糖化酶的研究进展及趋势_武金霞

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Progress in the R eseach of LTP in H ippcampus Chen G uifen①,Lin Longnian②

①Graduate Student,②Associate Pro fessor,Life Science School,East Chi2 na Normal Univer sity,Shanghai200062

K ey w ord　hippcam pus,long2term potentiation,LTP,ass ociative learning, mem ory contextual fear conditioning

糖化酶的研究进展及趋势3

武金霞　王　沛　李晓明　(河北大学生命科学学院)

3全国大学生“挑战杯”资助项目

关键词　糖化酶　酶洛力　多型性　结构基因

阐述了糖化酶的产生菌分布,不同菌株糖化酶的多型性,提高糖化酶酶活力水平的方法,糖化酶基因工程现状以及对糖化酶研究的未来趋势.

葡萄糖淀粉酶(G lucoamylase EC3.2.1.3)又称γ-淀粉酶,简称糖化酶(缩写G A或G),是最重要的工业酶制剂之一,它是一种外切型糖苷酶,从淀粉的非还原性末端依次水解α-1,4糖苷键,切下一个个葡萄糖单元,并像β-淀粉酶一样,使水解下来的葡萄糖发生构型变化,形成β-D-葡萄糖.对于支链淀粉,当遇到分支点时,它也可以水解α-1,6糖苷键,由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖.糖化酶也能微弱水解α-1,3连接的碳链,它一般都能将淀粉百分之百地水解生成葡萄糖,因此被广泛地应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸、甘油、淀粉糖等工业中,是我国产量最大的酶制剂产品.

一、糖化酶多型性的研究

20世纪80年代,对于糖化酶的研究发展极快,主要集中于糖化酶菌株的分离及其纯化工作.长期研究证明,糖化酶广泛地分布在微生物中,主要存在于黑曲霉、米曲霉、根霉等丝状真菌和酵母中,同时也存在于人的唾液、动物胰腺及细菌中.已报道的产糖化酶真菌微生物有23个属35个种;细菌有3属3种[1].

真菌产糖化酶组分多型性是常见的,Rhizopus nivenus 和Chalara paradoca[2,3]可分别产生5种和6种活性组分.陈冠军、罗贵民等人[4]采用硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素离子交换层析、Sephadex G-150凝胶过滤等方法,从黑曲霉AS3.4309变异株B-11的发酵液中分离出三种电泳均一的糖化酶GⅠ、GⅡ、GⅢ,其相对分子质量分别为27000、53000和67000;等电点分别为3.38、3.59和3.52;分子含糖量分别为8.7%、18.3%和13.6%;最适温度均为70℃,实验结果证明,三种同工酶都由一条多肽链组成.相对分子质量小的GⅠ具有完整的催化部位结构,而GⅡ和GⅢ多于GⅠ的那部分肽段,则可能起着稳定活性部位和增强结合底物能力的作用.GⅢ比G Ⅱ多一个约含100个残基的肽段,这个肽段可能是GⅢ能被生淀粉吸附的原因所在.One等[5]利用固相Acarbose 柱从市售糖化酶(A.niger)中分离出六种活性组分,每种活性组分均可从可溶性淀粉中释放出单一的β-D-葡萄糖终产物.这六种组分的相对分子质量、沉降系数、化学组成、等电点、酶的动力学及其他性质上各异.但Y a2 suda[6]从Monascus sp.NO.3403中分离出两种组分,电泳和超离心结果证明有同质性、相对分子质量、碳氮含量、

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自然杂志　25卷3期科技进展