制备柱：内径20～50mm，柱长50cm。
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请选择内容
第一节 高效液相色谱的特点与仪器
feature and instrument of HPLC
第二节 基本原理与主要分离类型
•
由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 液相色谱中，不可能通过
•
增加柱温来改善传质。恒温
•
改变淋洗液组成、极性是
改善分离的最直接的因素。
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2.流速
流速大于0.5 cm/s时, H～u 曲线是一段斜率不大的直线。 降低流速，柱效提高不是很大。 但在实际操作中，流量仍是一 个调整分离度和出峰时间的重 要可选择参数。
第十一章 液相色谱分析法
high performance liquid chromatograph
一、影响分离的因素
factors influenced separation
二、分离类型的选择
choice of separation types
三、液相色谱的应用
application of HPLC