氨在兔肝性脑病发病机理中的作用

氨在兔肝性脑病发病机理中的作用

The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy

【教学对象与学时】

一、教学对象：五年制本科

二、学时：4学时

【预习要求】

预习肝性脑病的概念，发病机制及其决定和影响因素。

【目的要求】

一、采用肝大部分结扎，复制急性肝功能不全的动物模型。

二、观察肝性脑病的表现，探讨血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

【重点和难点】

一、重点

1、掌握复制急性肝功能不全动物模型的实验方法；

2、掌握复制肝性脑病动物模型的实验方法；

3、观察肝性脑病的临床表现；

4、掌握血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

二、难点

1、复制急性肝功能不全的动物模型；

2、血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

【教学过程设计】

1、课前提问和预习检查

2、讲解本次实验的目的、所用动物和器材、实验分组、观察指标、实验步骤。

3、学生分组进行实验、记录结果。

4、实验结束前汇总全班实验结果，并对实验结果进行讨论。

【课前预习检查或提问】

1、Definition of Hepatic Encephalopathy

肝性脑病(hepatic encephalopathy)是由于急性或慢性肝功能不全，使大量毒性代谢产物在血循环中堆积，临床上出现一系列神经精神症状，最终出现肝性昏迷。这种继发于严重肝病的神经精神综合征，称为肝性脑病。对于这个概念，我要强调两点：第一、肝性脑病的病理生理条件是有严重肝脏疾病，第二，是在此条件上，并有诱因时出现了神经精神综合症。这两个方面缺一不可，共同构成肝性脑病这个概念。

2、Stages

of Hepatic Encephalopathy

临床上根据肝性脑病症状的轻重进行分期，即意识障碍程度、神经系统症状和脑电图的变化，将肝性脑病分为四期，分别为：前驱期；昏迷前期；昏睡期；昏迷期。

3、Mechanismsof Hepatic Encephalopathy

目前有数个学说试图解释肝性脑病的发病机制。分别有氨中毒学说( Ammonia Intoxication )，假性神经递质学说 ( False Neurotransmitter )、血浆氨基酸失衡学说( Imbalance of Amino Acid ) ，GABA学说 ( r-Amino Butyric Acid )。其中最早、最重要的学说是氨中毒学说。临床发现，60-80%的肝性昏迷患者有血氨升高。而且在临床上应用降血氨治疗可明显缓解肝性脑病症状。

4、How to Reproduce a Animal Modelof Hepatic Encephalopathy

先采用大部分肝结扎的方法（相当于肝大部分切除术），造成肝功能（主要是解毒功能）的严重损害，复制一个严重肝疾病的动物模型，然后经消化道（十二指肠）输入复方NH4cl 溶液，使动物体内血氨迅速升高，以致出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病的症状。

【课前讲解】

1、Objective：

(1)采用肝大部分结扎，复制急性肝功能不全的动物模型。

(2)观察肝性脑病的表现，探讨血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

2、Animal：

家兔（性别、体重）

3、Group：

Ⅰ组：肝大部分（结扎）+N·S溶液（3ml/kg/5`）

Ⅱ组：肝大部分（结扎）+复方NH4cl溶液（3ml/kg/5`）

Ⅲ组：假手术（不结扎肝）+复方NH4cl溶液（3ml/kg/5`）

4、Observation Index ：见表格

5、Procedure：

(1) 称重、固定、剪毛、局麻（皮下浸润局麻）（1%普鲁卡因7-8ml）

(2) 上腹正中切口（8cm）游离肝叶、肝大部分结扎（示图）（扎肝反应：迅速变色）

(3) 十二指肠插管，关闭腹腔（血管钳对合夹闭）

(4) 注药（3ml/kg 每5`注药一次）

(5) 观察

6、Notice：

1、游离肝脏的动作要轻柔，结扎应在肝脏根部（肝组织脆性大，要防止出血）

2、剪镰状韧带时不要刺破膈肌（以防引起气胸，肺不张），剥离肝胃韧带时，勿弄破周围的大血管。

3、十二指肠插管时注意方向（向十二指肠方向）。插管应轻柔通畅，固定牢靠，插管后注入N.S液以检查管道是否通畅。

4、术后须关闭腹腔，防止腹压↑→内脏外溢

5、区别挣扎与抽搐（主动与否；抽搐具有节律性）

【典型结果】

查肌张力：肌张力是静息状态下的肌肉紧张度，增加时见于维体来受损。

查反应性：轻敲头部（兔台）

查兴奋反应：轻拍桌子

抽搐：有节律地抽动（注意与挣扎区别）

角弓反张：即去大脑僵直（decerebrate rigidity）是指去大脑动物在肌紧张活动方面出现亢进现象，表现为动物四肢伸直，头尾昂起，脊柱挺硬，去大脑僵直主要是伸肌（抗重力肌）紧张性亢进，四肢坚硬如柱。(备注：在中脑上丘与下丘之间及红核的下方水平面上将麻醉动物脑干切断，称为去大脑动物。手术后动物立即出现全身肌紧张加强、四肢强直、脊柱反张后挺现象，称为去大脑僵直（强直）。去大脑僵直主要是一种反射性的伸肌紧张性亢进，是一种过强的牵张反射。引起过强的牵张反射，主要是

由于中脑水平切断脑干以后，来自红核以上部位的下行抑制性影响被阻断，网状抑制系统的活动降低，易化系统的作用因失去对抗而占优势，导致伸肌反射的亢进。)

【分析讨论】

1、针对本实验，我们分组是否正确，为什么？

科研设计原则为：对照、随机、重复、在本实验中，根据此原则还应设置一个空白对照组，即假手术+NS，以观察动物“正常”时表现（“正常”亦为相对正常，因麻醉及腹部切口，十二指肠插管对动物都有刺激作用），但考虑分组动手问题，我们省略了这一组。

2、以上三组分别复制了什么模型，为什么？

Ⅱ组是“肝性脑病”动物模型，Ⅲ组是“氨中毒”，Ⅰ组是“肝功能不全”。

3、比较三组所得的结果，可得出什么结论？

“肝性脑病”动物先出现兴奋性↑，而后抽搐、角弓反张、最后死亡。Ⅱ组最先出现以上表现（注药总量最小），其次为Ⅲ组（注药总量>Ⅱ组）、Ⅰ组至实验结束仍未发生上述症状。

若Ⅱ、Ⅲ组相比较、结果与理论相悖，则考虑①个体差异（对药物敏感性）②实验仅1个动物，未重复。

4、氨的来源？

（1）机体代谢产氨：氨基酸脱氨基作用-为机体氨的主要来源

（2）消化道吸收：为血氨的主要来源：