小球藻固定化培养的初步研究

从 总 的生 长趋 势来 看 （ 见图 １ ） ， 针头 越 小 ， 胶珠
直径越小 ， 细胞 的生长量越大 。胶珠直径越大 ， 所产 生 的扩散传质阻力越大 ， 胶珠 内细胞所需营养不足 ， 积累的代谢产物增多 ， 细胞生长环境恶化 ， 同时胶珠
世纪 ８ Ｏ 年代才开始进行探索性的工作 。初步的研究 结果表 明， 微藻 固定化在有用物质及能振生产 、 生物 传感器 、 污水处理 、 种质保存及模拟生物反应器等领
２ ． ２ 接 种 量 对 固 定化 细胞 生 长 的影 响
从图 ２ 可以看 出， 随着接种量的增加 ， 固定化小 球藻 的生长量随之增长 ， 但从图 ３中可以看出 ， 固定
化小球藻的生长率 随着初 始接种量 的增加而降低 ， 又考 虑到在一般培养条件下细胞密度可达到 ｌ Ｏ ｓ 细 胞数 ， 毫升 ， 为 了省去浓缩藻液的过程 ， 因此一般选 择１ ０ ５ 细胞数 ， 毫升的接种密度 即可。
固定化后 ， 生长较缓慢 ， 可能是营养物质 和光线进入
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初始接种密度
图 ３不 同初 始接 种密度 对 固定化 小球 藻生 长率的 影响
域具有广阔的应用前景【 ｌ － ２ 】 。 海洋徽藻的固定化以能进行放 氧型光合作 用的 海洋生物为研究对象 ，从而使 固定化技术在海洋生 物技术领域中开辟 了新的研究和应用方 向。因此 ， 其
内部 的光照不足 ，所 以这些不利条件使得大直径的 固定化小球藻生长受阻 ， 又因胶珠越小 ， 制备速度越
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培养天数
不 同接 种 量对 固定化 ， ｊ 、 球 藻 细胞 生长 的影 响
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吁 研 究 与 综 述
胶珠收到一定程度 ，但在实验 ∞ ６ ∞ ５ ４ ∞ ３ ∞ ２ ∞ ｌ ∞ Ｏ ∞ ３ ∞ ２ ∞ ２ ｌ 如 １ ∞ ∞ Ｏ 的影 响所阻碍 的缘故 周期 内， 一直处于不断的生长阶段 ， 表明固定化小球 藻具有较长的生长周期 ， 有利于进行种质保存 。
研 究来自百度文库与 综 述
小 球 藻 固 定 化 培 养 的 初 步 研 究
陈书 秀 （ 山东东方海洋科技股份有限公司 山东烟 台 ２ ６ ４ ０ ０ ３ ）
摘要 ： 用褐藻酸钙对小球 藻进行 固定化培养 实验 ， 测定不同胶粒大小、 胶珠密度、 氯化钙浓度及不
同接种量对该藻的影响， 比较 了自由化生长与 固定化细胞的生长曲线。 小球藻在褐藻酸钙凝胶 中仍具 有呼吸和光合作用的能力。球径为 ３ ． ５毫米， 氯化钙浓度为 ３ ％时， 细胞 生长快 ， 每５ ０ 毫升培养液 中加
州
２ ． ３ 氯化 钙 浓 度 对 固定 化 细胞 生 长 的 影 响
考虑成球 和小球藻的生长情况 ，固定化时氯化 钙的浓度为 ３ ％较好。见图 ４ 。
培养天数
图 ６小球 藻 自由生长 与 固定化 细胞 的生 长 曲线
慢， 一般选用 ６ 号针头。
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研究成果不仅为海洋生物资源的研究 、开发和利用 提供更广阔的应用前景 ，而且也将丰富现有 的固定 化理论和技术。然而 ， 海洋徽藻固定化 的基础性研究
入２ ０ ０个胶 珠 时 细胞 生长量 大 。与 游 离的 小球 藻相 比 ， 固定化 小球 藻 生长慢 ， 但 生 长周期 长 。 关 键词 ： 小球 藻 、 固定化 、 生长
固定化作为构建生物反应器 的一项重要 的生物 工程技术 ， 最初用于酶 的固定化 ， 随后用 于细苗、 酵 母等微生物活细胞的固定化培养。在大量 的基 础研 究 和生产实践 中，已经取得 了十分显著 的经济效益 和社会效益 。然而对藻类细胞的固定化研究 ，在 ２ ０
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１ 材料与方法
小球藻 （ ， Ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｅ ｌ ｌ ａ ｓ ｐ ． ）藻种 由中国海洋大学提 供， 本实验室保存。培养液为 培养基 ， 光照强度为 ２ ０ ０ ０ ３ ０ ０ ０勒克斯 ， 温度为 ２ ０ ｃ Ｉ ＝ 。 配制 ３ ％（ ｗ， 、 ， ） 的 海藻酸钠凝胶溶液 ，将一定密度 的藻液与凝胶溶液 按一定 的体积比混合 ，充分搅匀后制成胶 一 藻混悬 液， 用注射器吸取混悬液 ， 滴入氯化钙溶液 中， 约３ ０ 分钟后形成 固化的海藻酸钙胶珠。 用消毒海水洗涤 ３
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遍后 ，按各试验的要求培养于 １ ０ ０ 毫升 的三角烧瓶 （ ５ ０ 毫升 培养液 ） 中。
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２ 结果 与讨 论
２ ． １胶球 直径对 固定化 细胞 生长的影响
作者简 介 ： 陈书秀 （ １ ９ ８ ３ ～） ， 女， 工程师 ， 硕士 ， 主要从事微藻 生理生化研究 。
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培养 天数
图 １胶珠大小对固定化 小球藻生长的影响
工作还相当薄弱。本研究 以海藻酸钙为固定化载体 ， 以具有全面均衡营养价值及多种应用前景的小球藻囫 为固定化对象 ，初步探讨 固定化条件对其生长 的影
响 ，以期为 固定化培养海洋徽藻技术 的应用 和发展 提供必要 的实验依据和理论基础。