儿茶素与表儿茶素稳定性考察-最新资料
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儿茶素与表儿茶素稳定性考察
Studies onconstancy of epicatechin and catechin
PAN JIyang GONG Weihong ZHANG Xiaohua*
(School of Chinese Pharmacy,Beijing University of Chinese Medicine , Beijing 100102)
【】Objective TO determine the catechin, epicatechin stability。Methods Colouration by vaniuin-hydroehloric acid , UV method ,The test wavelength was 500nm.Result In3 hoursepicatechin0.239,s0.003,RSD% 1.122.Conclusions The constancyofepicatechin was better than catechin.
随着药物化学及制剂产品质量研究的快速发展,儿茶素,表儿茶素作为标准品被广泛采用。用HPLC法测定的条件主要有以下几种:
1十八烷基硅烷键合硅胶柱(大连依利特,4
6mm×250mm,5μm);0.04mol?L-1枸椽酸溶液 N,N二甲基甲酰胺四氢呋喃(45∶8∶2)为流动相;检测波长为280nm;柱温35℃;流速10mL?min-1。儿茶素对照品、原儿茶素对照品[1] 。
2 色谱柱:PurospherstarRP-C18色谱柱(4
6mm×250mm,5μm,德国Merck公司);流动相V(乙腈)∶V(高纯水)∶V(磷酸)=10∶89 1∶0 9;检测波长278nm;流速1mL/min;
柱温25℃;儿茶素对照品[2]
3 色谱柱色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18(
4 6×250mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(15∶84∶1),流速:0 9ml?min-1;柱温30℃;检测波长:278nm,理论塔板数以儿茶素计不低于6000。儿茶素对照品[3]。
4色谱柱:Shiseido Capcell Pak C18(4.6 mm ×150 mm,5 μm);流动相为N,N- 二甲基甲酰胺- 四氢呋喃(4∶1)-0.04 mol/L 枸橼酸溶液(13∶87);流速1 mL/min;检测波长280 nm。儿茶素对照品与表儿茶素对照品[4]。
5 色谱条件色谱柱:WatersC18色谱柱(美国Waters公司生产);流动相为体积分数为0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度脱,柱温:室温;检测波长210nm.儿茶素和表儿茶素对照品[5]。
6色谱条件色谱柱为HypersilC18柱(250mm×4 6mm,10μm),测定儿茶素采用的流动相为乙腈-水-三乙胺(8:92:0 3,磷酸调pH4),检测波长206nm;测定表儿茶素采用的流动相为乙腈-水-三乙胺(11:89:0 3,磷酸调pH3),检测波长204nm[6]。
7 依利特C18柱( 200 mm×4.6mm, 5 μm) 为色谱柱, 以0. 04 mol?L- 1枸橼酸- N,N- 二甲基甲酰胺- 四氢呋喃
(45∶8∶2)为流动相,检测波长为280 nm。儿茶素和表儿茶素为标准品[7]。
8色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂
(150mm×4.6mm,4.6μm)。乙腈 0.5%三乙胺溶液(10∶90)(磷酸调pH值至3.0)为流动相,流速:1ml/min,检测波长280nm。以儿
茶素、表儿茶素为标准品[8]。
9用反相高效液相色谱法测定表儿茶素含量,色谱柱为diamonsil sb c-18柱(200mm×4.6mm,5um),流动相0.02mol/l,磷酸二氢钾(ph=3)-乙腈(83:17),检测波长273nm,流速
1ml/min,柱温25 。标准品表儿茶[9]。
文献报道,儿茶素与表儿茶素稳定性差[10],为了确定其稳定性做小实验:
一实验仪器:
uv-2800紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器XX公司
二实验标准品:
儿茶素,表儿茶素,购于中国药品生物制品检定所
三试剂
香草醛,盐酸,甲醇均为分析纯,北京化工厂出品
四试验方法:
用紫外法测标准品含量随时间变化曲线,比较二者稳定性,用香草醛盐酸显色,紫外扫描选定测定波长为500 nm。取1.2毫克表儿茶素标准品用甲醇配成25毫升标准液,儿茶素少量用甲醇配成标准液。
样品1:表儿茶素1毫升+6毫升香草醛5%水溶液+3毫升盐酸=10毫升
样品2:儿茶素1毫升+6毫升香草醛5%水溶液+3毫升盐酸
=10毫升
用两因素方差分析得:
表儿茶素均值x 0. 239s0.003RSD%1.122
儿茶素均值x 0. 134s0.012RSD%8.047
结论:表儿茶素比儿茶素稳定性好,建议选一个作为标准品时用表儿茶素。