植酸酶

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植酸酶活性最适条件测定
一、实验目的
1、掌握酶活力的测定方法以及影响酶活力的因素
2、确定植酸酶活力的最佳条件
二、实验原理
植酸酶酶活性:样本在植酸钠浓度为5.0mol/L,温度37℃,pH5.5的条件下,每分钟从植酸钠中释放1µmol无极磷,即一个单位以U/ml或U/L计量。

植酸水解方程式:
三、根据实验数据,通过作图分析得出植酸酶活性最佳条件
1、酶活性随pH的变化
由图可知当pH值5左右时酶活性最高,所以在该温度下植酸酶的最适pH在5左右。

2、离子对酶活性的影响
通过柱形图可以看出,钾离子和镁离子的加入对酶活性几乎没有影响,加入钙离子和钠离子对酶活性具有促进作用,其中钙离子的作用大于钠离子,钙离子的加入是酶活性提高了大约50%,而锌离子和铜离子的加入对酶活性具有抑制作用。

3、酶活性随温度的变化
通过酶活性随温度变化的曲线,得知酶的活性随温度升高而增大,当到达一定温度后,随温度增加而减小,曲线显示当温度为45℃左右时是植酸酶的最适温度。

4、酶的稳定性随时间的变化
由实验数据作图知,植酸酶的稳定性随时间呈现指数下降的趋势,而且刚分离出的酶的稳定性最大。

5、双倒数曲线
做出双倒数曲线,使1/ v 对1/[S]作图,可以获得一条直线。

从直线与x轴的截距可以得到1/Km的绝对值;而1/Vmax是直线与y轴的截距。

得Vm=0.2955 Km=0.2525
6、酶的初速度测定37℃
酶醋的反应的速度随时间增大,且增大的越来越慢,最后接近恒定。

7、铜离子和锌离子浓度对酶的影响
由离子对植酸酶的影响柱形图知,铜离子和锌离子对植酸酶的活性有抑制作用,通过数据分析得知,随着铜离子和锌离子浓度的提高,对植酸酶的活性抑制作用越明显。

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