组胺的理化检测方法
食品中组胺的测定
组胺的检测组胺是自体活性物质之一，在体内由组氨酸脱羧基而成，组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中，以皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。
当机体受到理化刺激或发生过敏反应时，可引起这些细胞脱颗粒，导致组胺释放，与组胺受体结合而产生生物效应。
抗组胺是拮抗组胺对人体的生物效应，即应用抗组胺药物。
抗组胺受体就是拮抗组胺的H1和H2受体。
由于此两种受体在人体内分布不同而产生不同的效应，它是抗组胺药应用治疗疾病的生理药理基础。
毒理药物中毒组胺主要用于胃分泌功能检查，作最大酸分泌(MAO)测定。
但目前已被五肽胃泌素取代。
组胺通过激活体内组胺H1受体和H2受体，收缩多种平滑肌如气管、支气管和胃肠道平滑肌；但同时松弛小血管平滑肌，增加毛细血管通透性；还能强烈刺激胃酸分泌，减慢房室传导，增加心肌收缩力等。
误用大剂量或静脉给药可引起中毒。
食物中毒大量检测表明，海产鱼中的青皮红肉鱼类含组胺较高，当鱼不新鲜或腐败时，鱼体中游离的组胺酸经脱羧酶作用产生组胺. 组胺中毒潜伏期一般为0.5~1小时，最短可为5min,最长达4h.检测方法1．分光光度法1 主要仪器和试剂721型分光光度计组胺标准溶液：取经95℃干燥2．5小时的磷酸组织胺分析纯试剂配制成含20ug·ml 的组胺标准溶液。
0．2 对氨基苯磺酸溶液(简称甲液)1oNNaNO 溶液(简祢乙液)，现配现用。
所用水均为二次蒸馏水。
2 组胺测定方法及条件试验2．1 测定方法：在25ml容量瓶中，移入一定量的组胺标准溶液，依次加入0-2 甲液、0．4%HCI、10%乙液和2．0%NaCO 溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
于25℃室温下放置20分钟，用试剂空白为参比，测其吸光度值。
2．2 吸收光谱：取2．0ml组胺标准溶液，按上述方法显色，以水为参比，分别测定显色化合物和试剂空白的吸收光谱。
图1表明显色化合物在506nm 处有一最大吸收，本实验取506nm 作为吸收波长。
组胺试验步骤
组胺试验步骤组胺试验是一种常用的实验方法，用于检测物质对人体是否产生过敏反应。
下面将详细介绍组胺试验的步骤。
1. 实验前准备在进行组胺试验之前，需要准备一些实验器材和试剂。
实验器材包括试管、移液器、离心机等。
试剂包括组胺溶液、生理盐水、抗组胺药物等。
同时，还需要准备一些实验动物，如小鼠或大鼠。
2. 组胺溶液制备需要制备一定浓度的组胺溶液。
可以将一定量的组胺加入到生理盐水中，制备出不同浓度的组胺溶液，如0.1%、1%等。
3. 实验动物处理将实验动物分为实验组和对照组。
实验组动物接受组胺溶液的刺激，对照组动物接受生理盐水的刺激。
这样可以比较实验组和对照组动物的反应差异，判断是否产生过敏反应。
4. 组胺注射将组胺溶液注射到实验组动物体内。
注射可以选择不同的途径，如皮下注射、腹腔注射等。
注射剂量可以根据实验需要进行调整，一般建议先从低剂量开始，逐渐增加剂量。
5. 反应观察观察实验动物在注射组胺溶液后的反应情况。
可以观察动物的行为变化、呼吸困难、皮肤变化等。
同时，还可以进行生理指标的监测，如体温、血压等。
6. 数据记录和分析将观察到的实验数据进行记录和分析。
可以比较实验组和对照组动物的反应差异，评估组胺对动物是否产生过敏反应。
7. 抗组胺药物处理在实验过程中，可以给动物注射抗组胺药物，观察其对组胺的抑制作用。
这样可以评估抗组胺药物对过敏反应的影响。
8. 结果和讨论根据实验数据的分析结果，得出结论并进行讨论。
可以讨论组胺对动物的过敏反应机制、抗组胺药物的疗效等问题。
9. 安全措施在进行组胺试验时，需要注意安全措施。
实验人员需要佩戴实验手套、口罩等防护装备，避免接触到组胺溶液等有害物质。
通过以上步骤，可以进行一次完整的组胺试验。
组胺试验可以帮助研究人员评估物质的过敏原性，为临床上的过敏反应研究提供重要的参考依据。
组胺限量标准
组胺限量标准一、食品类别和来源组胺是一种天然存在的生物胺，主要存在于鱼、虾、蟹等水产品中，是由于这些食品中的组氨酸在细菌的作用下分解而来。
此外，奶酪、巧克力、葡萄酒等食品也可能含有组胺。
二、限量标准由于组胺在某些食品中可能含量较高，因此需要制定限量标准以保障公众健康。
目前，国际上普遍认可的组胺限量标准为不超过200mg/kg或200mg/L。
然而，不同国家和地区可能会有不同的限量标准，需参照当地法规和标准。
三、检测方法检测食品中的组胺含量通常采用色谱法、光谱法和生物分析法等。
其中，色谱法和光谱法较为常用，因为它们具有较高的准确性和灵敏度。
这些方法的检测限通常低于20mg/kg或20mg/L。
四、食品添加剂和营养强化剂的影响某些食品添加剂和营养强化剂可能会影响组胺的含量。
例如，抗坏血酸（维生素C）可以抑制组胺的产生，而谷氨酸钠（味精）可以促进组胺的产生。
因此，在食品加工过程中，应合理使用食品添加剂和营养强化剂，以降低组胺的含量。
五、人体健康风险评估组胺是一种过敏原，可引起过敏反应，如皮疹、鼻炎、哮喘等。
然而，只有在组胺含量超过限量标准时，才可能对人体健康造成风险。
因此，应采取措施控制食品中的组胺含量，以确保公众健康。
六、控制措施为降低食品中的组胺含量，可采取以下控制措施：1. 储存：在储存过程中，应保持食品处于低温、干燥、通风等条件下，以延缓细菌繁殖和组胺的产生。
2. 加工：在食品加工过程中，应尽量避免使用可能促进组胺产生的添加剂和营养强化剂。
同时，应采用适当的加工方法（如蒸、煮、烤等）降低食品中的组胺含量。
3. 烹饪：在烹饪过程中，应将水产品等可能含有较多组胺的食品煮熟煮透。
此外，应避免将含有大量组胺的食品与其他食品混合食用，以免产生过敏反应。
4. 选用新鲜原料：尽量选用新鲜原料进行食品加工和烹饪，避免使用过期或受污染的原料。
这样可以降低原料中细菌含量，从而减少组胺的产生。
5. 做好个人防护：接触食品时应注意个人卫生和防护，如勤洗手、戴口罩等。
酪胺组胺 快速检测标准
酪胺组胺快速检测标准
酪胺和组胺是食物中常见的生物胺，过量摄入可能导致过敏反应和食物中毒。
以下是酪胺和组胺的快速检测标准的一般概述：
1. 检测方法：酪胺和组胺的快速检测通常采用免疫学检测方法，如酶联免疫吸附测定（ELISA）或快速免疫层析试纸。
2. 检测范围：ELISA 方法通常可以检测酪胺和组胺的浓度范围在几十到几百毫克/千克之间，而快速免疫层析试纸的检测范围通常较窄，一般在几十毫克/千克以下。
3. 检测时间：ELISA 方法需要较长的检测时间，通常需要几个小时到一天，而快速免疫层析试纸可以在几分钟内提供结果。
4. 准确性和灵敏度：ELISA 方法的准确性和灵敏度相对较高，可以检测到较低浓度的酪胺和组胺。
快速免疫层析试纸的准确性和灵敏度可能相对较低，但对于快速筛选和初步检测仍然是有用的工具。
酪胺和组胺的快速检测标准可能因不同的检测方法和产品而有所差异。
在进行快速检测时，应选择经过验证的检测方法和产品，并严格按照操作说明进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
如果需要更准确的结果，建议进行实验室分析。
组胺的理化检测方法
组胺的理化检测方法1．原理鱼体中组织胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。
2．试剂5％碳酸钠溶液。
25％氢氧化钠溶液。
偶氮试剂－甲液：取0.5g对硝基苯胺，加5ml盐酸溶解后，再加水稀释至200ml，置冰箱中。
乙液：0.5%亚硝基钠溶液，临用现配。
甲液5ml、乙液40ml混合后立即使用。
正戊醇。
10％三氯乙酸溶液。
组织胺标准溶液：精密称取0.2767g于105℃干燥2h的磷酸组织胺，溶于水，移入100ml容量瓶中，再加水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于1㎎组织胺。
磷酸组织胺标准使用液：吸取1.0ml组织胺标准溶液，置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于20μg组织胺。
3.操作方法样品处理：称取5～10g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15.0～20.0ml 10％三氯乙酸溶液，浸泡2～3h，过滤。
吸取1.0ml滤液，置于分液漏斗中，加25％氢氧化钠溶液使呈碱性，每次加入3ml正戊醇，振摇5min，提取三次，合并正戊醇并稀释至10.0ml。
吸取1.0ml正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3ml 1Ｎ盐酸，振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0ml。
备用。
测定：吸取1.0ml盐酸提取液，于10ml比色管中。
另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0ml组织胺标准使用液（相当于0、4、8、12、16、20μg 组织胺），分别置于10ml比色管中，各加1ml 1N盐酸，样品与标准管各加3ml 15％碳酸钠溶液，3ml偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min后用1㎝比色杯以零管调节零点，与480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准色列目测比较。
4．计算A1×1001000Ｘ1= ………………………………….⑴1 1 1ｍ1×××Ｖ1 10 10式中：Ｘ1 样品中组织胺的含量，㎎/100g;Ｖ1 加入10％三氯乙酸溶液的体积，ml；A1 测定时样品中组织胺的含量，μg；ｍ1 样品质量，g。
鱼粉中组胺的测定
鱼粉中组胺的测定原理简介:鱼粉中组胺用三氯乙酸提取，之后调PH=9，将游离的组胺用正戊醇提取出，之后再用HCL反萃取，用偶氮试剂显色。
组胺+三氯乙酸盐（溶于水）--PH=9--组胺（溶于正戊醇）--HCl--正戊醇（组胺溶于稀HCl）1试剂与溶液1.1偶氮试剂的配制甲液：称取0.5g对硝基苯胺，加5ml盐酸（1+1）溶解，再加水释到200ml，置冰箱中（2~8度）保存。
乙液：亚硝酸钠溶液5g/l，临用现配甲液5ml、乙液40ml混合后立刻使用。
1.2三氯乙酸100 g/L1.3氢氧化钠250g/L1.4盐酸1mol/L1.5正戊醇分析纯1.6碳酸氢钠溶液50g/L1.7磷酸组胺（Sigma公司）步骤2.1样品处理称取1--3克鱼粉于具塞三角瓶内，加入25.0ml三氯乙酸（100g/L）每隔30分钟摇动一次，提取3小时，过滤，取滤液1.00ml或2.00ml于15ml试管内，加氢氧化钠（250g/L）5滴，振荡一下，再加5ml正戊醇振荡2分钟，静止分层（如出现乳化现象可滴加2--3滴无水乙醇），用移液枪小心吸取上清液（正戊醇层）于50ml分液漏斗内，下层沉淀再下层沉淀再分别用正戊醇5ml、3ml、3ml反萃取3次。
将正戊醇全部收集到50ml分液漏内,分别用盐酸（1mol/L）6ml、6ml、3ml反萃取3次,收集水相（下层）于20ml刻度试管内，用水定容至刻度（20.00ml），摇匀，吸取1.00ml（或2.00ml）盐酸提取液于10ml比色管中，加入碳酸氢钠溶液（50g/L）3.0ml摇匀，振荡下加入偶氮试剂3.0ml，用水定容到刻度，室温下显色10min，用1cm比色皿于480nm下测定吸光度。
2.2标准曲线称取磷酸组胺样品（Sigma公司）2.7671mg，置于100ml容量瓶内，用水溶解并定容到刻度，此液组胺含量为10ug/ml，分别取此标液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00ml于5支10ml比色管内，各加盐酸（1mol/L）1.0ml，加入碳酸氢钠溶液（50g/L）3.0ml摇匀，振荡下加入偶氮试剂3.0ml，振荡，用水定容到刻度，摇匀后放置10min（室温下），用1cm比色皿于480nm下测吸光值。
水产品中组胺的检测
水产品中组胺的检测20091231汪欣一、目的与要求1 .了解偶氮试剂比色法测定水产品中组胺的方法原理；2 .掌握正戊醇提取组胺的操作技术；3 .学会用偶氮试剂比色法检测水产品中组胺的检测技术。
二、实验原理水产品中组胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。
组胺是水产品中游离的组氨酸在组氨酸脱竣酶作用下，发生脱竣反应而形成的一种胺类物质。
脱竣酶来自一些含有组氨酸脱竣酶的微生物，如某些肠杆菌、弧菌属等，其中最重要的是摩根变形杆菌和组胺无色杆菌。
当水产品受到这些细菌污染后，会产生大量组胺，从而反映出水产品受微生物污染的程度。
三、仪器与试剂⑴正戊醇；三氯乙酸溶液（100g/L）;碳酸钠溶液（50g/L）;氢氧化钠溶液（250g/L）;盐酸（1+11）。
⑵偶氮试剂①甲液：称取0.5对硝基苯胺，加5ml盐酸溶液溶解后，再加水稀释至200ml,置于冰箱中。
②乙液：亚硝酸钠溶液（5g/L）,临用现配。
甲液5ml、乙液40ml混合后立即使用。
⑶磷酸组胺标准贮备液准确称取0.2767g于（100±5）C干燥2h的磷酸组胺，溶于水，移入100ml容量瓶中，加水至刻度。
此溶液每毫升相当于1.0mg组胺。
⑷磷酸组胺标准使用液吸取1.0ml磷酸组胺标准贮备液，置于50ml容量瓶中加水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于20dg组胺。
四、实验步骤1 .样品处理称取5.00〜10.00g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15ml〜20ml三氯乙酸溶液，浸泡2h〜3h,过滤。
吸取2.0ml滤液置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液使呈碱性。
每次加入3ml正戊醇，振摇5min,提取三次。
合并正戊醇提取液并稀释至10.0ml。
吸取2.0ml正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3ml盐酸（1+11）振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0ml。
备用。
2 .测定吸取2ml盐酸提取液于10ml比色管中。
另吸取0、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.0ml组胺标准使用液（相当于0、4宾、8科g、12M、16宾、20dg组胺），分别置于10ml比色管中，加水至1ml,再各加1ml盐酸溶液。
组胺的检测方法
组胺的检测方法
一、比色法。
有一种比色法来检测组胺哦。
就像是给组胺找个小伙伴，然后让它们发生点奇妙的反应，这个反应会产生颜色变化呢。
就好比组胺和特定的试剂手拉手，然后整个体系就像被施了魔法一样，从一种颜色变成另一种颜色。
通过看这个颜色变化的程度，就能大概知道组胺有多少啦。
不过呢，这种方法有时候不是特别精确，就像猜谜语，只能猜出个大概范围。
但是它简单呀，不需要特别复杂的仪器，就像咱们做个小手工一样，在一些初步检测的情况下还是很有用的。
二、高效液相色谱法（HPLC）
这个高效液相色谱法可就高大上多啦。
它就像是给组胺安排了一场超级严格的赛跑比赛。
组胺在这个特殊的赛道（色谱柱）里跑呀跑，不同的物质跑的速度不一样，就像不同的运动员有不同的速度一样。
然后在跑道的尽头，有个检测员（检测器）在等着，它能精确地知道组胺什么时候到达，而且还能算出组胺的量呢。
这种方法超级精确，就像用放大镜去看东西，能把组胺看得清清楚楚。
不过呢，它的仪器很贵，操作起来也有点复杂，就像开一架高级飞机，得是专业的人才能玩得转。
三、酶联免疫吸附测定法（ELISA）
ELISA这个方法也很有特色。
它是利用抗原和抗体之间的特殊关系来检测组胺的。
就像是给组胺找个天敌（抗体），然后通过一些巧妙的反应，看这个天敌抓住了多少组胺。
这个方法很灵敏，哪怕组胺的量很少，它也能发现。
而且它可以同时检测很多样品，就像一群小士兵一起接受检查一样。
但是呢，它也有缺点，比如说容易受到其他物质的干扰，就像在一场音乐会里，有时候会有一些杂音影响效果。
高效液相色谱法测定组胺的方法验证
高效液相色谱法测定组胺的方法验证作者：陈瑾张勇来源：《中国质量与标准导报》2022年第04期摘要：实验室应用高效液相色谱法对葡萄酒中组胺进行测定，并通过测定加标回收率、精密度、准确度、方法检出限、定量限等参数进行方法验证，发现该检验方法验证试验可信度较高，可为食品检验方法验证试验提供借鉴和参考。
关键词：高效液相色谱法组胺方法验证Validation of High Performance Liquid Chromatography for Determination of HistamineChen Jin （Hami Institute for Food and Drug Control）Zhang Yong （Hami Inspection and Testing Center）Abstract： In this laboratory， high performance liquid Chromatography was used for the determination of histamine in wine， and the method was verified by measuring the recovery rate，precision， accuracy， method detection limit， limit of quantification and other parameters.It was found that the verification experiment of this test method has high credibility， which can provide reference for food verification experiment of inspect method.Key words： high performance liquid chromatography， histamine， method validation0 引言食品检验是食品安全管控的一个重要环节。
组胺检查法
试验动物豚鼠1只（250～350g），雌雄不限。
MP100型十六道生理仪、恒温水浴槽、注射器（1ml）、移液管（1ml和5ml）、电子天平、剪刀、镊子等。
试剂蒸馏水、氯化钠注射、氯化钾、氯化钙、氯化镁、磷酸二氢钠等。
药品硫酸阿托品、磷酸组胺对照品、供试品试验方法实验准备将离体器官浴筒洗净并干燥，备用。
将恒温水浴槽接通电源，加热使其温度保持为34～36℃，备用。
对照品溶液：取磷酸组胺对照品1支，加水配制成每1ml含1.0mg组胺的对照品溶液，用氯化钠注射液继续稀释。
A溶液：称取氯化钠160g、氯化钾4g、氯化钙2g、氯化镁1g、磷酸二氢钠0.1g，加水溶解并稀释至1000ml。
B溶液：取A溶液50ml，称取硫酸阿托品0.5mg、碳酸氢钠1g、葡萄糖0.5g，加水溶解并稀释至1000ml（24h内使用）。
离体肠段的固定：取禁食24h的豚鼠，处死。
剖取远端小肠（距离盲肠2cm）一段约2cm长的肠段，用注射器抽取溶液B，小心冲洗除去肠段的内容物。
两端用细线结扎，在肠段中部作一横的小切口，将其放入体积20ml的离体器官浴筒中，该浴筒含有溶液B，维持恒温（34～36℃），并通入95％O2和5％CO2的混合气体。
肠段一端用细线结扎固定在靠近浴筒底部，另一端细线附着在十六道生理仪拉力转换器上。
根据其灵敏度加以调节使对肠段的拉力约为1g，记录该肠段的收缩。
用溶液B冲洗器官浴筒，让浴液保留10min。
再用溶液B冲洗2-3次。
实验方法用磷酸组织胺溶液0.2～0.5ml加入浴液中，刺激其一系列的收缩，找出可重复的低于最大收缩反应的组胺浓度，即为高剂量（SH）。
每次加入组胺前，用溶液B冲洗浴筒3次，使肠段能完全松弛。
加入等体积的组胺溶液，引起收缩反应约为高剂量的一半，而且可以重复出现，此剂量为低剂量（SL）。
等体积的供试品原液（T1、T2、T3……）。
按顺序将SH、SL、T1、T2、T3……依次加入溶液B中，记录反应值。
磷酸组胺检测实验报告
一、实验目的1. 掌握磷酸组胺的检测方法；2. 熟悉实验操作流程；3. 了解组胺在生物体内的作用。
二、实验原理组胺（Histamine）是一种广泛存在于生物体内的胺类物质，具有多种生理和病理作用。
组胺的检测方法主要有酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫分析法（RIA）等。
本实验采用ELISA法检测磷酸组胺。
ELISA法是一种常用的酶联免疫吸附测定方法，其原理是利用抗原抗体特异性结合反应，通过检测酶催化底物产生的颜色变化来定量分析样品中的抗原或抗体。
三、实验材料1. 试剂：- 磷酸组胺标准品- 磷酸组胺酶联免疫吸附试剂盒- 封闭液- 酶底物- 洗涤液- 抗磷酸组胺抗体- 抗羊抗鼠IgG抗体- 酶标羊抗鼠IgG抗体2. 仪器：- 酶标仪- 移液器- 微量离心机- 培养箱- 移液器吸头四、实验方法1. 标准曲线绘制- 将磷酸组胺标准品用磷酸盐缓冲溶液（PBS）稀释成一系列浓度（如0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0ng/mL）；- 每个浓度设置3个复孔，分别加入100μL磷酸盐缓冲溶液；- 加入50μL磷酸组胺抗体；- 室温孵育30min；- 洗涤3次，每次3min；- 加入50μL抗羊抗鼠IgG抗体；- 室温孵育30min；- 洗涤3次，每次3min；- 加入50μL酶标羊抗鼠IgG抗体；- 室温孵育30min；- 洗涤3次，每次3min；- 加入100μL酶底物；- 室温孵育15min；- 用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值）；- 以OD值为纵坐标，组胺浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样品检测- 将待测样品用磷酸盐缓冲溶液稀释成适宜浓度；- 按照标准曲线绘制步骤进行操作；- 检测样品的OD值；- 通过标准曲线计算样品中组胺的浓度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制- 以OD值为纵坐标，组胺浓度为横坐标，绘制标准曲线；- 标准曲线线性范围为0～32ng/mL。
组胺的检测实验报告
一、实验目的1. 了解组胺的化学性质及其在生物体内的作用。
2. 掌握组胺的检测方法，包括原理、步骤和注意事项。
3. 通过实验，提高学生对生物化学实验操作技能的掌握。
二、实验原理组胺（Histamine）是一种生物胺，广泛存在于人体组织中，具有调节免疫、过敏反应等生理功能。
组胺的检测方法主要有比色法、荧光法、电化学法等。
本实验采用比色法检测组胺，其原理是基于组胺与特定试剂发生反应，生成具有特定颜色的化合物，通过测定其吸光度来定量分析组胺含量。
三、实验材料1. 样品：含有组胺的样品，如血清、尿液等。
2. 试剂：组胺标准品、显色剂、缓冲液、蒸馏水等。
3. 仪器：紫外可见分光光度计、移液器、容量瓶、试管等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）准确称取一定量的组胺标准品，用缓冲液配制成不同浓度的标准溶液。
（2）取试管若干，分别加入不同浓度的组胺标准溶液，加入显色剂，混匀。
（3）室温下放置10分钟，用紫外可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
（4）以组胺浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）取试管若干，分别加入待测样品和空白对照。
（2）按照标准曲线绘制步骤，加入显色剂，混匀。
（3）室温下放置10分钟，用紫外可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
（4）根据标准曲线，计算样品中组胺的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以组胺浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性回归方程：y = 0.0476x - 0.0052，相关系数R² = 0.9975。
2. 样品测定（1）空白对照组吸光度：0.015（2）样品组吸光度：0.120（3）样品中组胺含量：0.120 - 0.015 = 0.105根据标准曲线，样品中组胺含量为：0.105 × 1000 / 0.0476 = 2215.5 ng/mL六、实验讨论1. 实验过程中，样品处理、试剂配制、操作步骤等环节需严格按照实验要求进行，以确保实验结果的准确性。
水产品中组胺的快速检测
食品快速检验方法犓犑２０２１０２水产品中组胺的快速检测２０２１ ０１ １３发布国家市场监督管理总局发布犓犑２０２１０２水产品中组胺的快速检测１ 范围本方法规定了水产品中组胺的快速检测方法。
本方法适用于水产品（鱼类等）中组胺的快速测定。
第一法 胶体金免疫层析法２ 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理，样品中的组胺经提取（或提取衍生）后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（Ｔ线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线（Ｔ线）与控制线（Ｃ线）颜色深浅比较，对样品中组胺进行定性判定。
３ 试剂与材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的二级水。
３．１ 试剂３．１．１ 无水乙醇（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）。
３．１．２ 无水四氢呋喃（Ｃ４Ｈ８Ｏ）。
３．１．３ ４ 硝基苯甲酰氯（Ｃ７Ｈ４ＣｌＮＯ３）。
３．１．４ 三羟甲基氨基甲烷（Ｃ４Ｈ１１ＮＯ３），即Ｔｒｉｓ。
３．１．５ 盐酸（ＨＣｌ，３７％）。
３．２ 试剂配制３．２．１ ７０％乙醇溶液（体积分数）：量取乙醇（３．１．１）７００ｍＬ，加水至１０００ｍＬ，混合均匀。
３．２．２ 样品提取液：称取１２．１ｇＴｒｉｓ（３．１．４），加９５０ｍＬ７０％乙醇（３．２．１）溶解，充分混匀后，用盐酸（３．１．５）调节ｐＨ值至８．５，用７０％乙醇（３．２．１）定容至１０００ｍＬ。
或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用提取液。
３．２．３ 样品稀释液：称取１２．１ｇＴｒｉｓ（３．１．４），加９５０ｍＬ水溶解，充分混匀后用盐酸（３．１．５）调节ｐＨ至７．０，用水定容至１０００ｍＬ。
或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用稀释液。
３．２．４ 样品衍生剂（１００ｍｇ／ｍＬ）：称取１０ｇ４ 硝基苯甲酰氯（３．１．３），加９０ｍＬ无水四氢呋喃（３．１．２）溶解，用无水四氢呋喃（３．１．２）定容至１００ｍＬ。
或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用衍生剂。
３．３ 参考物质组胺参考物质的中文名称、英文名称、ＣＡＳ号、分子式、相对分子质量见表１，纯度≥９７．０％。
食品中组胺的测定
食品中组胺的测定组胺的检测组胺是自体活性物质之一，在体内由组氨酸脱羧基而成，组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中，以皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。
当机体受到理化刺激或发生过敏反应时，可引起这些细胞脱颗粒，导致组胺释放，与组胺受体结合而产生生物效应。
抗组胺是拮抗组胺对人体的生物效应，即应用抗组胺药物。
抗组胺受体就是拮抗组胺的H1和H2受体。
由于此两种受体在人体内分布不同而产生不同的效应，它是抗组胺药应用治疗疾病的生理药理基础。
毒理药物中毒组胺主要用于胃分泌功能检查，作最大酸分泌(MAO)测定。
但目前已被五肽胃泌素取代。
组胺通过激活体内组胺H1受体和H2受体，收缩多种平滑肌如气管、支气管和胃肠道平滑肌；但同时松弛小血管平滑肌，增加毛细血管通透性；还能强烈刺激胃酸分泌，减慢房室传导，增加心肌收缩力等。
误用大剂量或静脉给药可引起中毒。
食物中毒大量检测表明，海产鱼中的青皮红肉鱼类含组胺较高，当鱼不新鲜或腐败时，鱼体中游离的组胺酸经脱羧酶作用产生组胺. 组胺中毒潜伏期一般为0.5~1小时，最短可为5min,最长达4h.检测方法1．分光光度法1 主要仪器和试剂721型分光光度计组胺标准溶液：取经95℃干燥2．5小时的磷酸组织胺分析纯试剂配制成含20ug·ml 的组胺标准溶液。
0．2 对氨基苯磺酸溶液(简称甲液)1oNNaNO 溶液(简祢乙液)，现配现用。
所用水均为二次蒸馏水。
2 组胺测定方法及条件试验2．1 测定方法：在25ml容量瓶中，移入一定量的组胺标准溶液，依次加入0-2 甲液、0．4%HCI、10%乙液和2．0%NaCO 溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
于25℃室温下放置20分钟，用试剂空白为参比，测其吸光度值。
2．2 吸收光谱：取2．0ml组胺标准溶液，按上述方法显色，以水为参比，分别测定显色化合物和试剂空白的吸收光谱。
图1表明显色化合物在506nm 处有一最大吸收，本实验取506nm 作为吸收波长。
实验组胺的测定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握组胺的测定原理和方法。
2. 了解组胺在生物体中的分布和作用。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据的准确性。
二、实验原理组胺（histamine）是一种生物活性物质，广泛存在于动物体内，参与多种生理和病理过程。
本实验采用高效液相色谱法（HPLC）测定组胺含量，通过比较样品与标准品的峰面积，计算组胺含量。
三、实验仪器与药品1. 仪器：高效液相色谱仪、色谱工作站、样品处理装置、超声波清洗器、电子天平、冰箱、离心机等。
2. 药品：组胺标准品、乙腈、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氨水、氢氧化钠等。
四、实验步骤1. 样品处理（1）取适量组织样品，加入适量的乙腈，超声提取，离心分离，取上清液待测。
（2）将标准品用乙腈配制成一定浓度的溶液，作为标准曲线。
2. 色谱条件（1）色谱柱：C18柱，4.6×250mm，5μm。
（2）流动相：乙腈-0.1mol/L磷酸盐缓冲溶液（pH 3.0），梯度洗脱。
（3）流速：1.0mL/min。
（4）柱温：30℃。
3. 色谱测定（1）将处理好的样品和标准品依次进样，记录峰面积。
（2）以峰面积为纵坐标，标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。
（3）根据样品峰面积，从标准曲线上查出组胺含量。
五、结果与分析1. 标准曲线绘制以标准品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
曲线线性良好，相关系数R²=0.999。
2. 样品测定将样品进样，记录峰面积，从标准曲线上查出组胺含量。
实验结果如下：样品A：组胺含量为10.5±0.5μg/g样品B：组胺含量为15.2±0.3μg/g样品C：组胺含量为8.7±0.4μg/g3. 结果分析实验结果表明，组胺在不同组织中的含量存在差异，可能与动物种类、生理状态等因素有关。
六、讨论1. 本实验采用高效液相色谱法测定组胺含量，操作简便，结果准确。
2. 实验过程中，应注意样品处理和色谱条件的选择，以保证实验结果的可靠性。
组胺含量的测定5
实验五组胺含量的测定一、实验目的：学习比色法测定组胺含量的原理和方法二、实验原理：鱼肉中的组胺用正戊醇提取，与偶氮试剂反应显橙色，与标准系列比较定量，即可求出组胺含量三、实验原料：鱼肉四、实验试剂与仪器：Na2CO3、NaOH、对硝基苯胺、正戊醇、三氯乙酸、盐酸、组胺标准品、具塞锥形瓶、分液漏斗、721分光光度计等五、实验方法：1、组胺标准曲线的制定：称取25mg于105℃干燥至恒重的磷酸组胺定容至100ml 得到250ug/ml，再稀释配制成100ug/ml的组胺标准液，取上述标准使用液0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0于10ml容量瓶中，并用1mol/LHCl补足至3ml，然后加15%Na2CO3溶液3ml及偶氮试剂3ml，加蒸馏水至10ml混匀，放置10min后于480nm处测其吸光度。
作出标准曲线。
2、样品中组胺的提取：取10.0g左右切碎的鱼肉于具塞锥形瓶中，加入20ml 0.1g/ml三氯乙酸浸泡2—3h过滤小烧杯中，用NaOH跳PH为9—10，取1ml滤液于分液漏斗中，再加入3.0ml正戊醇振摇5min，吸取上层液，重复操作3次，合并上层液于10ml容量瓶，用正戊醇定容至10ml，取1.0ml正戊醇提取液于分液漏斗中提取，再加1mol/LHCl3ml振荡5min，取下层液，重复操作3次，合并下层液于10ml容量瓶中，再用盐酸定容3、取1ml上述提取液于10ml离心管中，分别加入15%Na2CO3及偶氮试剂各3ml，加入至10ml摇匀，放置10min于480nm处测吸光度4、计算：样品中组胺含量（mg/kg）＝1000×(A/m)×V六、思考题用正戊醇提取前为什么要调PH为9~10？为什么还要用HCl提取3次？。
组胺的实验报告
一、实验目的1. 学习组胺的提取方法。
2. 掌握组胺的鉴定方法。
3. 了解组胺的生物学功能。
二、实验原理组胺（histamine）是一种生物胺，广泛存在于动物组织中，尤其在高蛋白食物中含量较高。
组胺具有多种生物学功能，如过敏反应、神经传递等。
本实验通过提取动物组织中的组胺，并对其进行鉴定，旨在了解组胺的提取与鉴定方法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜猪肝、猪肾、鸡蛋清、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、氢氧化钠溶液、氨水、硫酸、氯化钠、硫酸铜溶液、硫酸锌溶液、硫酸铝溶液等。
2. 实验仪器：天平、烧杯、玻璃棒、试管、滴管、显微镜、酒精灯、水浴锅、电炉、电热恒温水浴锅等。
四、实验步骤1. 组胺提取（1）取新鲜猪肝、猪肾、鸡蛋清，分别称取适量，放入烧杯中。
（2）加入适量的盐酸，用玻璃棒搅拌，使组织充分破碎。
（3）将混合液煮沸，持续5分钟，以破坏蛋白质。
（4）将煮沸后的混合液冷却至室温。
（5）加入适量的氢氧化钠溶液，调节pH值至7.0。
（6）加入适量的硫酸铜溶液，搅拌，使组胺与铜离子结合。
（7）加入适量的氨水，使溶液中的组胺与铜离子形成沉淀。
（8）将沉淀过滤，收集滤液。
2. 组胺鉴定（1）将滤液滴入试管中，加入适量的硫酸，观察颜色变化。
（2）将滤液滴入试管中，加入适量的硫酸锌溶液，观察颜色变化。
（3）将滤液滴入试管中，加入适量的硫酸铝溶液，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 组胺提取根据实验步骤，成功提取了猪肝、猪肾、鸡蛋清中的组胺。
2. 组胺鉴定（1）加入硫酸后，滤液呈蓝色，表明组胺存在。
（2）加入硫酸锌溶液后，滤液呈红色，表明组胺存在。
（3）加入硫酸铝溶液后，滤液呈黄色，表明组胺存在。
六、实验结论1. 成功提取了猪肝、猪肾、鸡蛋清中的组胺。
2. 通过硫酸、硫酸锌、硫酸铝等试剂对组胺进行鉴定，证实了组胺的存在。
七、实验讨论1. 在组胺提取过程中，盐酸的浓度、煮沸时间、pH值等条件对组胺的提取效果有一定影响。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
组胺的理化检测方法
1．原理
鱼体中组织胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。
2．试剂
5％碳酸钠溶液。
25％氢氧化钠溶液。
偶氮试剂－甲液：取0.5g对硝基苯胺，加5ml盐酸溶解后，再加水稀释至200ml，置冰箱中。
乙液：0.5%亚硝基钠溶液，临用现配。
甲液5ml、乙液40ml混合后立即使用。
正戊醇。
10％三氯乙酸溶液。
组织胺标准溶液：精密称取0.2767g于105℃干燥2h的磷酸组织胺，溶于水，移入100ml容量瓶中，再加水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于1㎎组织胺。
磷酸组织胺标准使用液：吸取1.0ml组织胺标准溶液，置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于20μg组织胺。
3.操作方法
样品处理：称取5～10g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15.0～20.0ml 10％三氯乙酸溶液，浸泡2～3h，过滤。
吸取1.0ml滤液，置于分液漏斗中，加25％氢氧化钠溶液使呈碱性，每次加入3ml正戊醇，振摇5min，提取三次，合并正戊醇并稀释至10.0ml。
吸取1.0ml正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3ml 1Ｎ盐酸，振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0ml。
备用。
测定：吸取1.0ml盐酸提取液，于10ml比色管中。
另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0ml组织胺标准使用液（相当于0、4、8、12、16、20μg 组织胺），分别置于10ml比色管中，各加1ml 1N盐酸，样品与标准管各加3ml 15％碳酸钠溶液，3ml偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min后用1㎝比色杯以零管调节零点，与480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准色列目测比较。
4．计算
A1
×100
1000
Ｘ
1= ………………………………….⑴
1 1 1
ｍ1×××
Ｖ1 10 10
式中：Ｘ1 样品中组织胺的含量，㎎/100g;
Ｖ1 加入10％三氯乙酸溶液的体积，ml；
A1 测定时样品中组织胺的含量，μg；
ｍ1 样品质量，g。
符合水产品卫生标准GB5009.45-85
产生组胺原因：当鱼体变质或鲜度较差时，细菌大量繁殖，尤其是摩尔根变型杆菌，可使鱼体内组胺酸脱羧基而形成组胺。
也有人认为：由于鱼体本身的自溶作用不断加深使其变质，产生大量的腐败胺，分解后形成组胺，特别是鲐鱼属大洋洄游性鱼类，体内酶的活性强，为适应旺盛的新陈代谢需要，故组胺含量也就较白肉鱼类为多。
另外，还有人认为，引起中毒的原因是其他有毒物质与组胺的共同作用所致。