种子生活力测定的原理 ppt课件
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种子生活力测定原理及方法PPT课件
控制劣变试验、复合逆境活力测定、砖砂试验、幼苗生长测定 和四唑测定。
2012/03/10
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
2012/03/10
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
2012/03/10
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
《种子生活力测定》课件
根据测定方法、操作步骤和实验条件，判断测定 结果的准确性和可靠性。
种子发芽率
根据发芽率判断种子的发芽潜力，发芽率越高， 种子生活力越强。
种子活力指数
通过活力指数判断种子的综合性能，活力指数越 高，种子生活力越强。
测定结果的应用
农业生产的科学指导
根据测定结果，选择具有高生活力的种子用于农业生产，提高产 量和品质。
《种子生活力测定》 ppt课件
目录
子生活力测定的原理 • 种子生活力测定的操作流程 • 种子生活力测定结果的解读与应用 • 种子生活力测定的发展趋势与展望
01 种子生活力测定的概述
种子生活力的定义
01
种子生活力：指种子在适宜的条 件下能够正常发芽和生长的能力 。
素和外在条件。
生态学与环境科学
02
研究种子生活力与环境因子之间的关系，了解种子在不同环境
下的适应性。
农业技术与农学
03
将种子生活力测定应用于农业生产中，提高作物产量和品质，
促进农业可持续发展。
未来种子生活力测定的研究方向与展望
标准化与规范化
制定种子生活力测定的标准操作规程，推动测定方法的标准化和 规范化。
环境因素
适宜的环境条件是种子萌 发和生长的必要条件，如 温度、湿度、光照、土壤 等。
储存条件
种子的储存环境对其生活 力有很大影响，过湿、过 干、高温或低温都可能导 致生活力下降。
03 种子生活力测定的操作流 程
种子采集与准备
种子采集
选择健康、成熟的种子进行采集 ，确保种子的遗传品质和发芽潜
力。
种子筛选
种子生活力是指种子能够发芽并 长成正常植株的能力，是衡量种
子质量的重要指标。
种子发芽率
根据发芽率判断种子的发芽潜力，发芽率越高， 种子生活力越强。
种子活力指数
通过活力指数判断种子的综合性能，活力指数越 高，种子生活力越强。
测定结果的应用
农业生产的科学指导
根据测定结果，选择具有高生活力的种子用于农业生产，提高产 量和品质。
《种子生活力测定》 ppt课件
目录
子生活力测定的原理 • 种子生活力测定的操作流程 • 种子生活力测定结果的解读与应用 • 种子生活力测定的发展趋势与展望
01 种子生活力测定的概述
种子生活力的定义
01
种子生活力：指种子在适宜的条 件下能够正常发芽和生长的能力 。
素和外在条件。
生态学与环境科学
02
研究种子生活力与环境因子之间的关系，了解种子在不同环境
下的适应性。
农业技术与农学
03
将种子生活力测定应用于农业生产中，提高作物产量和品质，
促进农业可持续发展。
未来种子生活力测定的研究方向与展望
标准化与规范化
制定种子生活力测定的标准操作规程，推动测定方法的标准化和 规范化。
环境因素
适宜的环境条件是种子萌 发和生长的必要条件，如 温度、湿度、光照、土壤 等。
储存条件
种子的储存环境对其生活 力有很大影响，过湿、过 干、高温或低温都可能导 致生活力下降。
03 种子生活力测定的操作流 程
种子采集与准备
种子采集
选择健康、成熟的种子进行采集 ，确保种子的遗传品质和发芽潜
力。
种子筛选
种子生活力是指种子能够发芽并 长成正常植株的能力，是衡量种
子质量的重要指标。
种子生活力的测定PPT课件
• 生活力Seed viability：种子发芽的潜在能力 或种胚具有的生活力
种子生活力测定的必要性：
• 1、休眠种子必须进行生活力测定： • 2、快速预测种子发芽能力
1
第1页/共13页
一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看！
第13页/共13页
第3页/共13页
四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种：软化种子，活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦： 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米： 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中，35℃ 0.5-1h
第4页/共13页
⑷ 观察鉴定 小麦：观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色，但不定根原基体 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤 玉米：观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
第2页/共13页
三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL （辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢） 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因而不容易被染色；而丧失生活力 的种子，胚部细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入到细胞内，使胚部染色。
种子生活力测定的必要性：
• 1、休眠种子必须进行生活力测定： • 2、快速预测种子发芽能力
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一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看！
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四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种：软化种子，活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦： 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米： 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中，35℃ 0.5-1h
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⑷ 观察鉴定 小麦：观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色，但不定根原基体 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤 玉米：观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
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三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL （辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢） 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因而不容易被染色；而丧失生活力 的种子，胚部细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入到细胞内，使胚部染色。
种子生活力测定原理及方法讲课讲稿
2012/03/10
种科092 雷红琴
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• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间 表现的差异。
• 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽 率的种子批中，
• 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率 高的种子具有较高的活力，但两者不存在正相 关。
• 四、种子活力测定方法分类 种子活力测定方法达数十种，其分类方法
2012/03/10
种科092 雷红琴
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出苗（如陈种子发芽率虽正常，但早春播种出苗 率低）。
• 二、种子活力测定的重要意义（同读本；颜启 传）
• 1、高活力种子的生产优越性 • 高活力种子具有明显的生长优势和生产潜力。 • (1)提高田间出苗率：高活力种子播到田间后
出苗迅速，均匀一致，保证苗全苗壮和作物的 田间密度，为增产打下良好的基础。
2012/03/10
种科092 雷红琴
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活力测定有助于育种工作者在选择抗寒、抗病、 抗逆、早熟、丰产的作物新品种。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活
力三个指标，三者有密切的关系，却有完全不 同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或 种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分 率。
2012/03/10
种科092 雷红琴
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室 控制条件下)长成
• 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常 幼苗数占样品总数的百分率，即发芽率表示。
• 在下列情况下，如果鉴定正确，生活力测定与 发芽率测定结果
• 基本是一致的： • ①无休眠、无硬实或破除了休眠和硬实。 • ②没有感染病害。
第五章 种子生活力与活力测定
ISTA Working Sheets on Tetrazolium Testing, Volume I, 1st Edition, 2003 Volume I - Agricultural, Vegetable and Horticultural Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
Volume II, 1st Edition, 2003 Volume II - Tree and Shrub Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
（2）磷酸缓冲液常用来配制四唑染色液（Ph6.5-7.5） (1)ISTA法： 母液I：9.078g KH2PO4溶解于1000ml蒸馏水；
母液Ⅱ： 9.472gNa2HP04 或11.876g Na2HPO4· 2O溶解于 2H
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
Volume II, 1st Edition, 2003 Volume II - Tree and Shrub Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
（2）磷酸缓冲液常用来配制四唑染色液（Ph6.5-7.5） (1)ISTA法： 母液I：9.078g KH2PO4溶解于1000ml蒸馏水；
母液Ⅱ： 9.472gNa2HP04 或11.876g Na2HPO4· 2O溶解于 2H
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
种子生活力测定PPT课件
.
8
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗，不 要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情况 （可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活力 的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生活 力的种子。
有
无生活力的种子
生活Leabharlann 力的种子
.
9
任务5 计算： 种子生活力（%）=（有生活力的种子数／检测种子数）
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
.
1
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
.
2
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
.
3
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
×100%（保留整数） 先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
.
10
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载表
产地 送检样品重（g）
品种名称
重复
Ⅰ
Ⅱ
检验粒数
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
. 填表日期：
年月日
11
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
植物生理学实验6种子生活力的测定ppt课件
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
TTC还原反应如下：
氯化三苯基四氮唑
三苯甲腙
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
有生活力种子 占供试粒数的%
TTC
30
红墨水
30
BTB
30
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
注意事项
? 沿种胚中央准确切开，同粒 TTC/红墨水法各一半 ? TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
染料染色法 TTC法
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
?种子生活力（ seed viability ）：指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。
?种子活力（ seed vigor）：
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
思考题
三种方法测定种子生活力的理论依据有何不同 ?
第五章 种子的活力、劣变和寿命 作物种子学课件(共23张PPT)
4407.6
第二十三页，共23页。
• 80年代以来，我国开展了较为深入的种子活力研
究和应用。
活力种子
可指导我们(wǒ men)生产、选用高
进行种子活力测 正确评定种子质量等级和价格
定，及时了解种 掌握仓贮变化，改善仓贮条件
子活力状况
保证播种质量，一播全苗
妥善处理低活力种子
第六页，共3页。
二、种子劣变的发生和机理： 1. 活力下降和劣变发生 种子活力在达真正成熟时最高，然后便进入活力下降的 不可逆变化，这些不可逆变化的综合效应便称为种子劣变 (deterioration)。
应用(yìngyòng)此方
程可求算
种子要保持一定时间的寿命所要求的温度、
水分
例：一批水稻种子含水量10%，贮藏于10 ℃ ，平均寿命？
预测： LogP50 = 6.531 - 0.159 × 10-0.069 × 10 = 4.251
P50 = 17824〔天〕〔约49.5年〕
此方程简单，缺点是只能求平均寿命，而农业生产上要
细胞器损伤
萌发时修复能力降低——影响正常代谢
代谢的中间产物如乙醇、CO2、醛、酮、酸类、多 胺、丙二醛的积累使活 组织中毒
第八页，共23页。
生理活性物质破 坏与失衡
维生素氧化、损坏——酶活性下降、胚劣变 GA、CK减少，ABA增加——萌发受抑
谷胱甘肽氧化〔2GSH+1/2 O2 GSSG+H2O〕——蛋白合成受阻
种子(zhǒng zi)水分在 5~14% 范围内，每降低 1%，种子(zhǒng zi)寿命延长1倍； 贮藏温度在 1~50℃ 范围内，每降低 5℃ ，种子(zhǒng zi)寿命也延长1倍； 种子(zhǒng zi)平安贮藏的指标是： RH% + ˚ F ≤100
第二十三页，共23页。
• 80年代以来，我国开展了较为深入的种子活力研
究和应用。
活力种子
可指导我们(wǒ men)生产、选用高
进行种子活力测 正确评定种子质量等级和价格
定，及时了解种 掌握仓贮变化，改善仓贮条件
子活力状况
保证播种质量，一播全苗
妥善处理低活力种子
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二、种子劣变的发生和机理： 1. 活力下降和劣变发生 种子活力在达真正成熟时最高，然后便进入活力下降的 不可逆变化，这些不可逆变化的综合效应便称为种子劣变 (deterioration)。
应用(yìngyòng)此方
程可求算
种子要保持一定时间的寿命所要求的温度、
水分
例：一批水稻种子含水量10%，贮藏于10 ℃ ，平均寿命？
预测： LogP50 = 6.531 - 0.159 × 10-0.069 × 10 = 4.251
P50 = 17824〔天〕〔约49.5年〕
此方程简单，缺点是只能求平均寿命，而农业生产上要
细胞器损伤
萌发时修复能力降低——影响正常代谢
代谢的中间产物如乙醇、CO2、醛、酮、酸类、多 胺、丙二醛的积累使活 组织中毒
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生理活性物质破 坏与失衡
维生素氧化、损坏——酶活性下降、胚劣变 GA、CK减少，ABA增加——萌发受抑
谷胱甘肽氧化〔2GSH+1/2 O2 GSSG+H2O〕——蛋白合成受阻
种子(zhǒng zi)水分在 5~14% 范围内，每降低 1%，种子(zhǒng zi)寿命延长1倍； 贮藏温度在 1~50℃ 范围内，每降低 5℃ ，种子(zhǒng zi)寿命也延长1倍； 种子(zhǒng zi)平安贮藏的指标是： RH% + ˚ F ≤100
种子生活力测定的原理PPT课件
结果计算到近似整数
2021/7/27
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第23页/共29页
种 子 检 验 结 果 报 告 单
第24页/共29页
第25页/共29页
第26页/共29页
第27页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法（BTB法） • 红墨水染色法 • 软Ｘ射线造影技术
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
2021/7/27
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第14页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h) 斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆：凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3不染色，或子叶表面有小范围。
2021/7/27
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第22页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
（6）计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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种 子 检 验 结 果 报 告 单
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法（BTB法） • 红墨水染色法 • 软Ｘ射线造影技术
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h) 斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆：凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3不染色，或子叶表面有小范围。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（6）计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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的四唑溶液； ➢ 种子染色时间与四唑溶液浓度有关。
浓度增加，染色反应所需时间也随之缩短，从染色效果看，以较低浓度为宜； 测定时，要求四唑溶液的 ph 值在 6 ～7 范围之内。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
△ 配制方法
称取 1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成 1.0% 四唑溶液；
能发芽的种子 暂时不能发芽而具有生命力的休眠种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
2、测定种子生活力的意义
（1）休眠的种子必须进行生活力测定 （2）快速预测种子发芽能力
第六章 种子生活力测定的原理和方法
二、种子生活力四唑染色测定（TTC test or TZ test）
1、发展简史
解于1000 ml 蒸馏水； ➢ 然后取 2 份母液Ⅰ和 3 份母液Ⅱ混合即成。
AOSA 规程法
➢ 在1000 ml 蒸馏水中加入 5.45 g NaH2PO4 和 3.79 g Na2HPO4 ，充分溶解即成。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
③ 乳酸苯酚透明液
（2）染色前的样品准备
目的：使四唑溶液快速和充分渗入种子全部活组织，加快染色反 应，采用适当方法使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来。
a) 不需预湿和附加准备：如苜蓿种子
b) 采用缓慢预湿后不需样品准备：如大豆种子等
c) 穿刺或切开胚乳：小粒牧草等种子
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等 e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子 f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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第六章 种2020
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
2、原理
无色的的三苯基四氮唑被种子吸收后，在胚部活细胞 中脱氢酶的作用下，还原成为红色的、稳定、不扩散的 三苯基甲 ，这样，就可根据染色的部位和深浅来区分种 子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
① 四氮唑：2,3,5-氯（溴）化三苯基四氮唑
（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride or Bromide） 简
称：四唑或红四唑 缩写：TTC， TTB，TZ
△ 理化性质
白色或淡黄色的粉剂，熔点243℃； 当温度达到245℃时就会分解，易溶于水，具有微毒； 遇到直射光线时会被还原成粉红色，
④ 用于小粒豆类种子或牧草种子,染色后种皮、稃壳或胚乳变为透
明。
④ 过氧化氢溶液
1. 用于某些牧草种子（黑麦草）的预湿浸种，加快酶的活化和吸
胀。
⑤ 杀菌剂和抗生素 1. 延缓衰弱种子的劣变进程。 ⑥ 胶液硬化剂
1. 05.08有.20些20种子浸种后，种皮表面出现胶液而变得非常光滑1，2 难以拿
第六章 种子生活力测定的原理和方法
✓ 所以该试剂需用棕色瓶装盛，并用黑纸外面包装。 ✓ 已配好的四唑溶液应装入棕色玻璃瓶里，存放在暗处。 ✓ 在进行种子染色时，也许将其放在暗处和弱光处进行。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
△ 测定方法
建议使用 0.1%～1.0% 四唑盐的水溶液
➢ 切开的种子用 0.1%～0.5% 浓度的四唑溶液； ➢ 整个胚、整粒种子或斜切、横切或穿刺的种子需用 1.0% 浓度
1942年由德国H. Lakon发明 1950年ISTA成立四唑测定技术委员会 1953年ISTA世界大会第一次将四唑测定列入国际种子检验规程 《四唑测定手册》（Handbook on Tetrazolium Test），Moore，
1984年，650多个属和种 1995年我国将四唑测定列入农作物种子检验规程
称取 0.1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成 0.1% 四唑溶液；
可用 NaOH 或 NaHCO3 溶液调节 ph 值。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
② 磷酸缓冲液
ISTA TZ手册法
➢ 母液Ⅰ：称取 9.078 g 磷酸二氢钾（KH2PO4）溶解于1000 ml 蒸馏水中； ➢ 母液Ⅱ：称取 9.472 g 磷酸氢二钠（Na2HPO4）或 11.876 g Na2HPO4 ·2H2O 溶
3、特点
➢ 原理可靠 ➢ 结果准确(与标准发芽率误差一般不超过3-5%) ➢ 不受休眠限制 ➢ 简便快速 6-24h Vitascope 20-30min ➢ 成本低廉
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
4、适应范围
✓ 测定休眠种子的发芽潜力 ✓ 测定收获后马上要播种的种子的发芽潜力 ✓ 测定发芽缓慢的种子的发芽潜力 ✓ 测定发芽末期未发芽种子的生活力 ✓ 测定种子收获或加工期间损伤种子的生活力 ✓ 解决发芽期间遇到的问题 ✓ 查明种子贮藏期间劣变衰老程度 ✓ 时间紧迫，调种时快速测定种子生活力
6、测定程序
（1）预处理 预措：是指在种子预湿前除去种子外部的附属物和在种子
非要害部位弄破种皮。
预湿: 为加快种子充分吸湿，软化种皮，便于样品准备，以
提高染色的均匀度，通常种子在染色前要进行预湿。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义 二、种子生活力四唑染色测定 三、种子生活力的其他测定方法
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义
1、种子生活力（seed viability）的概念
种子生活力是指种子发芽的潜在能力和种胚所具有的生命 力。通常是指一批种子中具有生命力的种子数占种子总数的 百分率。
浓度增加，染色反应所需时间也随之缩短，从染色效果看，以较低浓度为宜； 测定时，要求四唑溶液的 ph 值在 6 ～7 范围之内。
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5、所需试剂
△ 配制方法
称取 1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成 1.0% 四唑溶液；
能发芽的种子 暂时不能发芽而具有生命力的休眠种子
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2、测定种子生活力的意义
（1）休眠的种子必须进行生活力测定 （2）快速预测种子发芽能力
第六章 种子生活力测定的原理和方法
二、种子生活力四唑染色测定（TTC test or TZ test）
1、发展简史
解于1000 ml 蒸馏水； ➢ 然后取 2 份母液Ⅰ和 3 份母液Ⅱ混合即成。
AOSA 规程法
➢ 在1000 ml 蒸馏水中加入 5.45 g NaH2PO4 和 3.79 g Na2HPO4 ，充分溶解即成。
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5、所需试剂
③ 乳酸苯酚透明液
（2）染色前的样品准备
目的：使四唑溶液快速和充分渗入种子全部活组织，加快染色反 应，采用适当方法使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来。
a) 不需预湿和附加准备：如苜蓿种子
b) 采用缓慢预湿后不需样品准备：如大豆种子等
c) 穿刺或切开胚乳：小粒牧草等种子
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等 e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子 f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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2、原理
无色的的三苯基四氮唑被种子吸收后，在胚部活细胞 中脱氢酶的作用下，还原成为红色的、稳定、不扩散的 三苯基甲 ，这样，就可根据染色的部位和深浅来区分种 子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。
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5、所需试剂
① 四氮唑：2,3,5-氯（溴）化三苯基四氮唑
（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride or Bromide） 简
称：四唑或红四唑 缩写：TTC， TTB，TZ
△ 理化性质
白色或淡黄色的粉剂，熔点243℃； 当温度达到245℃时就会分解，易溶于水，具有微毒； 遇到直射光线时会被还原成粉红色，
④ 用于小粒豆类种子或牧草种子,染色后种皮、稃壳或胚乳变为透
明。
④ 过氧化氢溶液
1. 用于某些牧草种子（黑麦草）的预湿浸种，加快酶的活化和吸
胀。
⑤ 杀菌剂和抗生素 1. 延缓衰弱种子的劣变进程。 ⑥ 胶液硬化剂
1. 05.08有.20些20种子浸种后，种皮表面出现胶液而变得非常光滑1，2 难以拿
第六章 种子生活力测定的原理和方法
✓ 所以该试剂需用棕色瓶装盛，并用黑纸外面包装。 ✓ 已配好的四唑溶液应装入棕色玻璃瓶里，存放在暗处。 ✓ 在进行种子染色时，也许将其放在暗处和弱光处进行。
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5、所需试剂
△ 测定方法
建议使用 0.1%～1.0% 四唑盐的水溶液
➢ 切开的种子用 0.1%～0.5% 浓度的四唑溶液； ➢ 整个胚、整粒种子或斜切、横切或穿刺的种子需用 1.0% 浓度
1942年由德国H. Lakon发明 1950年ISTA成立四唑测定技术委员会 1953年ISTA世界大会第一次将四唑测定列入国际种子检验规程 《四唑测定手册》（Handbook on Tetrazolium Test），Moore，
1984年，650多个属和种 1995年我国将四唑测定列入农作物种子检验规程
称取 0.1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成 0.1% 四唑溶液；
可用 NaOH 或 NaHCO3 溶液调节 ph 值。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
② 磷酸缓冲液
ISTA TZ手册法
➢ 母液Ⅰ：称取 9.078 g 磷酸二氢钾（KH2PO4）溶解于1000 ml 蒸馏水中； ➢ 母液Ⅱ：称取 9.472 g 磷酸氢二钠（Na2HPO4）或 11.876 g Na2HPO4 ·2H2O 溶
3、特点
➢ 原理可靠 ➢ 结果准确(与标准发芽率误差一般不超过3-5%) ➢ 不受休眠限制 ➢ 简便快速 6-24h Vitascope 20-30min ➢ 成本低廉
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4、适应范围
✓ 测定休眠种子的发芽潜力 ✓ 测定收获后马上要播种的种子的发芽潜力 ✓ 测定发芽缓慢的种子的发芽潜力 ✓ 测定发芽末期未发芽种子的生活力 ✓ 测定种子收获或加工期间损伤种子的生活力 ✓ 解决发芽期间遇到的问题 ✓ 查明种子贮藏期间劣变衰老程度 ✓ 时间紧迫，调种时快速测定种子生活力
6、测定程序
（1）预处理 预措：是指在种子预湿前除去种子外部的附属物和在种子
非要害部位弄破种皮。
预湿: 为加快种子充分吸湿，软化种皮，便于样品准备，以
提高染色的均匀度，通常种子在染色前要进行预湿。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义 二、种子生活力四唑染色测定 三、种子生活力的其他测定方法
05.08.2020
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义
1、种子生活力（seed viability）的概念
种子生活力是指种子发芽的潜在能力和种胚所具有的生命 力。通常是指一批种子中具有生命力的种子数占种子总数的 百分率。