改进茶叶中游离氨基酸总量测定方法
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ｍ ｅｎｔ
ｄ ｉ１．９ ９ ．ｓ． ７ － ０ Ｘ２ １．２ ０ ２ ｏ：０３ ６ ￣ｉ ｎ１ ４ ５ ６ ． ２０ — ２ ｓ ６ ０
茶 叶中 的游离 氨基 酸是构 成茶 叶鲜 爽香 味的重
０２ ｍｇｍ ，．０ ／ ． ５ ／ Ｌ ０３ ｍｇ ｍＬ有 时 吸 光 值 变 化 无 梯 度 ． 线 性 相关 性也 不好 。导 致茶 叶样 品检测 数据 重复 性 不 高 ． 以得 到准 确 的结 果 。 难
ｗｈ ｃ ａ ｓ ｄ ｈ ｔａ ｓ ｍｐ ｅ ｘ ｍｉ ａｉ ｎ ａ ａ ｅ ｅ ｔｂ ｌ ｙ ｏ ｏ ｅ ｈ ｇ ｉｈ ｃ ｕ ｅ ｔ ｅ ｅ ａ ｌ ｅ ａ ｎ ｔ ｄ ｔ ｒ ｐ ａａ ｉ ｔ ｎ ｔ ｔ ｂ ｉｈ． ａ ｄ ｂ ａｎ ｄ ｃ ｕ ａ ｅ ｅ ｕ ｔ ｗｉ ｄｍ — ｏ ｉ ｎ ｏ ｔ ｉｅ ａ ｃ ｒ ｔ ｒ ｓ ｌ ｔ ｈ ｉ
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Ｔｏａ ａ ｔ ｙ ｉ ａ ｔｌＱｕ ｎｉ ｎ Ｔｅ ｔ
ＨＵＡＮＧ Ｂｅ － ｅ ｎ ｆ ｎ， Ｌｖ Ｘｉｏ ｔｎｇ， ＨＥ ａ －ｉ Ｚｈｅ ｇ ｉ ｎ －ｘｕ
茚 三 酮 与 氨 基 酸 的显 色反 应 原 理 ［。 反 应 分 ３该 ］ 两步进行 ． 先是 氨基酸被 氧化 ， 生二 氧化碳 、 首 产 氨和醛 ， 水合茚三酮被还原成还原性茚三酮 ； 而 第
分 别 吸 取 ００ ｍＬ ０５ ｍＬ １ ０ ，．０ ， ． ０ ，． ０ ，． ｍＬ １ ｍＬ ０ ５ ２ ０ Ｌ．． ｍ ３ ０ Ｌ，． ｍ ． ｍ ２ ０ Ｌ，． ｍ ４Ｏ Ｌ氨 基 酸 工作 液 于一 ０ ５ ０ Ｏ 组 ２ｍ ５ Ｌ比 色管 中 。先 加 入 ｐ ． 酸 盐 缓 冲液 Ｈ ８ ０磷 ０５ ｍ ． Ｌ摇 匀 ． 加 入 显 色 液 １ ０ ， 匀 后 放 在 沸 ０ 再 ． ｍＬ 摇 ０
ｗａ ９ ０ ０４．％ ． ｓ ８．－１ ９
ａ ｄ ｈ ｒ ｔ ｒ ｓ ｒ ｔ ｎ ｔ ｅ ｅｕ ｎ — ａｉ ｏ
Ｋｅ ｗｏ ｄ ： ｔａ； ｄ ｓ ｏ ｉｔ ｎ ｍｉ ｏ ａ ｉ ｔｔｌ ｕ ｎ ｉ ； ｙｎ ｒｋ ｔｎ ； ｄ ｕ ｔ ｌ ｏ ｎ ｓ ｎ ｌｓｓ ｍｅｈ ｄ ｉ ｒ ｖ — ｙ ｒｓ ｅ ｉｓ ｃａ ｉ ａ ｎ ｃ ｄ ｏａ ｑ ａ ｔ ｙ ｏ ｔ ｉ ｔ ｅｏ ｅ ｉ ｏ ｂ ｕ ｐ ｉ ｔ ａ ａｙ ｉ ； ｆ ｔ ｏ ｓ ｍｐ ｏ ｅ
第二是 采 用 国家 标准 制作 标准 曲线 时要 求各 管
要 物 质之 一 ， 提高 茶 叶鲜爽度 的重要物 质 ， 茶 叶 是 对
品质 影 响较大 …・ 因此其 检测 的结果 准确 与否 显得 尤 为重 要 。 目前 茶 叶 中游 离氨基 酸 总量测 定方 法采 用 国家 标准 Ｇ ／ ３ ４ ２ ０ 《 游离 氨基 酸 总量测 ＢＴ ８ １ — ０ ２ 茶 定 》 ］ 在实 际 的检测 工作 中发现 该方 法 存在 一 些 ， 但
疑问：
“ 加 水 ４０ ｍ ” 样 液 的分 析 中不 加 水 测 定 条 件 各 ． Ｌ与 ０ 不一致 。 验证 明 ： 其他试验 条件都相 同 的情 况下 ， 试 在 标 准 曲线 中各 浓度点 及样 液在 加水 和不 加水 时所 得
第 一是在 采用 国家 标准 做标 准 曲线 时 ，在低 浓
二 步 是 所 生 成 的 还 原 性 茚 三 酮 与 另 一 个 水 合 茚 三
酮 分 子 和 氨 缩 合 生 成 成 为 蓝 紫 色 化 合 物 ，该 化 合
物 颜 色 的 深 浅 与 氨基 酸 的 含 量 成 正 比 。可 用 ５ ｍ ｍ
水浴 中加 热 １ ｍ ｎ ５ ｉ ；取 出快 速冷 却 后 ，加 水 定 容至
黄本 芬 等 ： 进 茶 叶 中 游 离 氨 基 酸 总 量 测 定 方 法 改
的用量 不够 有关 。 虑到抗 坏 血酸 的还 原效 果 较好 ， 考
氢 二 钠 溶 液 ９ ｍＬ和 １１ Ｍ 磷 酸二 氢钾 溶 液 ５ ， ５ ／５ ｍＬ
也较 氯 化亚 锡稳 定 ， 不会 与 茚三 酮生 成沉 淀 ， 且 因此
摘 要 ： 目前 茶 叶 中游 离氨 基 酸 总量 测 定 方 法 采 用 国 家标 准 Ｇ ／ ３ ４ ２ ０ ， Ｂ Ｔ ８ １ — ０ ２ 实验 中发 现 ， 此 方 法 制 作 的标 准 曲线 按 始 终 线 性 关 系较 差 ， 导致 茶 叶样 品 检 测 数据 重 复性 不 高 ， 以得 到 准 确 的 结 果 。 文 就 该 方 法 中的疑 点 进行 了分 析 、 难 本 试
将 茚三 酮 显 色剂 中加入 的“ 化 亚 锡 ” 为 “ 氯 改 抗坏 血
混匀 。 １ ． 显 色 液 的配制 ．４ ３
酸” 。并 对配 制 方法 进 行 了调 整 ，显 色 剂 的 用 量 由
０５ ｍＬ增 加 到 了 １ ０ 。 ．０ ． ｍＬ 在标 准 曲线 制 作 过 程 中 ， ０ 去 掉 各 管 “ 加 水 ４Ｏ Ｌ 。 验 证 明调 整 后 显 色反 各 ．ｍ ” 试 应灵 敏 度提 高 ， 性相 关性 也 较好 。 线 本 文针 对 国标法 存在 的这几 点疑 点作 了初 浅 的 分 析与 探讨 。 研究 了改进 方法 。 改进 后 的方 法提 高 了 结 果 的稳 定 性 ， 复性 。 实 验 结 果 可看 到 ： 方法 重 从 本
食
品 与 发 酵 科 技
Ｆ ｏ ｎ ｅ ｍｅ ｔｔ ｎ Ｔ ｃ ｎ ｌｇ ｏ ｄ ａ ｄ Ｆ ｒ ｎ ａｉ ｅ ｈ ｏ ｏ ｙ ｏ
第 ４ ８卷 （ ２期 ） Ｖ １ ８ Ｎ ． 第 ｏ． ， ｏ２ ４
改进茶叶 中游 离氨基酸 总量测定 方法
黄本芬 ， 吕小艇 ， 正秀 何
（ 山市 产 品质 量 监 督 所 ， 乐 四川 乐 山 ６ ４ ０ ） １０ ０
（ｅｈ ｎ Ｉｓｔｔ ｏ ｒ ｕｔＱ ａｉ ｕ ｅ ｉｏ ｎ ｅｔ ｇ Ｌ ｓａ １ ０ ０ Ｃ ｉ ） Ｌ ｓａ ｎｔｕｅ ｆ Ｐｉ ｃ ｕｌｙ Ｓｐ ｒ ｓ ｎ ａｄ Ｔｓｎ ，ｅｈ ６４ ０ ，ｈｎ ｉ ｄ ｔ ｖｉ ｉ ｎ ａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａ ｒ ｓ ｎ ａ ｉｎ ｌ ｓａ ｄ ｒ ｓ ＧＢ Ｔ ８ — ０ ２ ｗ ｓ ｕ ｅ ｏ ｄ ｔｃ ｈ ｍｉ ｏ ｃｄ ｔｔ ｌ ｑ ａ ｔ ｙ ｎ ｔ ａＩ ｓｒ ｃ ： ｔ ｐ ｅ ｅ ｔ ｎ ｔ ａ ｔ ｎ ａｄ ／ ３ ４ ２ ０ ａ ｓ ｄ ｔ ｅｅ ｔ ｔ ｅ ａ ｎ ａ ｉ ｏａ ｕ ｎ ｉ ｉ ｅ ． ｏ １ ｔ ｎ
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１ ．． ２ ． ４１ ％茚 三 酮 溶 液 ：称 取 水 合 茚 三 酮 ２ ， ３ ｇ 加
水 溶 解 后 定 容 至 １０ Ｌ 储 成 于 棕 色 瓶 中 ， 光 保 ０ｍ 。 避
存。
１ ．． ０１ ． ４２ ．％抗 坏 血 酸溶 液 ： 取抗 坏 血 酸 ０１ ， ３ 称 ． 加 ｇ 水 溶解 后定 容 至 １ ０ 。 ０ ｍＬ 现配 现用 。 ｌ ．． 取 １ ０１ －４３ ３ 份 ．％抗坏 血 酸 溶 液溶 解 于 ５份 ２ ％ 茚 三酮溶 液 中 ， 匀 备用 。 混
较 差 ， 时甚 至不 成 线 性 ； 高 浓 度 点 ０２ ｍｇ ， 有 在 ． ０ ／ ｍＬ
收 稿 日期 ：０ ２ ０ — １ ２ １— ２ ０ 作 者 简 介 ： 本 芬 （９ ６ ）女 ， 黄 １６ 一 ， 工程 师 ， 研究 领 域 ： 品 与化 工 分 析 。 食
第４ ８卷 （ 第 １ ８期 ） 总 ６
于 ９ ％） 于 １ ０ ９ 溶 ０ ｍＬ水 中， 为母 液 。 作 １ ． 谷 氨 酸 工 作 液 ： 确 吸取 ５ ．６ ３ 准 ｍＬ母 液 ， 水 定 加
容至 ５ｍ ０ Ｌ作 为工作 液 （ｍＬ含谷 氨 标 准 曲 线 的 制 作 ４
验研究 ， 并针 对 国标 法存 在 的 缺 点进 行 了 改进 。 进 后 的 方 法提 高 了结 果 的 稳 定 性 、 复性 。 实验 结 果 可 看 到 ： 方 改 重 从 本
法 相 对 标 准偏 差 （ Ｓ 小 于 ０６ ％， 收 率 为 ９ ．～ ０ ． 。 Ｒ Ｄ） ． ３ 回 ８ １ ４９ ０ ％
度点 ０Ｏ ｍ ／ Ｌ，． ｍ ／ Ｌ，． ｍｇ ． ｇｍ ０１ ｇｍ ０１ ／ Ｏ Ｏ ５ ｍＬ线性 相关 性
的吸光值 是不一致 的 ， 点的数据相差 还较大 。 有些
为此我 们分 析 ，出现上 述 现象 可能 与茚 三酮 配 制 时加入 的还原 剂氯 化亚锡 有关 以及 茚 三酮 显色 剂
相 对 标 准 偏 差 （ Ｓ 小 于 ０６ ％ ， 标 回收 率 范 围 Ｒ Ｄ） ．３ 加 为 ９ ．— ０ ． 说 明该 改 进 方法 满 足检 测 要 求 。 ８ １ ４９ ０ ％。 现
将试 验 的结果 报 告如 下 。 １ 试验 部分
１１ 测 试 原 理 ．
１ ． 谷 氨 酸标 准 液： ．５ ３ 称取 ｌ Ｏ 谷 氨 酸 （ Ｏ ｍｇ 纯度 不低
关 键 词 ： 叶 ； 离氨 基 酸 总量 ； 茶 游 茚三 酮 ； 点分 析 ； 法改 进 疑 方
中图 分 类 号 ：Ｓ ７ ． Ｔ ２２ ７ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ４ ５ ６ ２ １ ） ２ Ｏ ９ — ０ ３ １ ７ — ０ Ｘ（０ ２ ０ 一 ０ ４ ０ ０
ｓ ｎ ａ ｄ ｍｅｈ ｄ ｗａ ｍｐ ｏ ｅ ．Ｔ ｅ ｉ ｒ ｖ ｄ ｍｅ ｈ ｄ ｅ ｈ ｎ ｅ ｈ ｔ ｂ ｌ ｙ ａ ｄ ｒ ｐ ｔ ｉｅ ｏ ｈ ｅ ｕ ｔ ．Ｔ ｅ ｅ ｐ ｒ— ｔ ｄ ｒ ｔ ｏ ｓ ｉ ｒ ｖ ｄ ｈ ｍｐ ｏ ｅ ｔ ｏ ｎ ａ ｃ ｄ ｔｅ ｓａ ｉ ｔ ｎ ｅ ｅ ｉ ｖ ｆ ｔｅ ｒ ｓ ｌ ａ ｉ ｔ ｓ ｈ ｘｅ ｉ ｍｅ ｔ ｌ ｅ ｕ ｔ ｗｅ ｅ ｈ ｗｅ ｔ ａ ｔ ｅ ｎ ａ ｒｓ ｌ ｒ ｓ ｏ ｄ ｈ ｔ ｈ ＲＳ ｗａ ｍａｌ ｒ ｔ ａ ｏ ｈ ｓａ ｄ ｒ ｅ ｉｔ ｎ ０ ６ ％ ｓ Ｄ ｓ ｓ ｌ ｈ ｎ ｔ ｔ ｅ ｔ ｎ ａ ｄ ｄ ｖａ ｉ ． ３ ｅ ｏ
２ ｍＬ 放 置 １ ｍ ｎ 用 ５ ｍ 比色 杯 ， ５ ０ ｍ 处 ５ ， ０ ｉ。 ｍ 在 ７ｎ ， 测
比色 杯 ， ５ ０ ｍ 处 ， 定 吸 光 度 ， 算 出 氨 基 酸 在 ７ｎ 测 计
ｄ ｉ１．９ ９ ．ｓ． ７ － ０ Ｘ２ １．２ ０ ２ ｏ：０３ ６ ￣ｉ ｎ１ ４ ５ ６ ． ２０ — ２ ｓ ６ ０
茶 叶中 的游离 氨基 酸是构 成茶 叶鲜 爽香 味的重
０２ ｍｇｍ ，．０ ／ ． ５ ／ Ｌ ０３ ｍｇ ｍＬ有 时 吸 光 值 变 化 无 梯 度 ． 线 性 相关 性也 不好 。导 致茶 叶样 品检测 数据 重复 性 不 高 ． 以得 到准 确 的结 果 。 难
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茚 三 酮 与 氨 基 酸 的显 色反 应 原 理 ［。 反 应 分 ３该 ］ 两步进行 ． 先是 氨基酸被 氧化 ， 生二 氧化碳 、 首 产 氨和醛 ， 水合茚三酮被还原成还原性茚三酮 ； 而 第
分 别 吸 取 ００ ｍＬ ０５ ｍＬ １ ０ ，．０ ， ． ０ ，． ０ ，． ｍＬ １ ｍＬ ０ ５ ２ ０ Ｌ．． ｍ ３ ０ Ｌ，． ｍ ． ｍ ２ ０ Ｌ，． ｍ ４Ｏ Ｌ氨 基 酸 工作 液 于一 ０ ５ ０ Ｏ 组 ２ｍ ５ Ｌ比 色管 中 。先 加 入 ｐ ． 酸 盐 缓 冲液 Ｈ ８ ０磷 ０５ ｍ ． Ｌ摇 匀 ． 加 入 显 色 液 １ ０ ， 匀 后 放 在 沸 ０ 再 ． ｍＬ 摇 ０
ｗａ ９ ０ ０４．％ ． ｓ ８．－１ ９
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要 物 质之 一 ， 提高 茶 叶鲜爽度 的重要物 质 ， 茶 叶 是 对
品质 影 响较大 …・ 因此其 检测 的结果 准确 与否 显得 尤 为重 要 。 目前 茶 叶 中游 离氨基 酸 总量测 定方 法采 用 国家 标准 Ｇ ／ ３ ４ ２ ０ 《 游离 氨基 酸 总量测 ＢＴ ８ １ — ０ ２ 茶 定 》 ］ 在实 际 的检测 工作 中发现 该方 法 存在 一 些 ， 但
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第 一是在 采用 国家 标准 做标 准 曲线 时 ，在低 浓
二 步 是 所 生 成 的 还 原 性 茚 三 酮 与 另 一 个 水 合 茚 三
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黄本 芬 等 ： 进 茶 叶 中 游 离 氨 基 酸 总 量 测 定 方 法 改
的用量 不够 有关 。 虑到抗 坏 血酸 的还 原效 果 较好 ， 考
氢 二 钠 溶 液 ９ ｍＬ和 １１ Ｍ 磷 酸二 氢钾 溶 液 ５ ， ５ ／５ ｍＬ
也较 氯 化亚 锡稳 定 ， 不会 与 茚三 酮生 成沉 淀 ， 且 因此
摘 要 ： 目前 茶 叶 中游 离氨 基 酸 总量 测 定 方 法 采 用 国 家标 准 Ｇ ／ ３ ４ ２ ０ ， Ｂ Ｔ ８ １ — ０ ２ 实验 中发 现 ， 此 方 法 制 作 的标 准 曲线 按 始 终 线 性 关 系较 差 ， 导致 茶 叶样 品 检 测 数据 重 复性 不 高 ， 以得 到 准 确 的 结 果 。 文 就 该 方 法 中的疑 点 进行 了分 析 、 难 本 试
将 茚三 酮 显 色剂 中加入 的“ 化 亚 锡 ” 为 “ 氯 改 抗坏 血
混匀 。 １ ． 显 色 液 的配制 ．４ ３
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０５ ｍＬ增 加 到 了 １ ０ 。 ．０ ． ｍＬ 在标 准 曲线 制 作 过 程 中 ， ０ 去 掉 各 管 “ 加 水 ４Ｏ Ｌ 。 验 证 明调 整 后 显 色反 各 ．ｍ ” 试 应灵 敏 度提 高 ， 性相 关性 也 较好 。 线 本 文针 对 国标法 存在 的这几 点疑 点作 了初 浅 的 分 析与 探讨 。 研究 了改进 方法 。 改进 后 的方 法提 高 了 结 果 的稳 定 性 ， 复性 。 实 验 结 果 可看 到 ： 方法 重 从 本
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第 ４ ８卷 （ ２期 ） Ｖ １ ８ Ｎ ． 第 ｏ． ， ｏ２ ４
改进茶叶 中游 离氨基酸 总量测定 方法
黄本芬 ， 吕小艇 ， 正秀 何
（ 山市 产 品质 量 监 督 所 ， 乐 四川 乐 山 ６ ４ ０ ） １０ ０
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存。
１ ．． ０１ ． ４２ ．％抗 坏 血 酸溶 液 ： 取抗 坏 血 酸 ０１ ， ３ 称 ． 加 ｇ 水 溶解 后定 容 至 １ ０ 。 ０ ｍＬ 现配 现用 。 ｌ ．． 取 １ ０１ －４３ ３ 份 ．％抗坏 血 酸 溶 液溶 解 于 ５份 ２ ％ 茚 三酮溶 液 中 ， 匀 备用 。 混
较 差 ， 时甚 至不 成 线 性 ； 高 浓 度 点 ０２ ｍｇ ， 有 在 ． ０ ／ ｍＬ
收 稿 日期 ：０ ２ ０ — １ ２ １— ２ ０ 作 者 简 介 ： 本 芬 （９ ６ ）女 ， 黄 １６ 一 ， 工程 师 ， 研究 领 域 ： 品 与化 工 分 析 。 食
第４ ８卷 （ 第 １ ８期 ） 总 ６
于 ９ ％） 于 １ ０ ９ 溶 ０ ｍＬ水 中， 为母 液 。 作 １ ． 谷 氨 酸 工 作 液 ： 确 吸取 ５ ．６ ３ 准 ｍＬ母 液 ， 水 定 加
容至 ５ｍ ０ Ｌ作 为工作 液 （ｍＬ含谷 氨 标 准 曲 线 的 制 作 ４
验研究 ， 并针 对 国标 法存 在 的 缺 点进 行 了 改进 。 进 后 的 方 法提 高 了结 果 的 稳 定 性 、 复性 。 实验 结 果 可 看 到 ： 方 改 重 从 本
法 相 对 标 准偏 差 （ Ｓ 小 于 ０６ ％， 收 率 为 ９ ．～ ０ ． 。 Ｒ Ｄ） ． ３ 回 ８ １ ４９ ０ ％
度点 ０Ｏ ｍ ／ Ｌ，． ｍ ／ Ｌ，． ｍｇ ． ｇｍ ０１ ｇｍ ０１ ／ Ｏ Ｏ ５ ｍＬ线性 相关 性
的吸光值 是不一致 的 ， 点的数据相差 还较大 。 有些
为此我 们分 析 ，出现上 述 现象 可能 与茚 三酮 配 制 时加入 的还原 剂氯 化亚锡 有关 以及 茚 三酮 显色 剂
相 对 标 准 偏 差 （ Ｓ 小 于 ０６ ％ ， 标 回收 率 范 围 Ｒ Ｄ） ．３ 加 为 ９ ．— ０ ． 说 明该 改 进 方法 满 足检 测 要 求 。 ８ １ ４９ ０ ％。 现
将试 验 的结果 报 告如 下 。 １ 试验 部分
１１ 测 试 原 理 ．
１ ． 谷 氨 酸标 准 液： ．５ ３ 称取 ｌ Ｏ 谷 氨 酸 （ Ｏ ｍｇ 纯度 不低
关 键 词 ： 叶 ； 离氨 基 酸 总量 ； 茶 游 茚三 酮 ； 点分 析 ； 法改 进 疑 方
中图 分 类 号 ：Ｓ ７ ． Ｔ ２２ ７ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ４ ５ ６ ２ １ ） ２ Ｏ ９ — ０ ３ １ ７ — ０ Ｘ（０ ２ ０ 一 ０ ４ ０ ０
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２ ｍＬ 放 置 １ ｍ ｎ 用 ５ ｍ 比色 杯 ， ５ ０ ｍ 处 ５ ， ０ ｉ。 ｍ 在 ７ｎ ， 测
比色 杯 ， ５ ０ ｍ 处 ， 定 吸 光 度 ， 算 出 氨 基 酸 在 ７ｎ 测 计