大小鼠眼眶取血方法(附图)

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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压迫
颈两侧，使眼突出，眶 后静脉丛充血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出； B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证 抓紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。
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大鼠眼眶取血流程
3旋转刺入
Step3.眼内眦部， 45 ℃夹角，旋转刺 入，旋转退出。
4固定采血
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
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大鼠眼眶取血流程
5去管止血 Step5.取血完成，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血 Step 5 A 当得到所需的血量后，即 除去加于颈部的压力，同时，将 采血器拔出，以防止术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净，避免结块影响下次取血。
Step3 A 针头斜面先向眼球，刺入后再转 一定角度使斜面对着眼眶后界； B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠 约4-5mm。当感到有阻力时即停止推进， 同时，管退出约0.1-0.5mm，边退边旋 转； C 不要使用管的尖锐锋利端插入， 易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害， 使得下次反抗增加； D 拿管的手要保持干净，带血渍的 手指不要接触管的两端，易造成凝血， 可用醇水擦洗。
4.固定身体，压住后 肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
6血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血。
大鼠眼眶取血流程
1左手保定
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上，拇+中+ 食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部 乱动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉，防止接触凝血。
C 抗凝EP管
取血时必须提前检查管的质量，标号分组， 适当多备。
D 计时工具
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动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g
给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
实验期间 ，补充体液 ，目糖溶液。
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血样处理
A全血37℃ 水浴0.5~1h， 血清 不抗凝 B全血 室温静置 0.5-1h， 低温冰箱 过夜）
离心，取上清液， 低温保存
血样处理
短时间内 （< 30 min） 血浆 肝素钠抗凝
低速（< 4000） 离心（10min）
离心，取上清液， 低温保存
血浆/全血（V/V） 前五点低于40%--后续60%
6样品摇匀
Step6.血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血
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大鼠眼眶取血流程
Step 4 A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来； B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深 或浅的挑正一下 血会重新流出； C 如看见血液已经在毛细管中凝固 必须迅 速拔除毛细管，再搽干净眼睛，重新换管扎针； D 等到出血后 将力道转移到大鼠的身体上 大鼠出现乱动的情况很大的一部分力是他的后 肢使出来的 保证她的后肢无法乱蹬就能很好 的保定大鼠，然后将中指和食指处解除一半的 力道，可以保证血液的顺畅
实验之后，外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 选点一般原则 分布相 3-4个点 取血 容量 时间 安排
每次0.25- 0.5 mL
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
药物性质 预实验建立
给药途径
注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
大小鼠眼眶取血方法交流（附 图）
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
动物处理
取血容量 时间安排
大鼠 PK 取血
具体操作 血样处理 问题讨论
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环境 材料
A 通风台面 B 毛细管
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作 0.9mm × 100mm，看个人习惯使用， 经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。 EP 管 加入0.1% 肝素钠 （＞150U/mg） 0.1 mL，均匀润湿， 50℃以下干燥； 适用 1mL 全血的抗凝，效果良好。
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大鼠眼眶取血流程
1.将大鼠按压在鼠 笼上，拇+中+食指 固定住头部
3.右手持毛细管从眼 内眦部，与鼠面成45 ℃夹角，旋转刺入
5.取血完成，立即除 去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血。
1左手保定 2压迫颈部
3旋转刺入 4固定采血
5去管止血
6样品摇匀
2.紧握颈部，压迫颈 两侧，使眼突出，眶 后静脉丛充血
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