间充质干细胞PPT课件
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间充质干细胞培训课件
运用MSCs 的特性，通過细胞载药的形式可以实 現紫杉醇等經典小分子抗肿瘤药物的积极靶向效 果以提高疗效。
如极具侵袭性的脑多形性胶质母细胞瘤，肿瘤易 扩散至周围脑实质细胞，既有的药物难以实現 有效靶向。运用MSC 的肿瘤靶向及寻找转移灶 的特性，可使用基因修饰的MSC 作為手术後的 佐剂，清除残存肿瘤细胞及迁移的瘤细胞。
体转化因
如通過過体現增長MSCs分泌IL-12、IL-2、TSP-1、 IFN-α、 IFN-β、 IFN-γ等抗瘤因子，能有效抑 制肿瘤增殖、增進肿瘤细胞凋亡，從而增長试验動 物的存活率。
运用体既有胞嘧啶脱氨酶的MSCs迁移汇集于肿瘤 部位後，通過此酶的转化作用使注入体内無毒的 前药5-FC(5氟胞嘧啶）转化形成5-FU，在肿瘤部 位发挥抗癌作用。
• 脂肪源性间充质干细胞
研究发現從人脐带中分离出的hUCMSC, 其细胞含量、增殖能力均优于BMSC，經多 次传代扩增仍能保持旺盛功能。它不体現或低 体現免疫排斥有关標识（MHC I类分子呈低
表 达，不体現MHC II类分子），免疫原性比
BMSC 低，且取材以便，無伦理學争议，是目前较為
理 想的再生醫學干细胞治疗的种子细胞之壹。
调 ➢M整STC细s胞可的产活生化對和应增的殖来生调長控因免子疫和应细答胞，可因防子止 增和治進疗组移织植损物伤抗的宿修主病复和自身免疫性疾病。
如产生骨形成蛋白1增進 骨、肌腱、软骨 的损伤修复；
➢ MSCs定向迁移至病变部位（趋向性、归巢
現象）
体内植入的MSCs在损伤组织局部微环境
的作用 下M，SC穿s 分越泌血多管种内细皮胞细因子胞，，包迁括移生定長位因于子、损趋伤部
② 不体現造血细胞表面標志：如CD45、 CD34、
脐带间充质干细胞课件课件
者术中均未发生严重并发症，术后无不 良反应。
第30页，幻灯片共39页
12例肝硬化患者脐带间充质干细胞
移植前后实验室指标变化
ALB(g/L) ALT(U/L) TBIL(μmol/L) PT(s)
移 植 前 30.69±4.32 122.78±89.32 35.32±21.61 17.89±4.49
第22页，幻灯片共39页
间充质干细胞质量要求
• 细菌检测
• 内毒素检测 • 革兰氏检测
• 支原体检测
• 活性检测≥90%
阴性
第23页，幻灯片共39页
细胞发放
• 1.细胞的保存(基质：生理盐水或者保存液） • 2.运输要求：时间、温度 • 3.病人信息填写完整 • 4.样本检测合格
第24页，幻灯片共39页
为慢性乙型肝炎，肝硬化, ChildPugh分级B级9例，C级3例。健康婴儿 脐带提取间充质干细胞经实验室传代、
扩增，取108制成40ml混悬液，第一次
经肝动脉注入，第二次以后为静脉输
注，每周一次，共4次。4周后复查生
化指标。
第29页，幻灯片共39页
结果
食欲改善、体力好转11例（91.66%）；
腹胀减轻11例（91.66%）；腹水减少、 下肢浮肿减轻10例（83.33%）。12例患
第18页，幻灯片共39页
间充质干细胞原代培养
• 细胞补液和换液（原代培养）
• 1. 制备五天补液（观察是否有细胞爬出）
• 2.八天换液
第19页，幻灯片共39页
间充质干细胞的冻存
• 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流
式（CD90+、CD105+、CD166+） • 冷冻保护剂（胎牛血清+DMSO） 配制：
第30页，幻灯片共39页
12例肝硬化患者脐带间充质干细胞
移植前后实验室指标变化
ALB(g/L) ALT(U/L) TBIL(μmol/L) PT(s)
移 植 前 30.69±4.32 122.78±89.32 35.32±21.61 17.89±4.49
第22页，幻灯片共39页
间充质干细胞质量要求
• 细菌检测
• 内毒素检测 • 革兰氏检测
• 支原体检测
• 活性检测≥90%
阴性
第23页，幻灯片共39页
细胞发放
• 1.细胞的保存(基质：生理盐水或者保存液） • 2.运输要求：时间、温度 • 3.病人信息填写完整 • 4.样本检测合格
第24页，幻灯片共39页
为慢性乙型肝炎，肝硬化, ChildPugh分级B级9例，C级3例。健康婴儿 脐带提取间充质干细胞经实验室传代、
扩增，取108制成40ml混悬液，第一次
经肝动脉注入，第二次以后为静脉输
注，每周一次，共4次。4周后复查生
化指标。
第29页，幻灯片共39页
结果
食欲改善、体力好转11例（91.66%）；
腹胀减轻11例（91.66%）；腹水减少、 下肢浮肿减轻10例（83.33%）。12例患
第18页，幻灯片共39页
间充质干细胞原代培养
• 细胞补液和换液（原代培养）
• 1. 制备五天补液（观察是否有细胞爬出）
• 2.八天换液
第19页，幻灯片共39页
间充质干细胞的冻存
• 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流
式（CD90+、CD105+、CD166+） • 冷冻保护剂（胎牛血清+DMSO） 配制：
成体干细胞(间充质干细胞,造血干细胞)ppt课件
造血干细胞的微环境
骨髓微环境中的一些转录因子和蛋白分子对 造血干细胞的移行、增殖和分化起了调控作用。
干细胞因子
与干细胞表面的 C-kit 受体结合 GATA-2对造血前体细胞的增殖与存活是关键的 加强细胞的粘附作用 GATA-1调节红系、巨核细胞等的存活、增殖 参与维持干细胞数目的恒定 和成熟
PU1的表达可促使造血干细胞子代前体细胞进 一步分化产生淋巴系， 而且间充质干细胞相对容易在体外被诱导 分化为成骨细胞和软骨细胞，所以间充质 干细胞在骨损伤，先天骨组织畸形的治疗 方面将有广泛的应用。
间充质干细胞
间充质干细胞的来源
来源于发育早期的中胚层 和外胚层。 MSC最初在骨髓中发现。
具有多向分化潜能，理想
的种子细胞。
间充质干细胞的形态
在个体出生后， 间充质干细胞附于 骨髓窦的内腔面， 形成一种包埋于窦 状网络中的三维细 胞网络。
光学显微镜
扫描电镜
间充质干细胞的表面标志
SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、 CD106、CD120a、及CD124等
成体干细胞的概念
存在于成年个体的许多组织和器官
特点
修复 再生 自我更新
使组织和器官保持生长和衰退的 动态平衡。
成体干细胞的可塑性
成体干细胞可以突破其 “发育限制性”，跨系， 甚至跨胚层分化为其他类 型组织细胞
造血干细胞起源
（hemopoietic stem cell,HSC）是存 在于造血组织中的一群原始造血细 胞，它不是组织固定细胞，可存在 于造血组织及血液中。造血干细胞 在人胚胎2周时可出现于卵黄囊， 第4周开始转移至胚肝，妊娠5个月 后，骨髓开始造血，出生后骨髓成 为干细胞的主要来源。在造血组织 中，所占比例甚少，如在小鼠骨髓 中105核细胞中的有10个，在脾中 105有核细胞中只有0.2个。
MSC功能及应用 间充质干细胞临床应用ppt课件
MSC药物
负面消息（包括无效）的特点
1，活性差、功能低的间充质干细胞（自体骨髓间充质干细胞） 2，脐血单个核细胞（mononuclear cell，不是monocytes）冒充间充质干细胞 （部分医院和企业） 3，干细胞制剂里添加各种药物（激素） 4，治疗方案没有经过优化 5，各种忽悠的干细胞类型，比如：外周血干细胞（外周血含有少量的间充质 干细胞，但目前无法扩增到临床所需的细胞数）、母乳干细胞（退一步说，即 使母乳里含有干细胞，但经过胃酸和肠道消化，早就死翘翘了）、植物干细胞、 心脏干细胞（专业上有心肌干细胞）等
活化APC
活化T-cell
诱导免疫耐受
遗憾：当时没有明确涉及dangerous signals和safe signals的定义和内涵。
Danger Model
2001年Matzinger提出具体的“dangerous 应sig用n受al限s”
Signals
Dangerous siganls
（2001年）
担忧和恐惧的最早来源是胚胎干细胞的强致癌性，包括后来的iPS。 What about mesenchymal stem cell (间充质干细胞)？ Think about hemopoietic stem cell (造血干细胞)！ 不是所有的干细胞都具有成瘤性/癌变！
值得反思的三点
1，间充质干细胞广泛存在于人体中，包括外周血、骨髓、脂肪、所有组 织器官的基质（ Ann Med 2005;37(7):469-479 ）。 如果间充质干细胞具有成瘤性，那么肿瘤一定伴随着每个人的完整人生！
------ Stem Cells Transl Med 2012;1(10):725-731
安全性评价
临床使用安全性报道：
负面消息（包括无效）的特点
1，活性差、功能低的间充质干细胞（自体骨髓间充质干细胞） 2，脐血单个核细胞（mononuclear cell，不是monocytes）冒充间充质干细胞 （部分医院和企业） 3，干细胞制剂里添加各种药物（激素） 4，治疗方案没有经过优化 5，各种忽悠的干细胞类型，比如：外周血干细胞（外周血含有少量的间充质 干细胞，但目前无法扩增到临床所需的细胞数）、母乳干细胞（退一步说，即 使母乳里含有干细胞，但经过胃酸和肠道消化，早就死翘翘了）、植物干细胞、 心脏干细胞（专业上有心肌干细胞）等
活化APC
活化T-cell
诱导免疫耐受
遗憾：当时没有明确涉及dangerous signals和safe signals的定义和内涵。
Danger Model
2001年Matzinger提出具体的“dangerous 应sig用n受al限s”
Signals
Dangerous siganls
（2001年）
担忧和恐惧的最早来源是胚胎干细胞的强致癌性，包括后来的iPS。 What about mesenchymal stem cell (间充质干细胞)？ Think about hemopoietic stem cell (造血干细胞)！ 不是所有的干细胞都具有成瘤性/癌变！
值得反思的三点
1，间充质干细胞广泛存在于人体中，包括外周血、骨髓、脂肪、所有组 织器官的基质（ Ann Med 2005;37(7):469-479 ）。 如果间充质干细胞具有成瘤性，那么肿瘤一定伴随着每个人的完整人生！
------ Stem Cells Transl Med 2012;1(10):725-731
安全性评价
临床使用安全性报道：
间充质干细胞的临床应用ppt课件
间充质干细胞
目前，国际上用于临床研究的间充质
干细胞主要是来自成人骨髓，但成 人骨髓源间充质干细胞的细胞数量 及增殖分化潜能随年龄的增大而下 降，病毒感染率较高。且供者间充 质干细胞的采集须行骨髓穿刺术， 来源受到限制。
间充质干细胞
许多研究表明脐带中可以分离间充质干细胞
，然而脐带血中是否存在间充质干细胞仍 存在争议。脐血来源间充质干细胞得率低 源于每个实验室使用的培养条件不同。研 究比较了同一供体脐带和脐血间充质干细 胞的获得率，结果显示在相同的培养条件 下，同时处理标本，只有l／l0的脐血可以 分离出间充质干细胞，而所有的脐带组织 都能分离出多能的间充质干细胞，同时还 可以建立不同的细胞系。
导条件下，可分化为脂肪、骨、软 骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、心 肌、肝、内皮等多种组织细胞，连 续传代培养和冷冻保存后仍具有多 向分化潜能，可作为理想的种子细 胞用于衰老和病变引起的组织器官 损伤修复。
间充质干细胞
间充质干细胞的临床研究已经在许多
国家开展，美国已批准了38项临床 试验，中国批准了2项临床试验。 2007年，美国食品和药品监督管理 局已经批准间充质干细胞作为治疗 造血干细胞移植排斥的一线药物进 入III期临床。
2007年l0月伊朗的Mohamadnejad等发表了骨
髓MSC移植治疗失代偿期肝硬化的Ⅰ期临床试 验结果。入选的为4名临床确诊的失代偿期肝 硬化患者，通过静脉注射的方式给予体外扩增 的自体骨髓MSC，在注射时及随后一年的观 察期内，未见有明显副作用，有2名患者肝病 评分有改善，生活质量问卷调查显示4名患者 的生活质量均有较明显提高。
间充质干细胞
研究表明，脐带来源的间充质干细胞不但能够成
为骨髓间充质干细胞的理想替代物，而且具有 更大的应用潜能。脐带间充质干细胞表达多种 胚胎干细胞的特有分子标志，具有分化潜能大 、增殖能力强、免疫原性低、取材方便、无道 德伦理问题的限制、易于工业化制备等特征， 因此有可能成为最具临床应用前景的多能干细 胞。目前除中国外，只有加拿大、英国、美国 和巴西等少数国家掌握这一技术。因此，中国 在这方面已经处于世界领先水平。
MSC干细胞PPT课件
多潜能性、增殖能力有限 研究最早、了解最深 自体来源、无免疫排斥 MSC产率低,1-10MSC/106MNC 有病毒感染风险 有限临床应用
y
11
y
12
体外培养扩增获取人UCMSC
原代贴壁
原代培养
传代扩增
对于原代细胞中混杂的其它异质细胞，利用MSC的贴壁和高增 殖潜能，通过连续传代，筛除那些不能贴壁生长和虽能贴壁生 长但增殖能力差的细胞，最后通过流式细胞术鉴定。
07年6月7日王恩庆的妻子药守清反映患者尿频和尿 急已恢复正常；皮肤表面黑斑明显变浅；右眼干涩和畏 光已改善；透视显示，肺结核引起的空洞好转80%；精 神状态和饮食情况趋于常人，体重由细胞疗法前的125 斤，增长为145斤，饮食恢复正常，每天不需他人陪同 可独立外出散步。
y
34
患者，女性，26岁，类风湿病史10年。
第二天，当我醒来的时候，突然发现自己的手指明显消肿了，不仅是双手 ，其它肿胀的关节也不酸胀了，全身症状明显减轻，无数的早晨我都是在浑身 僵痛，四肢乏力、情绪低落中度过的，然而今天早晨却让我感受到了一个精神 焕发，充满力量，心情舒畅的我，整个人都很轻松，这对于一个类风湿病人来 说真的是太难得了，当时我非常激动，因为我真的没有想到效果会如此明显和 迅速，通过这次治疗让我再次树立了信心，重新点燃了生活的希望。
我是一名类风湿病的患者，今年26岁，类风湿病史10年，患病以来，长 期服药，并尝试过各种治疗方法，效果均不明显。8月5日，我进行了脐带间充 质干细胞移植治疗，治疗方法比我刚开始想象的简单的多，只是通过静脉输入 的方法将干细胞输入到我的血管，不到半个小时就做完了，没有任何的不适感 ，干细胞移植后就可以回家了。
Biology of Blood and Marrow Transplantation 13:1477-1486, 2007
MSC干细胞ppt演示课件
.
13
A
B
A： CD31 、 CD34、CD45和HLA-DR阴性<2% B： CD90 、 CD73 、 CD105 、 CD29和CD44阳性>95%
.
14
Day 7
Day 14
UC-MSC •形态相似 •梭形细胞 •平行排列或漩涡状生长
Day 7
Day 14
BM-MSC
(100X)
.
15
.
23
脊髓损伤动物模型
.
24
干细胞注射液
间充质干细胞治疗肝病技术，为传统医学难以解决的病毒性
肝炎导致肝硬化、肝功能衰竭提供新的治疗途径。该技术
2009年得到总后卫生部批准，在临床进行科研性质的使用 间充质干细胞修复脑中风后中枢神经损伤科研项目，2009年 在北京市科委立项，并得到专项科研经费资助； 获得“人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法” 专利技术（ZL201010551722.8），并于2010年12月10日在 药监局注册；
.
22
脐带 MSC 具有与骨髓来源 MSC 相似的免疫特性，即 HLA-ABC呈阳性表达，HLA-DR呈阴性表达。 有研究显示， HLA-ABC 的表达率在脐带和骨髓 MSC 分别为50％～75％和＞75％，脐带MSC的HLA-ABC 的表达低于骨髓。 提示 UC-MSC 可能具有与 BM-MSC 相似或更低的免 疫原性。
脐带组织含有的细胞种类较少、MSC 含量大约为1个MSC/1600有核细胞。
.
21
来源丰富、采集简便，对供者无不良影响 数量丰富，增殖能力强，可多次使用 基因稳定、不易突变、使用安全可靠 免疫原性低，具有免疫调节功能，使用时不 引起免疫排斥反应，还可抑制该反应 具有很强的促进造血恢复功能，广泛的临床 应用范围，可治疗多种疾病
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*临床应用：急性心肌梗死；缺血性心 肌病；慢性心功能不全。
MSC在神经系统疾病中的应用
*临床应用：新生儿缺氧-缺血性脑病（HIE小儿脑瘫 ）；神经变性疾病，如肌萎缩侧索化症（ALS）、帕金 森病、阿尔茨海默病等。
*干细胞可释放神经营养因子及重建运动神经元微环境 等机制来保护濒死的运动神经元。
ALS病，全称叫“肌肉萎缩性侧面硬化病”， 是一种运动神经元疾病，常在病后3～5年内 死亡。ALS病通常以手肌无力、萎缩为首发 症状，一般从一侧开始以后再波及对侧，随 病程展出现上、下运动神经元混合损害症 状。
体内——MSC单独或与HSC共移植促进骨髓造血 。 因此，单独移植MSC或与HSC共移植，可以发挥其强大的支 持造血，维持免疫稳态的优点，达到治愈疾病的目的。
MSC与基因治疗：
*趋化能力——基因改造后使其携带抗肿瘤基因并大量迁移至肿 瘤病灶。
多向分化——基因工程改造，MSC的组织修复功能得到进一步 的提高。
A为MSCs处理组 B为VSMCs处理组 C为PBS处理组 位于肌纤维间 被染成紫色的颗粒为毛 细血管 （ x400）
比较可知MSCs处理组毛细血管密度最大
支持造血：
•骨髓正常造血依赖于造血干细胞与其生存的造血微环境， MSC是骨髓微环境的前体细胞，因此MSC发挥了强大的支 持造血能力。 •依据：体外——MSC与HSC共培养促进造血克隆形成、增 殖和分化成熟。
*有效的基因治疗要要求： -可以通过一种载体将基因转运向靶细胞； -这种基因转移过程必须具有靶向性； -转入的基因可以在靶细胞内或靶细胞周围表达； -基因的表达产物必须有效且表达时间必须足够长； -整套系统在体内必须具有安全性。
*问题：MSC可通过免疫抑制作用而促进肿瘤生长；注射的干细 胞在体内的迁移路径在各个器官中的分布值得深入探究。
本病病因不明，一般发病数年内死亡。现
代医学尚无有效措施阻止本病的进展。所以 对于干细胞的深入研究有望为该疾病的治疗 提供有效的方法！
——目前研究证明： 1、自体骨髓干细胞移植具有改善运 动神经元病功能障碍的可行性，近期 疗效确切。
2、MSC移植治疗能够降低ALS患者 血浆、脑脊液中Glu浓度。
MSC治疗糖尿病
促血管新生：
•MSC在体内的干细胞龛（niche）：MSC在体内所栖息的场 所，位于血管周围区域。 •MSC的趋化和迁移能力：也称归巢能力，即迁移到缺血损 伤的特定区域，并定居于此，进而发挥各种组织修复功能。 •血管新生过程中，内皮细胞，血管周细胞的增殖分化是形成 新生血管的必要条件，MSC在VEGF的诱导或低氧条件下能 高表达血管内皮细胞特异分子等，证明体内MSC可分化成内 皮细胞。 •分泌促血管新生的血管生长因子。
间充质 干细胞
MSC
关于间充质干细胞
间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）
简 介 ——间充质干细胞是一种具有自我复制能力和
多向分化潜能的成体干细胞，在不同诱导条件 下可分化为软骨、骨、骨骼肌、肌腱、脂肪、 神经及肾脏实质的细胞等。间充质干细胞可以 接受移植，而它们会成长为何种类型的细胞取 决于其被注入的部位，而且免疫原性弱，是组 织工程理想的种子细胞来源。此外，间充质干 细胞易于外源基因的转染和表达，在细胞治疗 和基因治疗中也有着广泛的应用。
MCS的临床应用
MSC在HSC移植中的应用
MSC在自身免疫系统疾病中的应用
造血干细胞移植：重建正常造血和免疫功 能的一种细M胞SC在治心疗血手管疾段病。治广疗中泛的用应于用 良恶性血 液病、遗传性疾病和某些实体瘤。其中移植 物排斥、植M入SC失在败神经和系移统植疾病物中抗的宿应用主病（GVHD ）是影响HSCT的主要并发症。MSC在促进干细 胞植入、造血重建MS以C治及疗G糖V尿HD病的预防与治疗中 均显示了积极作用。
间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）
来 源 ——目前对于骨髓间充质干细胞的研
究最为清楚，此外MSC还存在于胎盘 、羊水、脐静脉内皮下层、外周血及 肝脏、脂肪、肌肉、皮肤、脐带等多 种组织中，其中脐带来源的间充质干 细胞质量高、纯净、数量多。
原代骨髓间充质干细胞
形态较为均一，呈圆形、 三角形。培养5~7天细胞 后以集落方式生长，呈梭 形，有粗大突起伸出。
不容易获得 分离困难
伦理学问题
单向分化
All kill！
MSC主要功能
免疫
调节
支持
促血管
造血
新生
基因 组织 治疗 修复
组织修复：（骨骼肌系统再生）
*成骨分化 *成软骨分化 *成肌腱分化
免疫调节：
•MSC的免疫学特性：低免疫原性和免疫抑制能力。 •认识：移植的同源异种MSC能逃避受体的免疫监视。 •机制：并不完全清楚，目前普遍认为是MSC主要通过细胞间接 触和可溶性因子的分泌发挥免疫抑制功能。 •MSC治疗免疫相关疾病的临床应用研究：罗恩病；慢性器官自 身免疫性病，如自身免疫性心肌炎（研究表明，来自自身免疫 病患者的MSC表型正常，能正常造血支持与免疫抑制能力，应 用自体的MSC治疗器官性自身免疫将成为可能。）
*糖尿病的产生是由于因胰岛分泌和胰岛作 用缺陷使胰岛素绝对或相对不足。
*细胞治疗：移植干细胞来替代和修复受损 的胰腺β细胞。研究表明：hMSC对胰岛功能 有不同程度衰竭的2型糖尿病的治疗安全有效 ，无副作用，不引起排斥反应，使用方便。
骨髓间充质干细胞是存
在于骨髓腔内的多潜能干 细胞,可在体内外分化为各 种类型的细胞，如脂肪细 胞、骨细胞、神经细胞， 也有人将其诱导分化为胰 岛素分泌细胞等。可为临 床组织工程中软骨组织的 损伤修复、神经系统的损 伤修复及糖尿病等的干细 胞移植治疗提供种子细胞。
常 间充见质干干细细胞
间充质干细胞克服了其 他一些干细胞的缺陷
MSC在组织工程中的应用
MSC在自身免疫系统疾病中的应用
治疗基础：自身免疫系统疾病（系统性 红斑狼疮、类风湿性关节炎、甲状腺机能 亢进、I型糖尿病等）目前方法是使用免疫 抑制药物抑制免疫系统表达。MSC具有良好 的免疫调节作用。
MSC在心血管疾病治疗中的应用
*机制：分化为心肌细胞；促进血管新 生；旁分泌机制；抑制心室重构；激 活内源性修复机制，引起干细胞龛的 再生 。
MSC在神经系统疾病中的应用
*临床应用：新生儿缺氧-缺血性脑病（HIE小儿脑瘫 ）；神经变性疾病，如肌萎缩侧索化症（ALS）、帕金 森病、阿尔茨海默病等。
*干细胞可释放神经营养因子及重建运动神经元微环境 等机制来保护濒死的运动神经元。
ALS病，全称叫“肌肉萎缩性侧面硬化病”， 是一种运动神经元疾病，常在病后3～5年内 死亡。ALS病通常以手肌无力、萎缩为首发 症状，一般从一侧开始以后再波及对侧，随 病程展出现上、下运动神经元混合损害症 状。
体内——MSC单独或与HSC共移植促进骨髓造血 。 因此，单独移植MSC或与HSC共移植，可以发挥其强大的支 持造血，维持免疫稳态的优点，达到治愈疾病的目的。
MSC与基因治疗：
*趋化能力——基因改造后使其携带抗肿瘤基因并大量迁移至肿 瘤病灶。
多向分化——基因工程改造，MSC的组织修复功能得到进一步 的提高。
A为MSCs处理组 B为VSMCs处理组 C为PBS处理组 位于肌纤维间 被染成紫色的颗粒为毛 细血管 （ x400）
比较可知MSCs处理组毛细血管密度最大
支持造血：
•骨髓正常造血依赖于造血干细胞与其生存的造血微环境， MSC是骨髓微环境的前体细胞，因此MSC发挥了强大的支 持造血能力。 •依据：体外——MSC与HSC共培养促进造血克隆形成、增 殖和分化成熟。
*有效的基因治疗要要求： -可以通过一种载体将基因转运向靶细胞； -这种基因转移过程必须具有靶向性； -转入的基因可以在靶细胞内或靶细胞周围表达； -基因的表达产物必须有效且表达时间必须足够长； -整套系统在体内必须具有安全性。
*问题：MSC可通过免疫抑制作用而促进肿瘤生长；注射的干细 胞在体内的迁移路径在各个器官中的分布值得深入探究。
本病病因不明，一般发病数年内死亡。现
代医学尚无有效措施阻止本病的进展。所以 对于干细胞的深入研究有望为该疾病的治疗 提供有效的方法！
——目前研究证明： 1、自体骨髓干细胞移植具有改善运 动神经元病功能障碍的可行性，近期 疗效确切。
2、MSC移植治疗能够降低ALS患者 血浆、脑脊液中Glu浓度。
MSC治疗糖尿病
促血管新生：
•MSC在体内的干细胞龛（niche）：MSC在体内所栖息的场 所，位于血管周围区域。 •MSC的趋化和迁移能力：也称归巢能力，即迁移到缺血损 伤的特定区域，并定居于此，进而发挥各种组织修复功能。 •血管新生过程中，内皮细胞，血管周细胞的增殖分化是形成 新生血管的必要条件，MSC在VEGF的诱导或低氧条件下能 高表达血管内皮细胞特异分子等，证明体内MSC可分化成内 皮细胞。 •分泌促血管新生的血管生长因子。
间充质 干细胞
MSC
关于间充质干细胞
间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）
简 介 ——间充质干细胞是一种具有自我复制能力和
多向分化潜能的成体干细胞，在不同诱导条件 下可分化为软骨、骨、骨骼肌、肌腱、脂肪、 神经及肾脏实质的细胞等。间充质干细胞可以 接受移植，而它们会成长为何种类型的细胞取 决于其被注入的部位，而且免疫原性弱，是组 织工程理想的种子细胞来源。此外，间充质干 细胞易于外源基因的转染和表达，在细胞治疗 和基因治疗中也有着广泛的应用。
MCS的临床应用
MSC在HSC移植中的应用
MSC在自身免疫系统疾病中的应用
造血干细胞移植：重建正常造血和免疫功 能的一种细M胞SC在治心疗血手管疾段病。治广疗中泛的用应于用 良恶性血 液病、遗传性疾病和某些实体瘤。其中移植 物排斥、植M入SC失在败神经和系移统植疾病物中抗的宿应用主病（GVHD ）是影响HSCT的主要并发症。MSC在促进干细 胞植入、造血重建MS以C治及疗G糖V尿HD病的预防与治疗中 均显示了积极作用。
间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）
来 源 ——目前对于骨髓间充质干细胞的研
究最为清楚，此外MSC还存在于胎盘 、羊水、脐静脉内皮下层、外周血及 肝脏、脂肪、肌肉、皮肤、脐带等多 种组织中，其中脐带来源的间充质干 细胞质量高、纯净、数量多。
原代骨髓间充质干细胞
形态较为均一，呈圆形、 三角形。培养5~7天细胞 后以集落方式生长，呈梭 形，有粗大突起伸出。
不容易获得 分离困难
伦理学问题
单向分化
All kill！
MSC主要功能
免疫
调节
支持
促血管
造血
新生
基因 组织 治疗 修复
组织修复：（骨骼肌系统再生）
*成骨分化 *成软骨分化 *成肌腱分化
免疫调节：
•MSC的免疫学特性：低免疫原性和免疫抑制能力。 •认识：移植的同源异种MSC能逃避受体的免疫监视。 •机制：并不完全清楚，目前普遍认为是MSC主要通过细胞间接 触和可溶性因子的分泌发挥免疫抑制功能。 •MSC治疗免疫相关疾病的临床应用研究：罗恩病；慢性器官自 身免疫性病，如自身免疫性心肌炎（研究表明，来自自身免疫 病患者的MSC表型正常，能正常造血支持与免疫抑制能力，应 用自体的MSC治疗器官性自身免疫将成为可能。）
*糖尿病的产生是由于因胰岛分泌和胰岛作 用缺陷使胰岛素绝对或相对不足。
*细胞治疗：移植干细胞来替代和修复受损 的胰腺β细胞。研究表明：hMSC对胰岛功能 有不同程度衰竭的2型糖尿病的治疗安全有效 ，无副作用，不引起排斥反应，使用方便。
骨髓间充质干细胞是存
在于骨髓腔内的多潜能干 细胞,可在体内外分化为各 种类型的细胞，如脂肪细 胞、骨细胞、神经细胞， 也有人将其诱导分化为胰 岛素分泌细胞等。可为临 床组织工程中软骨组织的 损伤修复、神经系统的损 伤修复及糖尿病等的干细 胞移植治疗提供种子细胞。
常 间充见质干干细细胞
间充质干细胞克服了其 他一些干细胞的缺陷
MSC在组织工程中的应用
MSC在自身免疫系统疾病中的应用
治疗基础：自身免疫系统疾病（系统性 红斑狼疮、类风湿性关节炎、甲状腺机能 亢进、I型糖尿病等）目前方法是使用免疫 抑制药物抑制免疫系统表达。MSC具有良好 的免疫调节作用。
MSC在心血管疾病治疗中的应用
*机制：分化为心肌细胞；促进血管新 生；旁分泌机制；抑制心室重构；激 活内源性修复机制，引起干细胞龛的 再生 。