1型糖尿病大鼠模型制备经验.

第18卷第3期2010年9月
四川解剖学杂志
SICHUAN JOURNAL OF ANATOMY
Vol.18No.3
September2010
d oi:10.3969/j.is sn.1005-1457.2010.010
Ñ型糖尿病大鼠模型制备经验
李娜娜1马淑君2周立1
1(新乡医学院人体解剖学教研室,新乡4530032
2(新乡医学院检验系,新乡4530032
=摘要>目的探讨Ñ型糖尿病大鼠模型制作方法和注意事项。

方法一次性大剂量注射链脲佐菌素(ST Z诱导Ñ型糖尿病大鼠模型。

结果一般情况观察:大鼠多饮、多食、多尿、消瘦明显。

体重:实验组在1、2、4、8、12周和对照组同期组比较有显著差异(P<0105;实验组内1、2、4、8、12周两两比较有显著差异(P<0105。

尾静脉血糖:实验组在
1、2、4、8、12周和对照组同期组比较有显著差异(P<0105;实验组诱导前与1、2、4、8、12周比有显著差异(P<0105。

结论通过腹腔一次大剂量注射ST Z(55mg/kg可以严重损伤胰岛,引起与Ñ型糖尿病相似的症状。

=关键词>链脲佐菌素;糖尿病;动物模型
=中图分类号>R332=文献标识码>A=文章编号>1005-1457(201003-30-03
Experience of Prepation for TypeÑDiabetic Rat Model
Li Nana1Ma Shujun2Zhou Li1
1(Dep artment of H uman Anatomy,X inx iang M ed ica l Colleg e,X inx
iang4530032,Ch ina
2(Dep artment of Insp ection,X inx iang M ed ic al Colleg e,X inx ian
g4530032,China
=Abstract>Objective T o ex plor e t he metho d of establishing ty peÑdiabetic rat mo del.Methods SD r ats w ere injec-ted intraper itoneally w ith55mg/kg st reptozoto
cin(ST Zonce to induce the ty peÑdiabetes models.Results T he rats in ex per imenta l gr oups had ty pical t ypeÑdiabetic symptoms,such as the incr ease of diet,drinking,urine and t he decrease of body w eig ht.Co mpa red w ith no rmal g ro ups,the weig ht o f rats was decreased sig nificantly in ex per imental gr oups(P<pared w ith no rmal g ro ups,the blo od sug er of rats in ex per imental gr oups was increased signif-i
cantly(P<0105.T here w ere signif icant differences betw een each ex per imental g roup(P<0105.C onclusion Rat model w ith typeÑdiabetes mellitus could be induced by injecting intraperit onea lly hig h dose ST Z into rats.
=K ey w or ds>Str epto zo tocin(ST Z;Diabetes mellitus;A nima l model
Ñ型糖尿病是具有一定遗传基础,在多种环境因素触发下,由T淋巴细胞介导的自身免疫系统疾病。

Ñ型糖尿病致死致残率非常高,给人类的健康带来灾难,其发病机制以及病理生理过程复杂,预防和治疗一直是医学界的一大难题,因此Ñ型糖尿病动物模型的研制对研究1型糖尿病的发病机理及治疗具有重要意义[1]。

1材料和方法
1.1主要试剂
链脲佐菌素(ST Z购于美国Sig ma公司。

作者简介:李娜娜(1979-,女,河南人,助理实验师,硕士。

1.2实验动物及分组
健康雄性SD大鼠[2]体重250g~300g,共45只,购于新乡医学院动物中心。

随机选择20只为正常对照组(Normal,余下的25只为实验组。

1.3模型制作
腹腔一次性大剂量注射ST Z(55mg/kg制作Ñ型糖尿病模型,3d后乙醚麻醉采尾静脉血糖1617 m mol/L以上为造模成功。

观察一般情况并在1、2、4、8、12周测体重及血糖值。

1.4统计学处理
实验数据以
x?s表示,SPSS1210软件完成统计处理,不同时段数据分析用配对t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用两两比较
第3期李娜娜等:Ñ型糖尿病大鼠模型制备经验
的t检验,以P<0105为差异有显著性意义。

2结果
2.1一般情况观察
实验组大鼠多饮、多食、多尿、消瘦明显,逐渐出现精神倦怠、毛发枯黄、偏瘫、白内障、坏疽等症状。

成模4周后,出现一次死亡高峰期:先是多尿,多饮、食欲减退、烦躁,呼吸深快继而出现尿量减少,嗜睡甚至昏迷。

类似临床患者由于胰岛素严重缺乏,糖代谢紊乱急剧加重产生的糖尿病酮症酸中毒(DKA,需及时采取胰岛素治疗。

2.2体重
对照组大鼠体重正常增长,实验组大鼠体重逐渐下降。

实验组1、2、4、8、12周与对照组同时期比较有明显差异,具有统计学意义(P<0105。

实验组1、2、4、8、12周组内两两比较差异显著,具有统计学意义(P<0105(见表1。

2.3尾静脉血糖
实验组1、2、4、8、12周与对照组同时期比较有明显差异,具有统计学意义(P<0105。

实验组诱导前与1、2、4、8、12周组比较差异显著具有统计学意义
(P<0105(见表2。

表1不同时期各组大鼠体重(g
Tab.1Body weight of rats in different periods(g
组别诱导前1周2周4周8周12周
对照组245?27.6258?26.3271?30.5286?31.4301?30.4322?29.6
实验组247?25.5243?28.4*#232?27.2*#221?29.7*#205?25.6*#189?27.4*#
注:*P<0105,实验组1、2、4、8、12周与对照组同时期比较有明显差异;#P<0105,实验组1、2、4、8、12周组内两两比较差异显著。

表2不同时期各组大鼠尾静脉血糖(mmol/L
T ab.2The tail vein blood glucose of the rats in Different periods
组别诱导前1周2周4周8周12周
对照组 4.5?0.27 4.5?0.22 4.6?0.31 4.7?0.23 4.7?0.21 4.6?0.46
实验组 4.4?0.37#20.5?2.16*20.4?1.51*21.1?1.59*21.3?2.14*21.1?2.50*
注:*P<0105,实验组1、2、4、8、12周与对照组同时期比较有明显差异;#P<0105,实验组诱导前与1、2、4、8、12周组比较差异均显著。

3讨论
通过腹腔一次大剂量注射ST Z(55mg/kg可以严重损伤胰岛,造成胰岛素分泌的绝对量较少,引起与Ñ型糖尿病相似的症状:多饮、多食、多尿、消瘦明显,晚期出现白内障、坏疽、酮症酸中毒。

与其他Ñ型糖尿病制作方法相比,STZ造模长期稳定性好,不易反弹,动物饲养条件易达到,经济实用[3-5]。

但STZ 制作Ñ型糖尿病大鼠模型有很多注意事项,本文总结如下:
3.1Ñ型糖尿病大鼠模型造模前期
3.1.1动物饲养所有大鼠实验均在相同环境下饲养,单只单笼。

若普通级动物房,应保证室内通风干燥,无嘈杂,冬季应注意保暖。

体重过大或过小造模后死亡率高;环境温度湿度等的不适均会导致大鼠心情烦躁易怒,易给造模时操作带来难度。

3.1.2血糖检测尾静脉采血,检测每只大鼠的血糖值(正常血糖值范围
310~510mm ol/L,取血糖值正常的大鼠进行造模实验。

采血时注意无菌操作,避免挤压采血区以免组织液溢出影响血糖值。

3.1.3禁食造模前需禁食12~18h,时间过短成模率低,时间过长死亡率高。

此时期给予充足的水分。

3.2Ñ型糖尿病大鼠模型造模
由于尾静脉注射不容易寻找且剂量不易控制,因此常选择右下腹为腹腔注射点。

值得注意的是,由于造模后抵抗力低下,所以给药前后应消毒皮肤。

STZ 剂量为50~65mg/kg之间,一次或两次注射均可, ST Z为淡黄色粉末,性质不稳定,冰浴溶解后20m in 内用完,一般溶解1次可造模6~8只大鼠。

注射完毕后大鼠归笼,立即给予足量食物及水。

如不及时给予,造模早期1~2h,由于胰岛B细胞破坏,大量胰岛素释放引起低血糖而死亡。

3.3Ñ型糖尿病大鼠模型造模后期
3.3.1造模后16h由于血糖激增引起酮症酸中毒,此时期有少量的死亡率。

腹腔注射胰岛素后降低此时期的死亡率。

3.3.2造模后2d出现多饮多食多尿,一般饮水量每天由50m l增至200m l以上。

此时期饮水的质和量都要保证,我们一般用凉开水。

糖尿病大鼠排尿过
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四川解剖学杂志第18卷
多,不适合用塑料鼠笼,用不锈钢干养式或湿养式鼠笼,只有塑料鼠笼时垫料应该一天换2次。

3.3.3血糖检测采血前采用乙醚麻醉,这样可减少应激带来的血糖升高。

3d后,测量血糖1617 mmo l/L以上为造模成功。

参考文献
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(上的接第22页;Continued f rom Page22
在发酵过程中可生成黄霉素,且印尼豆腐中添加了少量甲醛(印尼地处赤道附近,炎热的天气易使豆腐变质,少量甲醛有防变质作用,故记忆力的减退可能不是源于豆腐而是由甲醛等有害物质造成的。

而本实验的普通水豆腐在用于喂养小鼠前并无如上述印尼豆腐的处理过程,因而此实验结果可能与印尼豆腐影响有所不同。

(3普通豆腐含多种营养物质如氨基酸、矿物质、磷、钙等,其对人的健康非常有益。

其富含的卵磷脂可有效防治心脑血管疾病,增加脑血供,促进脑功能活动的运行。

不仅如此,实验过程中我们观察到大剂量组老年小鼠较之模型组饮食量明显增加,形体肥硕,毛发光亮,活动频繁,因而适量豆腐可能有维持小鼠生理机能正常运行,进而保护其脑组织及提高记忆力的功能。

(4实验结果豆腐大剂量组小鼠记忆力显著提高,而食用豆腐的中小剂量组小鼠记忆力无明显变化可能是因为其平均食用的豆腐量较少,其营养及防治疾病的作用不明显所致。

(5我们进行的这项实验是探索短期内大量食用普通豆腐对学习记忆能力的影响,而对前述报道的印尼老人,他们则是终身长期食用印尼豆腐,因而豆腐使其记忆减退可能是一个长期漫长过程。

长期食用普通豆腐对学习记忆能力的影响有待进一步的实验才能明确。

参考文献
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