血糖浓度测定实验详细解答

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一、题目:葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度血糖测量仪:

糖尿病患者需要经常独取静脉血以测定血糖,给患者造成一定的不便。有条件的患者可以自备l台血糖检验仪,所测指血或耳血为毛细血管的血糖值,略高于静脉血糖值。但要注意,当寒冷、水肿及血管痉挛时,稍受影响,其测定范围为〔0.5~27.7毫摩尔/升(10~500毫克/分升)〕。目前市场上常见的血糖仪按照测糖技术可以分为电化学法测试和光反射技术测试两大类。前者是酶与葡萄糖反应产生的电子再运用电流记数设施,读取电子的数量,再转化成葡萄糖浓度读数。后者是通过酶与葡萄糖的反应产生的中间物(带颜色物质),运用检测器检测试纸反射面的反射光的强度,将这些反射光的强度,转化成葡萄糖浓度,准确度更高。

目前市场上尚有笔式及其他型号微量血糖测试仪供使用。90年代以来国外研制出无损伤血糖检测仪,是用电脑化的近红外线透过皮肤面测量其吸收变化,可在5秒钟内测出2.22~22.2毫摩尔/升(40~400毫克/分升)血糖。

二、实验目的

教学目的

学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上,掌握血糖的正常参考值,掌握肾上腺素对血糖浓度的影响,熟悉尿糖的半定量检测。

教学要求

(一)掌握血糖的正常参考值,复习血糖的来源与去路;掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。

(二)熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。

(三)熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理,血清的制备,血糖浓度及血糖增高率的计算,尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。

(四) 了解动物耳缘静脉取血法,血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。

教学内容

(一)实验原理:血糖的正常参考值,血糖的来源与去路,血糖调节的几种因素,肾上腺素对血糖浓度的影响机理,血糖测定的临床意义,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理;尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。

(二)实验操作:血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响(收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血,制备血清,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度);尿糖半定量检测。

(三)计算血糖浓度及血糖增高率。

三、血糖定义:

血糖(BS,BG)指血液中所含的葡萄糖。正常人血糖浓度相对稳定,饭后血糖可以暂时升高,但不超过180mg/dl,空腹血液浓度比较恒定,正常为70-110mg/dl(3.9-6.1mmol/L)。血中的糖类,绝大多数情况下都是葡萄糖,还有乳糖、半乳糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖,所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。

糖分是我们身体必不可少的营养之一。人们摄入谷物、蔬果等,经过消化系统转化为单糖(如葡萄糖等)进入血液,运送到全身细胞,作为能量的来源。如果一时消耗不了,则转化为糖原储存在肝脏和肌肉中,肝脏可储糖70~120克,约占肝重的6~10%。细胞所能储存的肝糖是有限的,如果摄入的糖分过多,多余的糖即转变为脂肪。当食物消化完毕后,储存的肝糖即成为糖的正常来源,维持血糖的正常浓度。在剧烈运动时,或者长时间没有补充食物情况,肝糖也会消耗完。此时细胞将分解脂肪来供应能量,脂肪的10%为甘油,甘油可以转化为糖。脂肪的其它部分亦可通过氧化产生能量,但其代谢途径和葡萄糖是不一样的。人类的大脑和神经细胞必须要糖来维持生存,必要时人体将分泌激素,把人体的某些部分(如肌肉、皮肤甚至脏器)摧毁,将其中的蛋白质转化为糖,以维持生存。象过去在图片上看到

的那些难民个个骨瘦如材,就是这个原因。人体所有的细胞所需的糖都由血液来输送,所

以维持血液中糖的恰当的浓度是很重要的。

四、血糖的来源和去路

来源

1、食物,米、面、玉米、薯类、砂糖(蔗糖)、水果(果糖)、乳类(乳

糖)等,经胃肠道的消化作用转变成葡萄糖,经肠道吸收入血液成为血糖。

★为什么要在饥饿条件下采血?血糖主要来源是食物,进食会增高血糖浓度。

2、储存于肝脏中的肝糖原和储存于肌肉的肌糖原、脂肪等分解成葡萄糖入血。

3、非糖物质即饮食中蛋白质、脂肪分解氨基酸、乳酸、甘油等通过糖异生作用而转化成葡萄糖。

糖异生:体内从非糖类物质如氨基酸、丙酮酸、甘油等合成葡萄糖的代谢,是维持血糖水平的重要过程。虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应,但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应,绕过酵解过程中不可逆的三个反应。糖异生保证了机体的血糖水平处于正常水平。糖异生的主要器官是肝。肾在正常情况下糖异生能力只有肝的十分之一,但长期饥饿时肾糖异生能力可大为增强。糖异生作用的主要生理意义是保证在饥饿情况下,血糖浓度的相对恒定。

去路

1、葡萄糖在组织器官中氧化分解供应能量

2、在剧烈活动时或机体缺氧时,葡萄糖进行无氧酵解,产生乳酸及少量能量以补充身体的急需;

3、葡萄糖可以合成肝糖元和肌糖元储存起来;多余的葡萄糖可以在肝糖转变为脂肪等。

4、当血糖浓度高于8.9mmol/L(160mg/100ml)时,则随尿排出,形成糖尿。糖酵解:葡萄糖或糖原在组织中进行类似发酵的降解反应过程。最终形成乳酸或丙酮酸,同时释出部分能量,形成ATP供组织利用。糖酵解在细胞的细胞质中进行。早先人们只知道糖在无氧环境下可降解为乳酸,但今天人们终于清楚知道,不论有氧还是无氧环境,糖会经过同样的过程分解为丙酮酸。不同的则是在有氧条件下,丙酮酸会被丙酮酸脱氢酶转化为乙酰辅酶A,进而进入三羧酸循环完全被分解为二氧化碳。在原核生物和真核生物的大部分缺氧细胞或组织(骨骼肌)中,丙酮酸会转化成乳酸,或者像糖类被酵母分解那样,转化为乙醇和二氧化碳(CO2)。

五、血糖的调节

人体正常血糖含量3.89-6.11mmol/L

血液浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制,精细地控制着血糖的来源与去路,使之达到动态平衡。

(一)神经系统的调节作用神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过以下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌,后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的。下丘脑一方面通过内脏神经作用于肾上腺髓质,刺激肾上腺素的分泌;另一方面也作用于胰岛α-细胞,使其分泌胰高血糖素;同时还可以直接作用于肝。三方面共同作用的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化,使糖原

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