梅毒实验室检测技术PPT讲稿
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滴度结果一定一致 11. TPPA（+）/ RPR（-）可能是极早期梅毒 12. ELISA法检测阳性，TPPA复检阴性，最终结果报告：TPPA
试验阴性，解释ELISA法为假阳性。
3
实验室检测的目的？
早期发现 临床诊断 有效治疗 精准医疗 疫情报告
检测方法 检测策略
结果的解读和合理应用
医生、检验、防保
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速？转幅？
√
2、定性试验
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，
×
并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原
反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果
？滴/mL，1滴=？ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
感性和特异性较好。可作为梅毒筛查试验。
• 方法：（1）暗视显微镜检查
（2）镀银染色法 （3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
病原学检查的临床意义
• 螺旋体检查是诊断早期梅毒
的最佳方法，对于患者的早 期诊断、及时治疗、预后和 尽早切断传染源都有十分重 要的意义。
• 如未见到梅毒螺旋体，并不
能排除患梅毒的可能性。
梅毒血清学检测方法
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
问题： 为什么梅毒诊断需要上述两类血清学检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
• 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面的脂质作
出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体（非特异性抗体）。
• 未经治疗的病人，其血清内的非特异性抗体可长期存在。
经正规治疗后，非特异性抗体可以逐渐减少滴度至转为阴
性。
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T491—
2016:梅毒非特异性抗体检测操作指南
２０１６-０７-０７发布
２０１６-１２-１５实施
非梅毒螺旋体抗原血清学原理
1、仪器：水平旋转仪，转速、转幅
100r/min 约18mm
2、定性试验
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中， 并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ，
亮光下观察结果
60滴/mL，1滴=17ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
如和达到实验室检测的基本要求
检测方法
检测策略
质量保证
管理层面 （行政、疾控） 生产厂家 医疗机构
（医生、检验、防保）
常用梅毒实验室检测方法
检测方法
病原学检测 梅毒螺旋体血清学试验 非梅毒螺旋体血清学
组织病理学检测 白细胞检测 蛋白检测
未经治疗的梅毒病感染人梅的毒螺自旋然体 病程
• 方法包括：
（1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。
• 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 • 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉
眼所见
• 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理示意图
1:1 1:2
1:4
1:8
1:16
1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
定量试验结8 1:16
+ - - - - 1:1 + + - - - 1:2 + + + + - 1:8
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
• 非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏
定量试验结果判断
血清稀释度
结果
？ 1:2 1:4 1:8 1:16
+ - - - -？ ++ - - -？ ++++ -？
问题：定量试验原倍血清滴度是多少？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验
稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
3、定量试验
稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
下同定性试验。 问题：定量试验血清稀释需要使用试管吗？
？ 1:2
1:4
1:8
1:16
1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
梅毒实验室检测技术课件
梅毒控制规划中期评估梅毒实验室检测知识调查（1）
1.一旦感染梅毒，梅毒螺旋体特异性抗体通常会终身阳性 2.RPR/TRUST只能用于梅毒初筛 3. 二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性 4.接受抗梅治疗的婴儿，随访18个月后TPPA （+）/RPR（- ）可
结果如何解读和合理应用
如何发挥实验室检测作用
实验室检测≠ 实验室诊断
艾滋病检测策略最新进展（2015）
确证（诊）试验 → 补充试验
阳、阴性→有、无反应 增加了各种检测策略 强调临床诊断
梅毒是一个可以临床治愈的传染病
病例诊断依据
➢病史 ➢症状 ➢实验室检查
实验室检查结果对梅毒诊断及判愈有决定性意义
确诊为胎传梅毒 5.常规梅毒血清学检测的是IgG抗体，不能检测到IgM抗体 6.TPPA（- ）/ RPR（+）结果一般可排除梅毒螺旋体感染 7. TPPA滴度检测是临床治疗梅毒效果评价的重要参考指标 2
梅毒控制规划中期评估梅毒实验室检测知识调查（2）
8. 新生儿血清TPPA（+）/ RPR（+），可诊断为先天梅毒 9.梅毒初筛可采用任何一种血清学检测方法 10. RPR和TRUST的方法原理相同，所以两种方法的定量试验
感染梅毒螺旋体
2-6周
一期梅毒
中枢神经系统感染
1-3月 二期梅毒
1-3月
隐形梅毒
28% 三期梅毒 2-50年
72%终生隐形30梅% 毒
梅毒树胶肿 心血管梅毒 脊髓痨, 麻痹性痴呆
病原学检查
• 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿
疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光， 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
试验阴性，解释ELISA法为假阳性。
3
实验室检测的目的？
早期发现 临床诊断 有效治疗 精准医疗 疫情报告
检测方法 检测策略
结果的解读和合理应用
医生、检验、防保
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速？转幅？
√
2、定性试验
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，
×
并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原
反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果
？滴/mL，1滴=？ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
感性和特异性较好。可作为梅毒筛查试验。
• 方法：（1）暗视显微镜检查
（2）镀银染色法 （3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
病原学检查的临床意义
• 螺旋体检查是诊断早期梅毒
的最佳方法，对于患者的早 期诊断、及时治疗、预后和 尽早切断传染源都有十分重 要的意义。
• 如未见到梅毒螺旋体，并不
能排除患梅毒的可能性。
梅毒血清学检测方法
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
问题： 为什么梅毒诊断需要上述两类血清学检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
• 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面的脂质作
出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体（非特异性抗体）。
• 未经治疗的病人，其血清内的非特异性抗体可长期存在。
经正规治疗后，非特异性抗体可以逐渐减少滴度至转为阴
性。
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T491—
2016:梅毒非特异性抗体检测操作指南
２０１６-０７-０７发布
２０１６-１２-１５实施
非梅毒螺旋体抗原血清学原理
1、仪器：水平旋转仪，转速、转幅
100r/min 约18mm
2、定性试验
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中， 并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ，
亮光下观察结果
60滴/mL，1滴=17ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
如和达到实验室检测的基本要求
检测方法
检测策略
质量保证
管理层面 （行政、疾控） 生产厂家 医疗机构
（医生、检验、防保）
常用梅毒实验室检测方法
检测方法
病原学检测 梅毒螺旋体血清学试验 非梅毒螺旋体血清学
组织病理学检测 白细胞检测 蛋白检测
未经治疗的梅毒病感染人梅的毒螺自旋然体 病程
• 方法包括：
（1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。
• 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 • 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉
眼所见
• 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理示意图
1:1 1:2
1:4
1:8
1:16
1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
定量试验结8 1:16
+ - - - - 1:1 + + - - - 1:2 + + + + - 1:8
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
• 非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏
定量试验结果判断
血清稀释度
结果
？ 1:2 1:4 1:8 1:16
+ - - - -？ ++ - - -？ ++++ -？
问题：定量试验原倍血清滴度是多少？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验
稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
3、定量试验
稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
下同定性试验。 问题：定量试验血清稀释需要使用试管吗？
？ 1:2
1:4
1:8
1:16
1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
梅毒实验室检测技术课件
梅毒控制规划中期评估梅毒实验室检测知识调查（1）
1.一旦感染梅毒，梅毒螺旋体特异性抗体通常会终身阳性 2.RPR/TRUST只能用于梅毒初筛 3. 二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性 4.接受抗梅治疗的婴儿，随访18个月后TPPA （+）/RPR（- ）可
结果如何解读和合理应用
如何发挥实验室检测作用
实验室检测≠ 实验室诊断
艾滋病检测策略最新进展（2015）
确证（诊）试验 → 补充试验
阳、阴性→有、无反应 增加了各种检测策略 强调临床诊断
梅毒是一个可以临床治愈的传染病
病例诊断依据
➢病史 ➢症状 ➢实验室检查
实验室检查结果对梅毒诊断及判愈有决定性意义
确诊为胎传梅毒 5.常规梅毒血清学检测的是IgG抗体，不能检测到IgM抗体 6.TPPA（- ）/ RPR（+）结果一般可排除梅毒螺旋体感染 7. TPPA滴度检测是临床治疗梅毒效果评价的重要参考指标 2
梅毒控制规划中期评估梅毒实验室检测知识调查（2）
8. 新生儿血清TPPA（+）/ RPR（+），可诊断为先天梅毒 9.梅毒初筛可采用任何一种血清学检测方法 10. RPR和TRUST的方法原理相同，所以两种方法的定量试验
感染梅毒螺旋体
2-6周
一期梅毒
中枢神经系统感染
1-3月 二期梅毒
1-3月
隐形梅毒
28% 三期梅毒 2-50年
72%终生隐形30梅% 毒
梅毒树胶肿 心血管梅毒 脊髓痨, 麻痹性痴呆
病原学检查
• 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿
疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光， 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。