血涂片的制作

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1.检验目的

指导血涂片的制作,进行血细胞显微镜检查。

2.方法原理

血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛。一张良好的

血涂片,厚薄要适宜,头体尾要明显,细胞分布要均匀,血膜边缘要整齐,并留有一定

的空隙。血滴愈大,角度愈大,推片速度愈快则血膜愈厚,反之血涂片愈薄。

3.方法性能参数(如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特异性)

4.标本类型(如血浆、血清、尿液等)

抗凝的全血标本。

EDTA-K

2

5.要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统

载玻片、推片、微量吸管、瑞氏染液(刘氏快速染液)。

6.校准程序(计量学溯源性)

7.质量控制,控制品使用水平和频率,允许限的纠正措施

7.1引起血涂片分布不均的主要原因:推片边缘不整齐,用力不均匀,载片不清洁;

7.2血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,染色过程中容易脱落,因此血膜必须充分

干燥;

7.3血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变;

7.4血涂片太薄,50%的白细胞集中于边缘或尾部;

7.5血涂片过厚,细胞重叠缩小。

8.程序步骤

8.1取干净载玻片一张,手持玻片两端。

8.2用微量吸管取混匀的新鲜血液,将血液滴在距离载玻片一侧4-5mm处。

8.3取一块边缘光滑的载玻片作为推片,将推片的一端至于血滴的前方,向血滴处移动,

触碰到血液,使血液迅速均匀分布在推片与载玻片的接触处。

8.4将推片与载片呈30-45度角,平稳地向载片另一端推出。

8.5将推好的血片自然干燥。

8.6用瑞氏染液(刘氏快染)染色,见《瑞氏染色》。

9.计算结果原理

10.生物参考区间

11.警告值、危急值(适用时)

12.检验结果可报告区间

13.对超出可报告范围的结果的处理

14.实验室解释

15.安全防护措施

所有标本按具有潜在传染性的标本处理。

16.最常见的误差源。

17.方法的局限性(如乳糜血、溶血、高胆红素血等干扰影响、交叉反应等)18.参考文献

19.有关引用程序与文件

20.SOP涉及的记录与表格

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