兽药残留及其法规

③克伦特罗的确诊分析方法较麻烦，HPLC、GC －MS、LC－MS只能用于研究实验室，不能推广使 用，结果判定主要依据 ELISA 单一方法，出现假 阳性而误判。 ④内源性激素的存在，正常机体内含一定量的 肾上腺素和去甲肾上腺素，干扰 ELISA 法测定外 来的克伦特罗（β －受体兴奋剂）。 ⑤ ELISA 分析试剂盒，测定克伦特罗虽简单方 便，但该法多采用的是多克隆抗体，交叉反应率 高，常用于多残留的检测。不能满足特异性要求 。所用的酶易变性，随环境条件的改变活性有差 异，检测批间变异系数大，检测线性范围窄，重 复性差。
猪的无公害饲料：饲养无公害猪的所有饲料都应当是无毒无 害的，这样从源头上控制对猪肉的污染。我国新发布的《饲 料卫生标准》，具体规定了饲料、饲料添加剂产品中碘、铅、 氟、铬、汞、镉、氰化物、亚硝酸盐、游离棉酚、异硫氰酸 酯、亚唑烷硫酮、六六六、滴滴涕、霉菌、黄曲霉毒素、沙 门氏菌（不得检出）和每g鱼粉中的细菌总数等指标。今后， 在饲料添加剂的使用中，应使用经国家批准的微生物制剂、 酶制剂、酸制剂、中草药制剂和从天然植物中提取得无公害 制剂等。在微量元素中，特别对铜作出了严格的限制，即每 kg 配合饲料中的含铜量 ，按猪体重 30kg 以下的不得高于 250mg ， 30～ 60kg 的不得高于 150mg ， 60 ～ 100kg 的不得高于 25mg。
CAC：FAO/WHO的食品立法委员会（Codex Alimentarius Commission ，CAC）。 HACCP: 即“危害分析与关键控制点”的 简 称 （ Hazard Analysis and Critical Point ），通常是在国际食品贸易中作为 质量保证的标准监测系统的一部分。
母药（原型药）（ Parent drug ）：用药后，在 体内没有发生代谢（生物转化）的药物。每种药物 的原型药通常是组成标志残留物的成分。 标志残留物：表示某种药物残留的物质，有的是 以原型药作为一种药物的标志残留物，有的是以原 型药加其某种代谢物作为一种药物的标志残留物。 如阿莫西林的标志残留物是其母药阿莫西林（ Amoxicillin），而阿苯哒唑的标志残留物为母药阿 苯哒唑（Albendazole）及其代谢物阿苯哒唑砜和阿 苯哒唑亚砜的总和。
HPLC:高效液相色谱（High Pressure Liquid Chromatography ， HPLC ）。是分析药物残留的 常用方法之一，检测限可达到 1ng/ml （ g ）。 最大特点是可通过其色谱分离峰的保留值来对 残留作定性分析。 ELISA: 酶 联 免 疫 吸 附 分 析 法 （ Enzyme － Linked Immunosorbent Assay ）。是分析药物 残留的常用方法之一，检测限可达到 0.1ng/ml （ g ）。灵敏度高是本法的突出特点。其不足 之处是本法稳定性较差，对于类似结构的化合 物存在交叉反应，其理论上的结果是许多不确 定的光密度（吸收值）阳性率。因此，检测结 果会出现假阳性。
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WTO：是英文World Trade Organization的 缩写，“世界贸易组织”的简称。该组织 于1995年1月1日成立，有130多个国家参加 的经贸机构。其前身为关贸总协定 （GATT），成立于1947年。其宗旨是通过 多边贸易谈判促进各成员国之间逐步取消 贸易壁垒，彼此减让关税，取消国际贸易 中的差别待遇，从而促进贸易尽可能地自 由化；以达到充分利用世界资源，扩大商 品和生产交换，提高生产和经济繁荣的目 的。
3 ．影响生猪的肉质，使用本类药物后，由于肌 肉中糖原减少，导致肌肉糖酵解作用下降，引起 pH 下降受阻，结果使肌肉出现色深、坚硬、干燥 现象（即DFD肉）。 4 ．补偿性脂肪沉积：长期添加用药后，因受体 的数量减少，调节作用减弱，结果造成机体脂肪 合成增加，一般在停药1周后即表现脂肪沉积反弹 症状。 5 ．降低动物的抵抗力，由于体脂的厚度下降， 适温带变窄，害怕运动，用药后运动量稍大死亡 率增加，高温季节尤其如此。
· 兽药残留（ Residues of veterinary drugs ）： 是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品（如鸡蛋、 奶品、肉品）中原型药物或其代谢物，包括与兽药 有关的杂质的残留。一般以μ g/ml或μ g/g计量。 残留总量（Total residue）：对食品动物用药后 ，动物产品的任何食用部分中某种药物残留的总和 ，由原型药物或/和其全部代谢产物所组成。 日允许摄入量（ ADI ， Acceptable daily intake ）：人一生中每日从食物或饮水中摄取某种物质而 对健康没有明显危害的量，通常以每kg体重计量。
注：无论是生产饲料还是养殖生猪，如果 确信自己没有使用克伦特罗β －兴奋剂类， 而官方检测结果呈阳性者，可能因此造成 的经济损失较大时，当事人可向检测单位 提出采用确证方法（HPLC 、GC－ MS、LC － MS）进行确证，或向有资格检测的机关进 行重检。保证双方利益的合法性。
关于氯霉素残留检测方法与假阳性问题： · 如果用ELISA 法分析氯霉素，肯定存在交叉免疫反应性， 其特异性会下降，因为本类药物中已出现第二代甲砜霉素和 第三代氟甲砜霉素。它们之间多会出现交叉免疫反应。 · 其他类型的抗生素或抗菌药物，如果经代谢产生具与氯霉 素结构相似的交叉免疫反应物质，则 ELISA 方法检测结果即 可能出现假阳性。虽然目前研究的结果表明与其他抗菌药物 的交叉反应率在0.01%左右。 · 如果怀疑 ELISA 的检测结果可能为假阳性，则可申请用 HPLC法或LC－MS法作确证分析。值得注意的是HPLC有时受检 测限的限制，也可能出现假阴性结果，但对诸如饲料中氯霉 素的检验（由于浓度较高）一般的检测结果是可靠的。
· 2001年4月24日，漳州市首次查获“瘦肉精” 纯品3450g，并发现居民吃了含瘦肉精的猪肺汤 后，心跳加快、头痛头昏、手抖脚沉、整夜难 眠。随后，在杭州、广州、上海等地都先后发 生“瘦肉精”食物中毒事件。 · 2002年4月，荷兰向中国出口的畜禽产品中， 查出有氯霉素残留，被中国拒收。
2、兽药残留相关概念与基本术语 食品动物（Food-producing animal）：各 种人工养殖供人食用的动物。 动物性食品（Animal derived food）：全 部可食用的动物组织以及蛋和奶。 可食组织（ Edible tissues ）：全部可食 用的动物组织，包括肌肉和脏器。
β －受体兴奋剂对动物生长的负效应和对人类健 康的影响 1．动物用药后发生心率增加，血压上升、血糖增 加、支气管平滑肌松弛、瞳孔放大、体温上升、心 肾负荷加重。有人研究表明，绵羊使用（1.5mg/d） 4小时后心跳从150次／分增加到250次／分。 2 ．莱克多巴胺（ Ractopamine ）按 25mg ／ kg 剂量 应用；引起猪染色体畸变增加。
β －兴奋剂：β －受体兴奋剂是一类能作用动物机体内的β －受体引起一系列的生理功能发包括代谢变化的一类苯乙醇胺 类衍生物。它们都是儿茶酚胺的变体，为β －肾上腺素的激动 剂，对代谢主要表现为增加脂肪的降解，增加蛋白质的合成。 使游离脂肪的能量供合成肌蛋白使用，所以又称为营养再分配 剂（Repartition agents），利巴迪绍氏剂，也称为β －受体 激动剂。 β －受体兴奋剂的基本概况：应用于畜牧养殖业的 β －受体 兴奋剂最先研究是在美国，在七十年代以前就开始了药物合成 的研究工作，到80年代末期已有成形的产品出现在市面上，这 类产品竟然成了90年代初美国畜牧养殖用药的热点之一，并且 FDA批准了莱克多巴胺在美国使用，但由于多方面原因，FDA和 欧盟又明文禁止使用此类药物，正在研究的克伦特罗和塞曼特 罗不得不退出注册申请。中华人民共和国1997、1998年已明令 禁止使用此类药物作为饲料添加剂。
关于β －受体兴奋剂与氯霉素组织检测假阳性 问题。 1 ．造成 β －兴奋剂克伦特罗检测出现假阳性 的原因： ①最大残留限量较低，如欧盟官方残留控制计 划中克伦特罗的 MRL 为 1ng/ml 。那么检测的随机 误差，很可能对结果判定造成误判。 ②检测方法的局限性：目前检测克伦特罗常用 的方法是放射免疫分析法和酶免疫分析法，其中 酶联免疫吸附分析法（ ELISA ）最为常用，还有 高效液相色谱分析法（HPLC），气质联合分析法 （GC－MS）、液质联合分析法（LC－MS）。但是 ，确证方法HPLC、GC-MC、LC-MS方法还不能推广 使用。
兽药残留及其法规
华中农业大学动物医学院 操继跃
1、相关问题 · 90 年，德国卫生机构在我国蜂蜜中检出脒残留 超标，拒绝进口。随后，欧共体、美国、日本 也相继拒绝进口我国蜂蜜（中国是世界上主要 蜂蜜出口国之一，年出口量达 5 万吨，其中 3 万 吨销往德国）。
90 年，日本海关检出我国销往日本的 1 万吨肉鸡中 抗球虫药氯羟吡啶和四环素类药物超标，要求就地 销毁该批产品，损失 1.4 亿元。当时，山东省肉鸡 因残留超标而被完全挤出日本市场，其他省份的肉 鸡出口也受到很大影响。
ISO ： 为 国 际 标 准 化 组 织 （ International Organization for Standardization）名称的英文缩写。 是由多国联合组成的非政府性国际标准化机构。 现 有 正 式 成 员 国 120 多 个 ， 中 国 是 其 中 之 一 。 ISO1946 年成立于瑞士日内瓦，负责制定在国际 上通用的非强制性国际标准，以推进国际贸易和 科学技术的发展， ISO 标准具有很强的权威性、 指导性和通用性，对国际标准化进程起着十分重 要的作用。
ELISA分析法中有用单克隆抗体克伦特罗ELISA法 和克伦特罗多克隆抗体 ELISA 分析法，其中单克 隆抗体技术 ELISA 法的特异性高，交叉反应少， 但还多处在试制研究阶段，没有试剂盒大量推广 使用。目前最常用的是克伦特罗多克隆抗体 ELISA 分析法。虽然本法灵敏度较高，但存在交 叉免疫反应，特别是与内源性β －受体激动剂如 肾上腺素和去甲肾上腺素。这样很可能出现假阳 性。
β －受体兴奋剂的品种：目前 β －受体兴奋剂的 品种有十几种，主要品种有克伦特罗 （ Clenbuterol, 克 喘 素 ） 莱 克 多 巴 胺 （Ractopamine）塞曼特罗（Cimaterol,西马醇胺、 息 喘 宁 ） 沙 丁 胺 醇 （ Salbutamol ， 舒 喘 宁 ） 、 RoL16 － 8714 、 L － 644 、 969 、 BRL26830 、异丙肾 上腺素（Isoproteromol）。以上药物多制成其盐 酸盐。其中盐酸克伦特罗（又名瘦肉精）滥用最 广。
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· 20世纪90年代，美国出口到欧洲的牛肉中激 素残留事件（使用己烯雌酚激素埋植剂）； · 20世纪90年代中期，中国内地运输到香港牲 猪中的β -兴奋剂（克伦特罗）事件； · 上世纪90年代末期，韩国与日本外贸出口， 肉鸡中抗球虫药物马杜拉霉素超标事件； · 近些年来小孩早熟现象严重（曾报道，世界 上最年轻的父亲只有5岁，最年轻的母亲只有4 岁）；成年人更年期异常； · 中国医学科学院肿瘤医院罗贤懋教授发表了 一项重要调查——“我国50%肿瘤与“吃”有关 ”；
注：北京市技术监督局颁布的《猪肉安全 卫生标准》对猪肉的理化指标作了详细规 定，每kg 猪肉中汞含量应低于 0.05mg ，砷 低于 0.5mg ，铅低于0.1mg （脏器中铅低于 0.5mg ），沙门氏菌、致病性大肠杆菌在 猪肉中不得检出。
绿色贸易壁垒：也称绿色壁垒，是指在国际贸 易活动中，一个国家以保护环境为理由而制定 的一系列贸易政策和措施，使得外国产品无法 进口或进口时受到一定的限制，从而达到保护 本国产品和市场经济的目的。由于西方发达国 家的产品科技含量和公众的环境与卫生意识普 遍提高，对环境标准的要求非常严格，不仅要 求末端产品符合环保要求，而且规定从产品的 研制、开发、生产、包装、运输、使用和循环 再使用等一系列过程中均需符合环保要求。