唾液淀粉酶最适pH值的测定
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(责编 卢建龙)
118 广西教育 2015.2
25.50
7.0
3.050
1.950
7.2
3.600
1.400
(二)唾液的获取
先漱口1~2次,然后含一大口水约1 min,期间做咀嚼运动,
然后收集至杯子中。
(三)淀粉用量的确定
如表2,设置实验组与空白对照组。
表2 实验组和空白对照组设置表
用量(m L)
实验组
1
7.0 pH 缓冲液
0.9
2.5 g/L 淀粉
(五)最适pH的确定
实验过程及其记录如下表:
pH
6.0 6.2 6.4 6.6
pH 缓冲液
0.9 0.9 0.9 0.9
2.5 g/L 淀粉
0.3 0.3 0.3 0.3
某倍数唾液(5 倍) 0.1 0.1 0.1 0.1
混匀,37℃水浴 7.5 min,然后向每管加 2 滴碘液
H2O A660
6
6
如下配制酶的稀释液。
表3a 酶液稀释倍数
稀释倍数 5 酶液(mL) 1 H2O(mL) 4
10
15
20
25
30
0.5
0.4
0.25
0.2
0.2
4.5
5.6
4.75
4.8
5.8
通过实验得到的酶液稀释对照结果如下表:
表3b 酶液稀释对照表
稀释倍数
5
10
15
20
25 30
空白
7.0 pH 缓冲液
0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9
【参考文献】 [1]许冰,袁 媛,赵 文 献 .p H 值 对 酶活 性影响 的实验 观 察 [J].临床合理用药,2010.(10) [2]吴耀生.医学生物化学与分子生物学实验指南[M].北 京:人民卫生出版社,2007 [3]尚渤程,黎一苇.人体常见pH值[J].生物学教学,2 0 0 9 (12)
0.9
2.5 g/L 淀粉(mL) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
0.3
唾液
0.1 0.1 0.1 0ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1 0.1 0.1
—
H2O
6
6
6
6
6
6
6
混匀,37℃水浴7.5 min,然后向每管加2滴碘液。
混匀,观察到稀释5倍的1号管颜色最浅,为最适管。
117
广西教育 2015.2
教学创新·理科园地
一、实验过程 (一)不同pH缓冲液的配制
按下表配置不同pH的缓冲液。
表1 磷酸缓冲液配制表
pH
0.2 mol/L Na2HPO4 (ml) 0.2 mol/L NaH2PO4 (ml)
6.0
0.615
4.385
6.2
0.925
4.075
6.4
1.325
3.675
6.6
1.875
3.125
6.8
2.450
0.4
唾液淀粉酶PH-A660图
0.35
0.3 0.25
0.2
0.15 0.1
6
6.2
6.4
6.6 6.8
7
PH 7.2
二、实验结果 由以上实验过程可以得出,唾液淀粉酶的最适pH为6.4。 三、讨论 唾液的pH一般为6 .6~7.1,唾液淀粉酶的最 适pH约为 6.8。在这次实验中产生误 差的可能原因为:(1)制备酶时存 在一些不足。直接漱口获得酶的方法对酶浓度的影响较大;每 个人因为个体差异,其唾液淀粉酶对酸碱度的适应程度不同。 (2)实验 设 置不理 想。固定的缓冲液配置不够精确;水浴 保 温 时 间和反 应 时 间不一 致。另外,实 验中碘 液 的 浓 度也 直 接 关 系到 对 实 验 结果的准 确观 察,若实 验中配 制的碘 液浓 度 高,其 颜 色 将 实 际反 应 的 颜 色 遮 蔽,对 淀 粉用 量 和 淀 粉 稀 释 倍 数 的 判定容易造成 影响,使实验 结果不能准确地观 察 得到。酶活 性 受 p H 的 影 响,在 3 7℃时,最 适 p H为 6 .4,接 近中 性,与口腔 的环境相似,所以唾液淀粉酶在人体口腔内有较 好的初步消 化淀粉的作用。
酶在水溶液环境中的解离状态和行为,都受到H+的影响, 酶活性中心功能基团解离状态将直接影响到酶的活化以及酶与 底物的亲和力,其会随着溶液pH的改变而改变。所以,溶液pH对 酶 催化 反 应的速 度 有明显的影响。在 某一pH值时,酶活性 达 到 最大,这一数值称为酶的最适pH。不同的酶的最适pH不相同。
0.1
唾液(稀释 10 倍)
0.1
H2O
5.9
2
3
0.9
0.9
0.2
0.3
0.1
0.1
5.8
5.7
空白对照 0.9 — 0.1 6
混匀,37℃水浴7.5 min,然后向每管加2滴碘液。
混匀,观察现象看出,0.3 mL 2.5 g/L淀粉溶液颜色反应
最浅,选择该管做下一步实验。
(四)酶液稀释倍数的确定
理科园地·教学创新
唾液淀粉酶最适pH值的测定
□清华大学附属中学14班 唐睿谦
【摘 要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物 浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。温度 一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。在不 同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶 的最适pH值。在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘 液 反 应呈现 颜色反 应,通 过 对颜色的观 察和分光 光 度计测量产 物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀 粉酶的最适pH。
6
6
0.336 0.257 0.192 0.309
用量(m L)
6.8 7.0 7.2 0.9 0.9 0.9 0.3 0.3 0.3 0.1 0.1 0.1
6
6
6
0.354 0.371 0.402
混匀,用蒸馏水调零,测定A660。 以A6 6 0 为 纵 坐标,p H为横坐标作图,得出如下结果:
A660 0.45
(上接第95页) 教 师 将 教 室 模 拟为哥 伦布发 现 新大 陆后与人 民 见面的现
场,由一个学生扮演“哥伦布”向大家讲述开辟新航路的整个过 程和 传 奇 经 历。在 这一 过 程中,同时运用多媒 体 将 新 航 路 开辟 的背 景资 料、图片 和 视 频 展 示出来,以增 加实 感。教 师和 学 生 扮 演 记 者、市民 和 官员 对 新 航 路 开 辟 的原 因、结 果、影 响 等 问 题进行提问,利用这种一问一答的方式把历史知识转化为学生 自己探究和思考的结果。与此同时,教师适时地向学生提出新 的问 题,如“ 在 当时 的历史情 景中,你会 怎么做 ”等,引导 学 生 进 行思 考 和 探 究。之 后 设 置“哥 伦布发 现 美洲 新闻发布会”的 场 景,让 学 生 扮 演哥 伦布发布 新 闻,将开 辟 新 航 路 的原 因、过 程、重 要意 义等历史 知 识阐 述 出来,加 深 对历史 知 识 的理 解和
淀粉经唾液中的淀粉酶水解,生成糊精和麦芽糖,在底物 过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝 色复合物,其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力 成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生的蓝色在660 nm 处的吸 光 度值 来 表 示淀 粉 酶的 活性。在 温 度、酶浓度相同的情 况下,酶活力在最适pH的情况下达到最大。
掌握,更好地完成教学目标。 综上所述,情境再现教学法在高中历史教学中有着较为广
阔的发展空间,利用这种教学法进行教学可以取得很好的教学 效 果。这一方 法的应 用打 破了传 统 历史教学的固定 模 式,可以 充分激发和提升学生的学习积极性和主动性,加深学生对历史 知识的认知与理解,增强师生之间的互动性,实现针对性教学, 将教学效能提升上来。情境再现教学是一个系统化的教学设置 过 程,需 要 教 师 对历史 知 识 进 行充分 理 解,而后才 能 结合 表 演 法、自主 探 究 法、创 设 问 题 法 等 方 法 来 进 行 综 合 设 置,实 现情 境再现教学的目的,全面提升历史教学效能。
【关键词】唾液淀粉酶 最适pH 吸光值 【中图分类号】 G 【文献标识码】 A 【文章编号】0450-9889(2015)02B-0117-02
酶 是由生物体内活细胞产生的一种生物催化剂,细胞 新 陈代谢包括的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶 催 化化 学反 应的 能 力称为酶活 性。酶 的 化 学 本质 是 蛋白质,它 具 有两性电解质的性 质,在一定 溶 液中可以发 生 解 离作用。酶 无论在生活中还是在医学领域都具研究意义,酶的各种特性被 广泛 应 用于 各 个 领域。影响酶反 应活力的因素 很 多,主 要 包 括 pH、温度、酶浓度、金属离子浓度、抑制剂等。
118 广西教育 2015.2
25.50
7.0
3.050
1.950
7.2
3.600
1.400
(二)唾液的获取
先漱口1~2次,然后含一大口水约1 min,期间做咀嚼运动,
然后收集至杯子中。
(三)淀粉用量的确定
如表2,设置实验组与空白对照组。
表2 实验组和空白对照组设置表
用量(m L)
实验组
1
7.0 pH 缓冲液
0.9
2.5 g/L 淀粉
(五)最适pH的确定
实验过程及其记录如下表:
pH
6.0 6.2 6.4 6.6
pH 缓冲液
0.9 0.9 0.9 0.9
2.5 g/L 淀粉
0.3 0.3 0.3 0.3
某倍数唾液(5 倍) 0.1 0.1 0.1 0.1
混匀,37℃水浴 7.5 min,然后向每管加 2 滴碘液
H2O A660
6
6
如下配制酶的稀释液。
表3a 酶液稀释倍数
稀释倍数 5 酶液(mL) 1 H2O(mL) 4
10
15
20
25
30
0.5
0.4
0.25
0.2
0.2
4.5
5.6
4.75
4.8
5.8
通过实验得到的酶液稀释对照结果如下表:
表3b 酶液稀释对照表
稀释倍数
5
10
15
20
25 30
空白
7.0 pH 缓冲液
0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9
【参考文献】 [1]许冰,袁 媛,赵 文 献 .p H 值 对 酶活 性影响 的实验 观 察 [J].临床合理用药,2010.(10) [2]吴耀生.医学生物化学与分子生物学实验指南[M].北 京:人民卫生出版社,2007 [3]尚渤程,黎一苇.人体常见pH值[J].生物学教学,2 0 0 9 (12)
0.9
2.5 g/L 淀粉(mL) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
0.3
唾液
0.1 0.1 0.1 0ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1 0.1 0.1
—
H2O
6
6
6
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6
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6
混匀,37℃水浴7.5 min,然后向每管加2滴碘液。
混匀,观察到稀释5倍的1号管颜色最浅,为最适管。
117
广西教育 2015.2
教学创新·理科园地
一、实验过程 (一)不同pH缓冲液的配制
按下表配置不同pH的缓冲液。
表1 磷酸缓冲液配制表
pH
0.2 mol/L Na2HPO4 (ml) 0.2 mol/L NaH2PO4 (ml)
6.0
0.615
4.385
6.2
0.925
4.075
6.4
1.325
3.675
6.6
1.875
3.125
6.8
2.450
0.4
唾液淀粉酶PH-A660图
0.35
0.3 0.25
0.2
0.15 0.1
6
6.2
6.4
6.6 6.8
7
PH 7.2
二、实验结果 由以上实验过程可以得出,唾液淀粉酶的最适pH为6.4。 三、讨论 唾液的pH一般为6 .6~7.1,唾液淀粉酶的最 适pH约为 6.8。在这次实验中产生误 差的可能原因为:(1)制备酶时存 在一些不足。直接漱口获得酶的方法对酶浓度的影响较大;每 个人因为个体差异,其唾液淀粉酶对酸碱度的适应程度不同。 (2)实验 设 置不理 想。固定的缓冲液配置不够精确;水浴 保 温 时 间和反 应 时 间不一 致。另外,实 验中碘 液 的 浓 度也 直 接 关 系到 对 实 验 结果的准 确观 察,若实 验中配 制的碘 液浓 度 高,其 颜 色 将 实 际反 应 的 颜 色 遮 蔽,对 淀 粉用 量 和 淀 粉 稀 释 倍 数 的 判定容易造成 影响,使实验 结果不能准确地观 察 得到。酶活 性 受 p H 的 影 响,在 3 7℃时,最 适 p H为 6 .4,接 近中 性,与口腔 的环境相似,所以唾液淀粉酶在人体口腔内有较 好的初步消 化淀粉的作用。
酶在水溶液环境中的解离状态和行为,都受到H+的影响, 酶活性中心功能基团解离状态将直接影响到酶的活化以及酶与 底物的亲和力,其会随着溶液pH的改变而改变。所以,溶液pH对 酶 催化 反 应的速 度 有明显的影响。在 某一pH值时,酶活性 达 到 最大,这一数值称为酶的最适pH。不同的酶的最适pH不相同。
0.1
唾液(稀释 10 倍)
0.1
H2O
5.9
2
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0.9
0.9
0.2
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0.1
0.1
5.8
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空白对照 0.9 — 0.1 6
混匀,37℃水浴7.5 min,然后向每管加2滴碘液。
混匀,观察现象看出,0.3 mL 2.5 g/L淀粉溶液颜色反应
最浅,选择该管做下一步实验。
(四)酶液稀释倍数的确定
理科园地·教学创新
唾液淀粉酶最适pH值的测定
□清华大学附属中学14班 唐睿谦
【摘 要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物 浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。温度 一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。在不 同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶 的最适pH值。在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘 液 反 应呈现 颜色反 应,通 过 对颜色的观 察和分光 光 度计测量产 物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀 粉酶的最适pH。
6
6
0.336 0.257 0.192 0.309
用量(m L)
6.8 7.0 7.2 0.9 0.9 0.9 0.3 0.3 0.3 0.1 0.1 0.1
6
6
6
0.354 0.371 0.402
混匀,用蒸馏水调零,测定A660。 以A6 6 0 为 纵 坐标,p H为横坐标作图,得出如下结果:
A660 0.45
(上接第95页) 教 师 将 教 室 模 拟为哥 伦布发 现 新大 陆后与人 民 见面的现
场,由一个学生扮演“哥伦布”向大家讲述开辟新航路的整个过 程和 传 奇 经 历。在 这一 过 程中,同时运用多媒 体 将 新 航 路 开辟 的背 景资 料、图片 和 视 频 展 示出来,以增 加实 感。教 师和 学 生 扮 演 记 者、市民 和 官员 对 新 航 路 开 辟 的原 因、结 果、影 响 等 问 题进行提问,利用这种一问一答的方式把历史知识转化为学生 自己探究和思考的结果。与此同时,教师适时地向学生提出新 的问 题,如“ 在 当时 的历史情 景中,你会 怎么做 ”等,引导 学 生 进 行思 考 和 探 究。之 后 设 置“哥 伦布发 现 美洲 新闻发布会”的 场 景,让 学 生 扮 演哥 伦布发布 新 闻,将开 辟 新 航 路 的原 因、过 程、重 要意 义等历史 知 识阐 述 出来,加 深 对历史 知 识 的理 解和
淀粉经唾液中的淀粉酶水解,生成糊精和麦芽糖,在底物 过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝 色复合物,其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力 成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生的蓝色在660 nm 处的吸 光 度值 来 表 示淀 粉 酶的 活性。在 温 度、酶浓度相同的情 况下,酶活力在最适pH的情况下达到最大。
掌握,更好地完成教学目标。 综上所述,情境再现教学法在高中历史教学中有着较为广
阔的发展空间,利用这种教学法进行教学可以取得很好的教学 效 果。这一方 法的应 用打 破了传 统 历史教学的固定 模 式,可以 充分激发和提升学生的学习积极性和主动性,加深学生对历史 知识的认知与理解,增强师生之间的互动性,实现针对性教学, 将教学效能提升上来。情境再现教学是一个系统化的教学设置 过 程,需 要 教 师 对历史 知 识 进 行充分 理 解,而后才 能 结合 表 演 法、自主 探 究 法、创 设 问 题 法 等 方 法 来 进 行 综 合 设 置,实 现情 境再现教学的目的,全面提升历史教学效能。
【关键词】唾液淀粉酶 最适pH 吸光值 【中图分类号】 G 【文献标识码】 A 【文章编号】0450-9889(2015)02B-0117-02
酶 是由生物体内活细胞产生的一种生物催化剂,细胞 新 陈代谢包括的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶 催 化化 学反 应的 能 力称为酶活 性。酶 的 化 学 本质 是 蛋白质,它 具 有两性电解质的性 质,在一定 溶 液中可以发 生 解 离作用。酶 无论在生活中还是在医学领域都具研究意义,酶的各种特性被 广泛 应 用于 各 个 领域。影响酶反 应活力的因素 很 多,主 要 包 括 pH、温度、酶浓度、金属离子浓度、抑制剂等。