清洁验证标准详解

防止容器底部积水：
底部出口大小（英寸） 0.5 1.0 1.5 2.0 容器排水速率估算 （L/M） 5.0 45.5 140.9 268.2
2.5
454.6
管道盲管
为了有效和可重复的清洗通常要求管路系 统中的分叉口或交接口的L/D<2.0
仪器形分叉口
阀门形分叉口
管道盲管（续）
清洁剂的选择
选择标准：
第九章 生产管理 第二节 防止生产过程中的污染和交叉污染 第一百九十七条 生产过程中应当尽可 能采取措施，防止污染和交叉污染，如： （六）采用经过验证或已知有效的清洁和 去污染操作规程进行设备清洁；必要时， 应当对与物料直接接触的设备表面的残留 物进行检测；
欧盟GMP的要求：
36. 为确认清洁规程的效力，应进行清洁验证。应根据 所涉及的物料，合理的确认产品残留、清洁剂和微生 物污染的限度标准。这个限度标准应该是可以达到的， 能够证实的。 37. 应使用经验证、检出灵敏度高的检验方法来检测残 留或污染物。每种分析方法或仪器的检测灵敏度应足 以检测出设定合格限度水平的残留或污染物。 38. 通常只有接触产品设备表面的清洁规程需要验证。 某些场合下，还应考虑不直接接触产品的部分。应验 证设备使用与清洁的间隔时间，以及已清洁设备可保 留的时间，并通过验证确定清洁的间隔时间和清洁方 法。
FDA的要求：
在FDA的cGMP 211.67章节 中规定了设备清洗验证的要 求。 建立书面标准操作程序（SOP），其中必须详细规 定设备各部件的清洗过程。 必须建立书面的清洗方法验证通则。 清洗方法验证通则应规定执行验证的负责人、批准 验证工作的负责人、验证标准（合格标准）、再验 证的时间。 对各生产系统或各设备部件进行清洗验证之前，应 制定专一特定的书面验证计划，其中应规定取样规 程、分析方法（包括分析方法的灵敏度）。
0.1615米/秒
1.52米/秒
容器降落膜的雷诺系数：
通常要求在容器内壁达到湍流的雷诺系数为大 于2,000.
喷林球：
溶液分布在容器上部的25％-30％区 域
喷林球的覆盖率检查：
喷林球的覆盖率检查 （续）：
核黄素（维生素B2）覆盖测试检查法： 把核黄素均匀涂布在设备内表面； 干燥； 按照预定的SOP启动CIP进行清洗； 干燥； 采用黑光灯检查； 合格标准：无核黄素残留，在黑光灯检查 下无荧光。
清洁验证 Cleaning Validation
XX公司
内容介绍：
1. 法规对清洁验证的要求及其背景； 2. 清洁方法的开发和设计； 3. 清洁分析方法的验证； 4. 清洁验证； 5. 清洁验证审计中经常发现的问题。
一、法规对清洁验证的要求
10版GMP的要求（WHO GMP）：
第七章 确认与验证
欧盟GMP的要求（续）：
39. 对于相似产品和相似工艺而言，可从相似产品 及工艺中，选择一个具有代表性产品和工艺进行清 洁验证。可采用“最差条件”的方法进行单独的验 证试验，在验证中应考虑关键因素。 40. 为证明方法是经过验证的，通常应在3个连续批 上使用该清洁规程，并检验合格。 41. 清洁验证不应采用“不断测试，直至清洁”的 方式。 42. 如果实际产品是有毒物质或有害物质，在清洁 验证中，可以例外地采用物化特性相似的无毒无害 物质来模拟。
清洁剂的选择（续）
根据这些标准，对于水溶性残留物，水是首选的清 洁剂。不同批号的清洁剂应当有足够的质量稳定性。 因此不宜采用一般家用清洁剂，因其成分复杂、质 量波动较大且供应商不公布详细组份。使用这类清 洁剂后，还会引起新的问题，即如何证明清洁剂的 残留达到了标准? 因此，应尽量选择组份简单、成分确切的清洁剂。 根据残留物和设备的性质，企业还可自行配制成分 简单效果确切的清洁剂，如一定浓度的酸、碱溶液 等。企业应有足够灵敏的方法检测清洁剂的残留情 况，并有能力回收或对废液进行无害化处理。
10版GMP的要求（WHO GMP）：
第四节 使用和清洁 第八十四条 应当按照详细规定的操作 规程清洁生产设备。 生产设备清洁的操作规程应当规定具体 而完整的清洁方法、清洁用设备或工具、清 洁剂的名称和配制方法、去除前一批次标识 的方法、保护已清洁设备在使用前免受污染 的方法、已清洁设备最长的保存时限、使用 前检查设备清洁状况的方法，使操作者能以 可重现的、有效的方式对各类设备进行清洁。
二、清洁方法的开发和设计
清洁方法的分类和特点：
通常清洁方法分为: 手工清洁（Manual Cleaning） 在线清洁（Cleaning In Place）
在线清洁的特点： 1. 设备、容器、管道能够自动进行清洗； 2. 对容器采用喷林法清洁，对管道采用压力法 清洁； 3. 极少的手工操作，重复性高。
清洁验证的背景（续）：
FDA历来的检查重点： 要求清洗设备的主要目的还是防止污染或混料。由于设
备清洗维护不当或防尘管理不当，FDA 检查官曾十分注意 检查卫生状况。过去FDA 总是更注意检查青霉素类与非青 霉素类药物之间的交叉污染、药品与甾类物质或激素之间 的交叉污染问题。在过去二十年间，因实际或潜在的青霉 素交叉污染问题已从市场上撤回了大量的药品。 有一位幼儿教师，怀抱着一名2小时前注射过青霉素钠 的婴儿，孩子的一泡尿撒在了幼儿教师的手臂上，1分钟 后该名幼儿教师呼吸困难、面色苍白、心慌气短，不一会 就呈现昏迷状态，经医生诊断为青霉素过敏。
1. 清洁剂应能有效溶解残留物，不腐蚀设备， 且本身易被清除。 2. 人用药品注册技术要求国际标准协调会(ICH) 在“残留溶剂指南”中将溶剂分为3个级别， 对其使用和残留限度有明确的要求。 3. 随着环境保护标准的提高，还应要求清洁剂 对环境尽量无害或可被无害化处理。 4. 满足以上要求的前提下应尽量廉价。
清洁方法的开发和设计的要点
1. 湍流的清洁速率大大大于层流的清洁速率； 2. 盲管和垂直管道中的清洁液的速率要大于湍 流所需的速率，通常要求大于1.52米/秒 (5英 尺/秒)； 3. 在设备设计时需要考虑盲管的清洁问题，通 常要求L/D<2.0； 4. 喷林球的覆盖率检查； 5. CIP清洗中避免设备底部的积水； 6. 有效、可靠和反复的清洁要求湍流。
清洁验证的背景（续）：
FDA加强对进口原料供应商的检查：

1992年，FDA 对一家海外原料药生产厂发出了 进口警告，该工厂使用同一设备生产强力甾体类 物质和非甾体类物质。该工厂是多品种原料药生 产厂。FDA 认为交叉污染的可能性很大，对公众 的健康造成了严重威胁。该工厂仅在FDA 检查时 开始清洗验证工作，FDA 在检查时认为该清洗验 证不当。理由之一是：工厂仅寻找没有前一种物 质存在的证据。但是用TLC 法检验洗涤水之后，找 到了设备中还残留了前一产品生产过程中的副反 应物质和降解物质的证据。
制定清ห้องสมุดไป่ตู้规程：
制定SOP是清洁验证的先决条件； 通常参照设备的说明书制定详细的规程，规 定每一台设备的清洁程序，保证每个操作人 员都能以可重复的方式对其清洗，并获得相 同的清洁效果。 清洁规程的要点： 系统的拆卸； 预清洁； 清洁剂、浓度、溶液量，水质量；
清洁规程的要点（续）：
时间、温度和频次、流速、压力； 消毒（消毒剂浓度、消毒方法、消毒剂用量）； 装配：按说明书、示意图要求装配； 干燥：明确干燥的方式和参速； 检查：符合预定的标准。
棉签取样方法的验证 （续）： ⑧将擦拭棉签分别放入棉签管中，加入预定溶剂 5ml，
超声； ⑨ 用经验证的检验方法检验，计算回收率和回收率的 RSD。
下图为棉签插试取样方法：
第一步
第二步
淋洗液取样方法的验证：
通常淋洗法限度检查不需做回收率验证；定量检查应做 回收率验证，可以利用淋洗溶剂冲洗已知量（在限度附 近）的分析物确定回收率，回收率通常应不低于95%。 淋洗的取样方法为根据淋洗水流经设备的线路，选择淋 洗线路相对最下游的一个或几个排水口为取样口。分别 按照微生物检验样品和化学检验样品的取样规程收集清 洁程序最后一步淋洗即将结束时的水样。 淋洗法样品可对冲洗液直接检测也可对冲洗液做稀释后 检测；无论直接检测还是稀释检测都应在接到样品后首 先将样品同空白溶剂做视觉检查，确定是否有颜色差异 和异物存在；如果有上述现象发生，可直接判定样品不 合格。
三、 清洁分析方法的验证
棉签取样方法的验证：
通常清洁分析方法验证包括取样方法验证和检 验方法验证。 棉签取样方法的验证： 取样过程需经过验证，通过回收率试验验证取 样过程的回收率和重现性。通常取样回收率和 检验方法回收率结合进行，总回收率一般（企 业可以根据实际情况确定）不低于70％，多次 取样回收率的相对标准偏差应不大于20％。 棉签取样过程的验证实际上是对取样棉签、溶 剂的选择、取样人员操作、残留物转移到取样 棉签、样品溶出(萃取)过程的全面考察。
0.5
1.0 1.5 2.0
0.3048
0.1615 0.1067 0.08230
2.728
5.910 8.637 11.820
通常，对于盲管和垂直管路为了清洁干净要求管道 中水的流速要大于湍流所需要的流速1.52米/秒 (5英 尺 /秒 ) 。
20℃水中圆形管道湍流所要求 的流速和速度
因为： 1.有效的冲洗垂直管道； 2.排出垂直管道中的空气； 3.完全润湿管路
验证方法如下：
棉签取样方法的验证 （续）：
① 准备一块与设备表面材质相同的板材，如平 整光洁的316L不锈钢板； ② 在钢板上划出100mm×100mm 的区域； ③ 将5倍限度量的待检测物溶液，定量装入校验 的微量注射器； ④ 将其溶液尽量均匀地涂布在100mm×100mm 的区域内； ⑤ 自然干燥或用电吹风温和地吹干不锈钢板； ⑥ 用选定的擦拭溶剂润湿擦拭棉签，按下图所 示进行擦拭取样； ⑦ 重复以上规程3次；
10版GMP的要求（WHO GMP）：
如需拆装设备，还应当规定设备拆装的顺序 和方法；如需对设备消毒或灭菌，还应当规 定消毒或灭菌的具体方法、消毒剂的名称和 配制方法。必要时，还应当规定设备生产结 束至清洁前所允许的最长间隔时限。 第八十五条 已清洁的生产设备应当在清洁、 干燥的条件下存放。
10版GMP的要求（WHO GMP）：
第一百四十三条 清洁方法应经过验证， 证实其清洁的效果，以有效防止污染和交 叉污染。清洁验证应综合考虑设备使用情 况、所使用的清洁剂和消毒剂、取样方法 和位置以及相应的取样回收率、残留物的 性质和限度、残留物检验方法的灵敏度等 因素。
10版GMP的要求（WHO GMP）：
第五章 设 备 第二节 设计和安装 第七十四条 生产设备不得对药品质 量产生任何不利影响。与药品直接接触的 生产设备表面应当平整、光洁、易清洗或 消毒、耐腐蚀，不得与药品发生化学反应、 吸附药品或向药品中释放物质。
在线清洁举例：
清洁的原理
1. 清洗剂（水、有机溶剂或表面活性剂）采用 扩散或对流的方法到达“脏物”表面； 2. 清洗剂通“脏物”反应； 3. 反应产物采用扩散或对流的方法离开设备。
清洁速率同流速的关系
层流
湍流
20℃水中圆形管道湍流所要求的流速 和速度
管子直径（英寸） 速度（米/秒） 流速（升/分）
FDA的要求（续）：
5. 按上述验证计划进行验证工作，记录验证结 果。 6. 做出最终的验证报告，报告应由有关管理人 员批准，并说明该清洗方法是否有效。
清洁验证的背景：
消胆胺召回事件：
即1988年从市场上撤回了消胆胺成品制剂，原因是规 程不当。生产该制剂的原料药受到了农业杀虫剂生产 中少量中间体和降解物质的污染。造成交叉污染的主 要原因使用了回收溶媒。而回收溶媒受到了污染，原 因是对溶媒桶的重复使用缺少监控。贮存杀虫剂产生 的回收溶媒桶又重复地用于贮存该药品生产中的回收 溶媒。而工厂没有对这些溶媒桶进行有效的监控，没 有对其中的溶媒进行有效的检验，也没有对桶的清洗 规程进行验证。被杀虫剂污染的部份化学原料药运到 了另一地点的第二家工厂生产制剂，使该工厂的流化 床干燥器中物料袋受到了杀虫剂的污染，料造成各批 产品受到污染，而该工厂根本就没有生产杀虫剂。