生物样品的采集、储存和预处理的SOP

生物样品的采集、储存和预处理的SOP

1. 生物样品的采集：服药前取空白血样，服药后取样点应包括吸收相，分布相，消除相；药浓度峰值前至少有4个点，峰后取6个点或6个以上点，峰时间附近应有足够的取样点。总取样点不少于11个，取样应持续到3 ～ 5个半衰的1/10 ～1/20。具体可依据文献报道及预试验结果确定具体采血时

期，或C

max

间点。于服药前（0 h）和各时间点，取前臂静脉血5mL，处理后，离心10 min ( 3000r.p.m)，分离血浆或血清样品置试管中。

2. 生物样品的储存:血浆、血清样品，尽快分离（24h内），冷冻保存；短期内分析，可置4℃冰箱内冷藏。长期分析，于－ 20℃冰箱内冷冻保存。

3. 生物样品的预处理:依据药物的理化性质，其酸碱性（pKa）、分子的亲脂性、挥发性、稳定性及可能的生物转化途径，制定相应的预处理方法。

a. 沉淀蛋白法

生成不溶性沉淀:

酸性试剂（三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸）

重金属盐类（锌盐、铜盐、银盐、汞盐）

盐析、脱水:

硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等中性盐。

甲醇、乙腈、丙酮等可与水混溶的有机试剂。

各种沉淀试剂使用情况表

b. 液-液萃取法

水相pH：碱性药物最佳pH应高于其p Ka 2 ～ 3个单位

酸性药物最佳pH应低于其p Ka 2 ～ 3个单位

常用的有机溶剂：正己烷、异辛烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、1，2-二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯（极性由依次小至大）。有机溶剂与水相容积比一般为 1：1或2：1。

选择提取溶剂的原则：对被测物有较大的亲和力；与水不互溶，极性较小；沸点适宜；不影响紫外检测；价廉、无毒、不易燃烧；化学性质稳定。