银耳提取银耳多糖工艺流程-12

银耳提取银耳多糖工艺流程

一、综述

1、银耳

银耳又名白木耳，是一种高等真菌，性味甘、平、具有滋阴润肺、养胃生津之功效，自古以来被人们看作是延年益寿的佳品，是世界公认的最珍贵的食用菌和重要药材。

银耳子实体中除银耳多糖物质外，还含有一定量的果胶质、蛋白质、粗纤维等成分，这些物质的存在，将不利于多糖物质的提取分离和纯化。

2、多糖

多糖又名多聚糖，通常由多个单糖分子通过缩合、失水从而由甘糖键结合而成的一类分子结构复杂的高分子化合物。根据其脱水缩合的成分不同，可分为均一性多糖、不均一性多糖。

多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗溃疡、降血糖、调节身体免疫力等多种作用。

3、银耳多糖简介

银耳多糖( Tremella polysaccharides，TP) 是银耳的重要活性成分( 约占银耳干重的60%-70% ) ，是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖。

大量研究表明，从银耳中提取分离得到的银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变、抗肿瘤等作用，能增强机体耐缺氧能力，清除自由基。

1.1银耳多糖的组成

银耳多糖的主链是由α-(1-3)-糖苷键组成的甘露聚糖，主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是α -(1-3)-甘露聚糖这一共同结构部分。银耳多糖种类包括酸性杂多

糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白

质类物质[3]。

1.1.1酸性杂多糖

约占银耳总多糖的70%~75%，为木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸为主的多聚

体，中有少量岩藻糖。

1.1.2中性杂多糖

约占银耳总多糖的20% 左右，为木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的多聚

体。

1.1.3胞壁多糖

根据文献报道，一种是从胞壁外层产生的酸性多糖，由D-葡萄糖醛酸、

D-甘露糖和D-木糖组成；另一种为碱性多糖，由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、

D-甘露糖和D-木糖组成。

1.1.4胞外多糖

结构以a-(1-3)连接的甘露糖为主链。

1.1.5酸性低聚糖

2、银耳多糖的提取及制备

银耳中含有丰富的银耳多糖，主要采用热水浸提、碱浸提法、酶法提取、辅以超声波或微波处理，对多糖进行提取；然后经Sevage法除蛋白、双氧水或活性炭脱色、乙醇沉析分离，再经透析法、超滤法或层析法纯化，最后经干燥、粉碎，得多糖成品。因含有胞壁多糖，破细胞壁技术就成为提高提取多糖得率的主要因素。

2.1银耳多糖常用的提取方法

2.1.1热水浸提法

最常用的方法，用水来作为溶剂。

优点：简单易操作。

来了很大的困难，提取效率低和费时；水提取的银耳多糖主要是中性多糖和胞外多糖，多糖的得率普遍较低。

2.1.2碱浸提法

银耳中的多糖主要有中性多糖和酸性多糖。银耳中的一部分酸性多糖在中性条件下不能继续溶出，因此在一定碱性条件下提取银耳多糖，会提高提取得率。

虽然碱处理使多糖含量增加，但碱浸提法容易使部分多糖发生水解，破坏多糖的活性结构。

2.1.3酶解提取法

酶提法是通过酶反应将原料组织分解，一出去细胞壁和膜上的果胶，纤维素以及蛋白质从而降低提取难度，有利于细胞壁内多糖的溶出，使多糖的提取率提高。酶提法的一般方法为按照一定料液比加入样品干粉和生物酶，蒸馏水，在合适的温度和pH至下酶解一定时间，然后升温。酶在一定的温度下提取一段时间，离心取上清液即可测定多糖的含量。

优点：由于真菌内壁成分复杂，而单一酶提法不能完全提取出全部的银耳多糖，所以利用多种酶复合产生协同作用，充分破坏菌体细胞结构，最大限度的提高多糖的提取率。

缺点：酶提法使银耳多糖获得率大幅度的增加还具有提取条件温和，提取时间短，对多糖损伤小，杂质易除的优点，但是酶的价格较高，又容易失活，在实验中温度控制要求十分严格（酶对于温度的变化十分敏感），且多糖的高级结构，可能因为酶的作用而改变。

2.1.4超声波辅助提取法

利用超声波激荡空气产生震动的原理，对银耳有极大的压力，造成真菌细胞壁以及整个生物体破裂，同时超声波产生的刺激效应如机械振动，乳化扩散，击碎，化学效应等也能加速真菌细胞内多糖的释放，扩散及溶解，因而能很好的提高多糖的提取率。

优点：具有提取效率高，提取时间短，提取温度低，多糖结构稳定等优点缺点：超声波提取时间不宜过长，否则会造成糖苷键的断裂而导致提取率的降低。

2.1.5微波辅助提取法

微波辐射导致植物细胞内的极性物质尤其是水分子，产生大量热量，使得细胞内的温度迅速上升，液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破，形成微小的孔洞，进一步加热，导致细胞内部和细胞壁水分减小，细胞收缩，表面出现裂纹。由于孔洞和裂纹的存在，胞外溶剂容易进入细胞内，溶解并释放胞内多糖。

优点：微波加热的热效率高，温度升高快速而均匀，因此，应用微波加热提取手段，能够显著缩短萃取时间，较大程度地提高多糖的萃取效率。

缺点：微波的频率很高，能深入渗透物体，对细胞的结构有较大作用。

2.1.6酸、碱提法

酸碱法提取银耳多糖，通过酸碱液的充分作用，使得银耳的细胞，细胞壁充分吸收水分膨胀而破裂从而使银耳多糖充分游离出来，提高多糖的获得率。

优点：能够一定程度提高多糖的产率。

缺点：由于使用酸作为提取的介质，会破坏糖苷键，间接地造成多糖的得率，还可能会对容器造成腐蚀，除弱酸外不宜采用；而使用碱提法生成的溶液浓度过大，会造成过滤的困难，影响产量。

2.2银耳多糖的分离纯化

采取不同工艺方法得到的银耳多糖纯度不同，提取液中含有蛋白质、无机盐以及其他一些小分子物质，需进一步纯化。由于多糖是大分子物质，成分复杂。目前多糖纯化的工艺流程：乙醇等低分子有机溶剂沉淀→脱蛋白→脱色→脱盐→多糖的各组分分离纯化

2.2.1乙醇等低分子有机溶剂沉淀

大部分多糖在高浓度的有机溶剂中是几乎不可溶的，因而可以用有机溶剂对多糖进行沉淀从而去除溶液中的非多糖杂质，甲醇、乙醇和丙酮是最常