常见生理指标的测定方法
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常见生理指标的测定方法
一、SOD
1、称0.2g叶片（去叶脉）——研钵(加1mLPBS7.8）——定容至2mL离心管——离心（15000r，15min）——得上清液
2、取1.5mLPBS7.8，Met、NBT、核黄素溶液EDTA-Na2各0.3mL，上清液0.1mL（对照管用0.1mLPBS7.8替代,2支）ddH2O0.5mL（温控25℃-35℃，光强4000Lx）——560nm处比色——计算
二、POD、CAT
称0.2g叶片（去叶脉）——研钵(加1mLPBS7.8）——定容至2mL离心管——离心（15000r，15min）——得上清液
1、POD：加1mLH2O2，愈创木酚0.95mL，PBS7.0 1mL,上清液0.05mL——于470nm处比色——分析计算
2、CA T：加1mL，H2O1.95mL,上清液0.05mL——于240处比色——计算
三、MDA×1+1、外加离心管×1
1、0.5g——研钵（加2mL10%TCA）——研磨（8mL10%TCA）——定容至10mL离心管——离心（5000r，-min）——得上清液
2、取2mL上清液（加2mLTBA,对照以水代替）——沸水浴15min——于450、532、600nm 处比色——计算
四、叶绿素
0.2g——25mL试管（加20mL提取液，丙醇：乙醇=2:1）——放置24h——于645、663nm处比色——计算
五、蛋白质含量测定×2+1,外加离心管×1
1、标准曲线的制作
取6支具塞试管按下表加入试剂，配制0--1000µg/mL牛血清蛋白液各1mL
编号0 1 2 3 4 5
蛋白标液mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
ddH2O 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0
蛋白含量µg0 200 400 600 800 1000。