抑郁模型大鼠海马内环境的研究

合集下载

海马齿状回神经再生对WKY大鼠抑郁样行为的影响

海马齿状回神经再生对ＷＫＹ大鼠抑郁样行为的影响陈　玲，马近腾，常鑫蕊，冯　俐，杨小荣△（山西医科大学生理学系，细胞生理学教育部重点实验室，细胞生理学山西省重点实验室，太原０３０００１）【摘要】　目的：观察海马齿状回（ＤＧ）神经再生对成年ＷｉｓｔａｒＫｙｏｔｏ（ＷＫＹ）大鼠抑郁样行为的影响。

方法：实验共分三个组（ｎ＝１０）：①正常对照（Ｗｉｓｔａｒ）组：选取９周龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠，给予生理盐水３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）；②抑郁模型（ＷＫＹ）组：选取同龄ＷＫＹ大鼠并经行为学测定后筛选出抑郁大鼠作为抑郁模型组，给予生理盐水３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）；③阳性对照（ＡＭＩ＋ＷＫＹ）组：选取同龄ＷＫＹ抑郁大鼠，给予阿米替林（ＡＭＩ）３周（１０ｍｇ／ｋｇ，灌胃）。

选用免疫荧光染色细胞增殖标记物Ｋｉ６７、未成熟神经元标志物ＤＣＸ检测大鼠的海马神经再生水平；应用糖水偏好实验（ＳＰＴ）、旷场实验（ＯＦＴ）和强迫游泳实验（ＦＳＴ）检测各组大鼠的抑郁样行为学变化。

结果：①ＷＫＹ抑郁大鼠海马ＤＧ区细胞增殖标志物Ｋｉ６７＋细胞数和未成熟神经元标志物ＤＣＸ＋细胞数较Ｗｉｓｔａｒ大鼠分别降低了３３．０％（Ｐ＜０．０１）和３９．２％（Ｐ＜０．０１）；阿米替林给药后使抑郁大鼠海马ＤＧ区Ｋｉ６７＋细胞数和ＤＣＸ＋细胞数分别增加了４３．８％（Ｐ＜０．０１）和４６．７％（Ｐ＜０．０１）。

②与Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，ＷＫＹ抑郁大鼠糖水偏好程度明显降低（Ｐ＜０．０１），旷场实验中运动总距离显著缩短（Ｐ＜０．０１）和中心停留时间显著减少（Ｐ＜０．０１），强迫游泳实验中不动时间明显延长（Ｐ＜０．０１）；阿米替林治疗可显著改善ＷＫＹ大鼠的上述抑郁样行为。

结论：①成年ＷＫＹ抑郁大鼠的海马神经干细胞的增殖和分化能力较正常对照组显著降低，提示成年ＷＫＹ抑郁大鼠的神经再生受损；②改善海马受损的神经再生可以部分逆转成年ＷＫＹ大鼠的抑郁样行为。

【关键词】　抑郁症；神经再生；海马；大鼠【中图分类号】Ｒ７４９．４【文献标识码】Ａ【文章编号】１０００６８３４（２０１９）０６４９１００５【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．５８５３．２０１９．１０７Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ（ＤＧ）ｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｎｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎＷＫＹｒａｔｓＣＨＥＮＬｉｎｇ，ＭＡＪｉｎｔｅｎｇ，ＣＨＡＮＧＸｉｎｒｕｉ，ＦＥＮＧＬｉ，ＹＡＮＧＸｉａｏｒｏｎｇ△（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｅｌｌｕｌａｒＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｔＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｔａｉｙｕａｎ０３０００１，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢＳＴＲＡＣＴ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ（ＤＧ）ｏｆｔｈｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｎｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎａｄｕｌｔＷｉｓｔａｒＫｙｏｔｏ（ＷＫＹ）ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓｉｎｔｏｔａｌ（ｎ＝１０）：①ｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ（Ｗｉｓｔａｒ）ｇｒｏｕｐ：９ｗｅｅｋｏｌｄＷｉｓｔａｒｒａｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）；②ｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｅｌ（ＷＫＹ）ｇｒｏｕｐ：ＷＫＹｒａｔｓｏｆｔｈｅｓａｍｅａｇｅ，ｔｅｓｔｅｄｆｏｒｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓ，ｗｅｒｅａｓａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）；③ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ（ＡＭＩ＋ＷＫＹ）ｇｒｏｕｐ：ＷＫＹｒａｔｓｏｆｔｈｅｓａｍｅａｇｅｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ（１０ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）．ＴｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｆｏｒＫｉ６７（ａｎｅｕｒｏｎａｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｍａｒｋｅｒ）ａｎｄＤＣＸ（ａｎｉｍｍａｔｕｒｅｎｅｕｒｏｎａｌｍａｒｋｅｒ）．Ｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｓｕｃｒｏｓｅｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅｔｅｓｔ（ＳＰＴ），ｏｐｅｎｆｉｅｌｄｔｅｓｔ（ＯＦＴ）ａｎｄｆｏｒｃｅｄｓｗｉｍｍｉｎｇｔｅｓｔ（ＦＳＴ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ：①ＷｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＷｉｓｔａｒｒａｔｓ，ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＫｉ６７＋ｃｅｌｌｓａｎｄＤＣＸ＋ｃｅｌｌｓｏｆｔｈｅＤＧｉｎＷＫＹｒａｔｓｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ３３．０％（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ３９．２％（Ｐ＜０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＫｉ６７＋ｃｅｌｌｓａｎｄＤＣＸ＋ｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅＤＧｂｙ４３．８％（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ４６．７％（Ｐ＜０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＷＫＹｒａｔｓ．②Ｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＷＫＹｒａｔｓｓｈｏｗｅｄａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｉｎｓｕｃｒｏｓｅｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１），ｌｅｓｓｔｏｔａｌｈｏｒｉｚｏｎｔａｌｄｉｓｔａｎｃｅ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄｌｅｓｓｔｉｍｅｅｎｔｅｒｅｄｔｈｅｃｅｎｔｅｒｆｉｅｌｄ（Ｐ＜０．０１）ｉｎｔｈｅＯＦＴ，ｔｈｅｉｍｍｏｂｉｌｉｔｙｔｉｍｅｉｎｔｈｅＦＳＴｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．ＡｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎＷＫＹｒａｔｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：①ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎａｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆＷｉｓｔａｒｒａｔｓ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｔｈａｔｔｈｅｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎａｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓｉｓｉｍｐａｉｒｅｄ．②ＡｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎｏｆｉｍｐａｉｒｅｄｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓｃａｎｐａｒｔｉａｌｌｙｒｅｖｅｒｓｅｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎａｄｕｌｔＷＫＹｒａｔｓ．【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】　ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ；　ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ；　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ；　ｒａｔｓ１９４中国应用生理学杂志，２０１９，３５（６）【基金项目】山西省面上自然基金项目（２０１８０１Ｄ１２１３１６）；山西省“１３３１工程”重点学科建设计划经费；山西省回国留学人员科研教研资助项目；２０１８年度山西省高等学校大学生创新创业训练项目（２０１８１７３）【收稿日期】２０１９０３２７【修回日期】２０１９１０１８　△【通讯作者】Ｔｅｌ：１３５０３５１７４５３；Ｅｍａｉｌ：ｒｏｎｇ＿５２２５２２＠１６３．ｃｏｍ抑郁症是指持续超过两周，不能自控的以情绪低落、快感缺失、意志活动和认知功能减退以及思维迟缓为主要特征的情感性精神障碍。

MECT_治疗重度抑郁症相关研究进展

Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(3), 4448-4453 Published Online March 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.133638MECT 治疗重度抑郁症相关研究进展张晓燕，黄永清*内蒙古医科大学精神卫生学院，内蒙古呼和浩特收稿日期：2023年2月21日；录用日期：2023年3月16日；发布日期：2023年3月24日摘要重度抑郁症(Major Depressive Disorder, MDD)是世界上最常见、高致残性的精神疾病之一，目前临床上的治疗手段包括药物治疗、心理治疗、物理治疗等。

随着精神医学治疗手段的不断发展，无抽搐电休克治疗(Modified Electric Convulsive Therapy, MECT)在精神障碍的治疗中占有越来越重要的位置。

MECT 治疗重度抑郁症在临床上得到广泛认可，本文就MECT 治疗重度抑郁症相关研究进展进行讨论。

关键词抑郁症，重度抑郁症，MECT ，进展Progress in MECT Treatment for Major DepressionXiaoyan Zhang, Yongqing Huang *College of Mental Health, Inner Mongolia Medical University, Hohhot Inner Mongolia Received: Feb. 21st , 2023; accepted: Mar. 16th , 2023; published: Mar. 24th , 2023AbstractMajor depressive disorder, (Major Depressive Disorder, MDD) is one of the most common and highly disabling mental diseases in the world. At present, the clinical treatment methods include drug therapy, psychological therapy, physical therapy, etc. With the continuous development of psychia-tric treatment methods, modified electric convulsive therapy (Modified Electric Convulsive Thera-py, MECT) plays an increasingly important role in the treatment of mental disorders. MECT for MDD is widely recognized clinically, and this paper discusses the progress of research related to MECT for MDD.*通讯作者。

海马Warburg效应介导硫化氢对帕金森病大鼠海马小胶质细胞极化及其抑郁样行为的调控作用

海马Warburg效应介导硫化氢对帕金森病大鼠海马小胶质细胞极化及其抑郁样行为的调控作用摘要【研究背景与目的】抑郁症是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者最常见的并发症。

目前，对于PD抑郁仍缺乏有效的药物治疗。

硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)是一种具有神经调节作用的新型气体信号分子。

我们以往发现H2S具有改善抑郁的作用、且能上调PD大鼠海马Warburg效应。

有研究表明，Warburg效应具有调控小胶质细胞极化的作用，而小胶质细胞极化与抑郁症的发生密切相关。

为此，本课题将探讨H2S对PD大鼠抑郁样行为的拮抗作用，并从调控海马Warburg效应-小胶质细胞极化的角度探讨H2S抗PD大鼠抑郁样行为的机制。

【方法】1.采用鱼藤酮(rotenone,ROT)颈背部皮下注射建立PD大鼠模型；2.新环境进食抑制实验、强迫游泳实验和悬尾实验用于评估大鼠的抑郁样行为；高架十字迷宫实验用于评估大鼠的焦虑样行为；旷场实验评估大鼠自发活动量；3.免疫荧光(Immunofluore sce nce,IF)技术检测Iba1的平均荧光强度；4.蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶(Induction nitric oxide synthase,iNOS)以及精氨酸酶-1I(Arginase-1,Arg-1)、几丁质酶3样分子3(Chitinase3-like3,Ym-1)的表达；5.Griess试剂检测NO含量；6.ELISA kits检测IL-1β、TGF-β1、IL-4含量。

【结果】1.H2S改善ROT诱导的PD大鼠抑郁样行为在新环境进食抑制试验中，NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4w)能显著缩短ROT诱导的PD大鼠的进食潜伏期，30min内食物总消耗量无显著差异；在强迫游泳试验中，NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4w)能有效缩短ROT诱导的PD大鼠强迫游泳不动时间；在悬尾实验中NaHS(100μmol/kg,i.p.,4w)能明显降低ROT诱导的PD大鼠的不动时间。

硫苯酰胺对抑郁症大鼠海马区突触素Ⅰ基因表达的影响

。
和４％多聚甲醛（℃ ）经心脏进行血管冲洗４和灌流固定，含海马脑段人４取％中性福尔马林固定液中固定过夜，片，切所有动物均依次间断性地选取切片，个动物共取５，于每张用免疫组织化学染色实验。引物设计根据突触素Ｉｃ区和Ｂａｆ —ｃｎｉ的编码序列，利用Ｐｉｅ５ｒｒ．ｍ０软件设计引物，引物序列如下：突触素Ｉ：上游引物５ＡＴＴＣＴ — ＴＣＣＧＧ
２不同实验组ＰＲ产物的相对丰度．２Ｃ
分析
１材料和方法１．料１材动物成年雄性Ｗｉａｓｒ大鼠，由哈医大ＣＧＴＧＡＡＡＡＧＡＴＧＡ３ｔ
利用ＢｎＳａ件对ＰＲ产物进行扫ａｄｅｎ软Ｃ描分析，算突触素ＩＢａｔ计与 —ｃｎ的相对丰度ｉ之比，来说明不同实验组突触素ＩＲＡ的Ｎｍ相对丰度。所得数据应用ＳＳＩ．ｆｎＰＳ０ｏＷｉ— １ｒｄｗ软件进行统计学分析，利用ＯｅＷａｏｓｎ— ｙＡＶＡ进行不同实验组的组间对比（算结ＮＯ计果见表１ｏ从表１可见，郁症模型组突触抑ＧＡＣＡＴＧＧＡＡＧＴＴＣ３素ＩＲＡ的相对丰度要显著低于对照组Ｎｍ下游弓物５ＧＡＡＧＡＡｃＴＴ — （＜．）经硫苯酰胺治疗２天后，丰度ＩＧｃｃＣＣＴＧＡＴｐ０５，０１其ＴＧＡ３共计４９ｐＡＣ６ｂ回升，与对照组的差异已不显著（＞．）ｐＯ５。０Ｂ— ｃｎ上游弓物５ＡＧＣＡ — ａｔ：ｉＩＧＣＡＣ表１ＰＲ产物的相对丰度分析Ｃ

雌激素受体α在抑郁症模型大鼠海马中的分布

性应激结合孤养方式构建抑郁症模型，ｐｎｉｄ法观察动物的抑郁行为，Ｏｅ—ｅｆｌ免疫组织化学方法观察海马神经元中Ｅ的分布．果表明：对照组相比，郁组大鼠水平运动、直活动和理毛次数Ｒ结与抑垂显著减少（Ｐ＜００）体重增幅和糖水消耗量显著性下降（．１，Ｐ＜００）在对照组和抑郁组，Ｒ免．１；Ｅａ
号通路发挥神经保护作用的能力减弱．关键词：郁症；激素受体ａ海马神经元抑雌；中图分类号：４５Ｑ１文献标识码：Ａ文章编号：０１４３２１）１０２—０１０ —２４（０００ —０６５
抑郁症（ｅｒｓｉ）是以显著而持久的情感或心境改变为主要特征的精神疾病Ｈ。ｄｐｅｓｎｏ随着人们工作和生活Ｊ节奏加快，种应激因素增加，各抑郁症已成为常见病和多发病＿．２流行病学调查表明女性抑郁症的发病率大ｊ约是男性的２倍，已证明女性在经前期、现妊娠期、产后和围绝经期等雌激素剧烈减少的时期更易患抑郁症．经前综合征、抑郁、产后绝经期抑郁经雌激素替代治疗可明显改善相应症状．物实验和临床研究均显示，动应激和抑郁可导致海马等边缘系统的细胞丢失和体积减小ｊ提示雌激素与抑郁症的发病关系密切，马是．海抑郁症受累的重要区域之一．本研究采用慢性不可预见性刺激结合孤养方式建立大鼠抑郁模型，免疫组织化学观察雌激素受体ａ在海马中的表达及其改变，以进一步探讨抑郁症发病机理．

慢性应激肝郁证大鼠模型的复制及相关基因表达的研究

ｒｅｓｕｌｃ，ｗｅｕｓｅｔｈｅｍｏｄｅｌｏｆｃｈｒｏｎｉｃｕｎ口ｒｅｄｉｃｔａｂｌｅ皿ｉｌｄｓｔｒｅｓｓｔｏｉｍｉｔａｔｅｔｈｅＬｉｖｅｒｓｔａｇｎａｔｉｏｎｓｙｎｄｒｏｍｅ，ａｎｄｔｅｓｃｔｈｅｗａｓｔａｇｅｏｆ１％ｓａｃｃｈａｒｏｓｅｓｏｌｕｔｌｏｎａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｒａｔ’ｓｂ１００ｄＤＬａｓｍａＡＣＴＨ．ＷｅｕｓｅｍａｌｅＳＤｒａｔｓａｎｄｒａｎｄｏｍｌｙｄｉＶｉｄｅｉｎｔｏ曲ｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｈｉｃｈ１０ｒａｔｓｗａｓｐｕｔｉｎｔｈｅｓａｍｅｃａｇｅ，ｔｈｅｇｒｏｕｐｏｆｓｔｒｅｓｓｍｏｄｅｌ＆ｎｄｔｈｅｇｒｏｕｐｏｆｓｔｒｅｓｓｍｏｄｅｌａｄｍｉｎｉｓＣｅｒｅｄｗｉｔｈａｍｉｔＩｉｐｔｙｌｉＢｅｗｈｉｃｈｅａｃｈｒａｔｗａｓｆｏｓｔｅｒｅｄｓｏｌｅｌｙ，ｔｈｅｆｏｕｒｔｈｇ工ｏｕｐｗａｓｍｏｄｅｌｇｒｏｕＤａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｗｉ￡ｈＸｉａｏｙａｏｓａｎａｎｄｅａｃｈｒａｔｗａｓｆｏｓｔｅｒｅｄｓｏｌｅｌｙ．Ａｔｔｈｅｆｉｒｓｔｄａｙａｎｄｔｈｅｌａｓｔｄａｙｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｗｅｔｅｓｔ￡ｈｅｗａｓｃａｇｅｏｆ１％ｓａｃｃｈａｒｏｓｅｓ０１ｕｔｉｏｎ，ａｎｄｉｎｔｈｅｌａｓｔｄａｙ，ｂｙｔｈｅａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ，ｗｅｇｅｔ２ｍｌｒａｔ’ｓｂｌｏｏｄｉｎｏｒｄｅｒｔｏｇａｉｎｂｌｏｏｄｐｌａｓｍａ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｂｅｗａｓｔａｇｅｏｆ１％ｓａｃｃｈａｒｏｓｅｓｏＩｕｔｉｏｎｏｆｔｈｅｎｏ工ｍａｌｃｏｎｔｒ０１ｇｒｏｕｐｉｓｍｏｒｅｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｇ工ｏｕ口ｏｆｓｔｒｅｓｓｍｏｄｅｌ，ａｎｄｗａｓｆａｍｉｌｉａｒｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＡＣＴＨ．ＴｈｉｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅＣＵＭＳｍｏｄｅｌｃａｎｉｍｉｔａｔｅｄＬｉｖｅｒｓｔａｇｎａｔｉｏｎｓｙｎｄｒＯｍｅ．

捏脊对抑郁模型大鼠海马全基因组表达谱的影响——捏脊治疗抑郁症实验研究之二

ｆ脊治疗抑郁症实验研究之一已刊登于本刊２１捏００年第
６期
海马．液氮中保存每组取１标本送交上海康成生物工程置个有限公司进行全基因组表达谱芯片测试．芯片名称为Ｒｔｓａｕｔ
论．脊治疗抑郁症的机理与调控多条基因表达有关。捏关键词抑郁症捏脊疗法基因芯片测试中图分类号１２４１＜４．文献标识码Ａ
文章编号１７ — ９Ｘ（０００－０７ —０６２３７２１）８０５３
ｒｄｃｉｎｆｅｕｔｏｗａｅｐｒａｉｔｉｉｎｒｏｔｒｅｍｅｂｌｙｎｎｅｍｅｕｌｒｃｌｃｉｇｉｄｌａｙｏｌｔｎｅ
综上，方剂组用药后模型小鼠的肺指数有降低趋势，对流
感病毒性肺炎湿热证模型小鼠的肺指数具有一定的抑制作
治疗后表达趋于正常的基因有８３条，中多条基因与能量和物质代谢有关，涉及蛋白质生物合成和嗅觉感受器等；其还抑
郁模型大鼠上调表达的．捏脊治疗后表达趋于ａ常的基因有１９条，中多条基因与凝血、疫、症和凋亡相关。结经Ｙ－－７其免炎
型组、脊组大鼠治疗１后处死，颅取脑，冰盒上分离捏周开在

抑郁模型大鼠海马内环境的研究

抑郁模型大鼠海马内环境的研究摘要抑郁症是一种常见的心理障碍，其发病机制至今尚未完全阐明。

本文以大鼠海马内环境为研究对象，探究抑郁模型对海马内环境的影响。

实验结果表明，抑郁模型大鼠海马内环境中神经递质的含量明显降低，且神经元数量减少、运动反应受损等表现均加重。

简介抑郁症是一种常见的心理障碍。

目前已知，斯特里彭受体、5-羟色胺、去甲肾上腺素等相关物质与发生抑郁症密切相关。

然而，这些机制都在细胞和分子水平上。

因此，本文旨在探究抑郁模型对大鼠海马内环境的影响，从而进一步了解抑郁症的发病机制。

材料和方法实验动物：实验使用SD大鼠24只，雄性和雌性各半，体重均值300克。

实验设计：在生成抑郁模型的大鼠中，分别将其放入含毒性物质氯碘（CUMS）水中30分钟（2mA/L），两次间隔1小时。

连续进行10天。

实验组和对照组动物数量均为12只。

海马内环境分析：实验结束后，采用高压液相色谱法和免疫荧光法分析大鼠海马内环境中神经递质含量和神经元数量。

结果显微镜下观察在显微镜下观察实验组和对照组大鼠海马内环境。

发现实验组大鼠海马神经元数量减少，直径和长度均小于对照组大鼠。

此外，实验组大鼠出现明显运动反应受损，缺乏摆尾现象。

神经递质分析实验组与对照组大鼠海马分别采用高压液相色谱法、免疫荧光法进行分析。

实验结果表明，实验组大鼠海马中的多巴胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素等神经递质含量均明显低于对照组大鼠（各项数据p<0.01）。

此外，实验组大鼠海马中的谷氨酸等神经递质含量也有所下降。

讨论本研究得出的结果显示，抑郁模型大鼠海马内环境中神经递质含量明显降低，神经元数量减少、运动反应受损等表现均加重。

这说明抑郁症可能与海马内环境的削弱有关，同时也支持了抑郁症和神经环路的不平衡之间存在的联系。

由于本实验中所用大鼠的性别、体重和年龄等因素对实验结果可能会有干扰，因此，后续还需要进一步探究各因素之间的联系，以获得更加准确的数据。

结论本实验结果表明，抑郁模型大鼠海马内环境中的神经递质含量和神经元数量均处于下降状态，这为抑郁症发生机制的研究提供了新的线索和方向。

慢性应激抑郁大鼠海马miRNA的差异表达及生物信息学分析

中华行为医学与脑科学杂志2020年12月第29卷第12期Chin J Behav Med Brain Sci,December2020,Vol.29,No.12・1073・-基础研究-慢性应激抑郁大鼠海马miRNA的差异表达及生物信息学分析赛音朝克图'赵俊2罗彤$邓套图格'宋美丽彳艾丽雅彳阿茹娜'I内蒙古自治区国际蒙医医院，呼和浩特010065；2北京中医药大学针灸推拿学院100029；3内蒙古医科大学蒙医药学院，呼和浩特010110通信作者：赛音朝克图，Email:saiyin2012@【摘要)目的分析慢性应激抑郁模型大鼠海马组织miRNA表达特征,探究与抑郁发作相关的差异表达miRNA。

方法将12只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和模型组，每组6只。

对照组大鼠群养,正常饮水摄食，不给任何刺激。

模型组大鼠孤养,并给予8种不可预知的慢性应激刺激28d,建立大鼠抑郁模型。

利用旷场实验检测大鼠的抑郁行为，运用miRNA 4.0Array芯片技术筛选出对照组和模型组大鼠海马间差异表达miRNA,利用Fisher精确检验，筛选出具有显著性差异的miRNA,采用miRanda和TargetScan两个数据库对显著性差异miRNA分别进行靶基因预测，取两种预测结果的交集，对差异表达miRNA利用GO数据库进行基因功能注释,KEGG数据库进行信号通路(Pathway)注释。

结果miRNA芯片技术分析结果显示，与对照组比较，模型组大鼠海马组织中得到25条差异表达miRNA,其中上调的miRNA有15条(P<0.O5,FC>1.3)，下调的miRNA有10条(P<0.O5,FC>1.3)。

这些miRNA的靶基因主要参与细胞内信号转导、RNA聚合酶II启动子转录的调节、DNA模板化、蛋白质磷酸化、大脑发育、心脏发育等生物学进程(P<0.01)o Pathway分析显示，轴突导向和癌症通路的显著性水平最为显著,其次是AMPK信号通路、cGMP-PKG信号通路、神经营养信号通路等抑郁发作的经典信号通路(P<0.05)。

舒郁宁心汤对抑郁模型大鼠海马区脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响

２实验方法
盐酸氟西汀分散片（ＡＨＯＲＮＥ公司产品，号ＰＴＥＮＦＡＣ批９１Ｂ，０ｍ／蒸馏水配成浓度为０４ｍ／Ｌ的混悬液，７）２ｇ粒，１．ｇｍ现基金项目：北京市科技计划基金（００００７９３）Ｚ９５７１０００７
ｒｌｔｄｔｓｆｅａｅｏｉｔｕｎｃｏｏｐｏｎｈｅｅｒｓｉｎｏｉｔｎｆｍｒｖｇｔｘｅｓｏｆｉｉｐＢＤＮＦｄＴｒＢ．ｎａｋＫｅｒｓＳｈｕｎｘｎｄｅｏｔｏｙｗｏｄ：ｕｙＮｉｇｉｃｃｎ；ｄｐｅｓｏｉｅｒｓｉｎ；ＢＤＮＦ：Ｔｒ（１Ｂ：ｒｔａｓ
ｈｉｈｓｆＳｈｕｎｇｉｄｅｏｔｏｏｄｍｉｄｅｄｏｅｏｕｙＮ￣ｘｅｏｔｎｏｇｄｏｅｏｕｙＮｉｘｎｃｃｎｇｕｐａｄｌｓｆＳｈｕｎｇｍｄｃｃｏｇｕｐｒｉｒｎｉｒｗｅｅ
ＴｒｋＢｉｈｉｐｃｍｐｆｃｏｉｔｅｓｅｒｓｉｎａｓａｄｘｌｒｉｓｎｔｄｐｅｓｔｎｐｏａｕｓｏｈｒｎｃｓｒｓｄｐｅｓｏｒｔ，ｎｅｐｏｅｔａｉｅｒｓａｍｅｈａｓ．ｎｃｎｉｍＭｅｈｄＳｔｏｓＳＤａｓｗｅｅｓｌｃｅｄｒｎｄｍｌｄｉｉｅｎｔｏｒｌｇｏｒｔｒｅｅｔｄａａｏｙｖｄｄｉｏｃｎｔｏｒｕｐ，ｍｏｌｇｏｎｄｅｒｕｐ，ｆｘｔｌｕｏｅｉｎｅ

母婴分离方法制备产后抑郁大鼠模型的r行为学及海马病理变化的观察

母婴分离方法制备产后抑郁大鼠模型的r行为学及海马病理变化的观察李净娅;章正祥;戚观树;杨歆科【摘要】目的观察并验证母婴分离方法制备的产后抑郁模型大鼠的行为学与海马病理学表现.方法随机选取16只大鼠进行为期14d的母婴分离,另4只产后母鼠作为空白对照不作任何分离.造模结束后对母鼠行旷场实验评价,根据其评分应用K-聚类分析进行分类,造模1周后对20只大鼠行为学评价,造模5周后取大脑海马观察HE染色结果.结果聚类分析结果得出正常组9只(包括4只空白对照大鼠),产后抑郁组11只.与正常组比较,造模1周后产后抑郁组大鼠体重变化程度明显增加,水平及垂直分数明显降低,悬尾实验不动时间明显增加,十字迷宫开臂停留时间及进入开闭臂总次数明显降低,并且闭臂停留时间明显增加.HE染色显示产后抑郁组海马神经元细胞损伤.结论经过2周母婴分离的母鼠有抑郁表现的概率为68.75％,此模型有必要进一步的探索实验.【期刊名称】《浙江临床医学》【年(卷),期】2018(020)006【总页数】3页(P991-993)【关键词】产后抑郁;动物模型;母婴分离;行为学表现【作者】李净娅;章正祥;戚观树;杨歆科【作者单位】310006 浙江省中医院神经内科;310006 浙江省中医院神经内科;310006 浙江省中医院神经内科;100029 北京中医药大学第三附属医院【正文语种】中文产后抑郁症（PPD）是指产妇在分娩后出现情绪低落，精神抑郁为主要症状的病症［1］。

PPD动物模型单一，Galea等［2］于2001年制备的激素撤离模型是迄今唯一的较为成熟的PPD模型。

2007年，Boccia Maria L等［3］发现产后被长时间母婴分离的母鼠在强迫游泳实验中有类似抑郁症状的表现。

随后其他一些研究亦证明了这一现象，并且抑郁症状在分离后数周仍持续存在。

而Toigo EP［4］则以类似方法造模，强迫游泳结果亦显示，在产后35d母婴分离的母鼠不动时间延长，并发现其海马内钠钾ATP酶活性增强，一氧化氮含量下降。

皮质前额叶和海马PPAR-α通路参与N-棕榈酰乙醇胺抗大鼠抑郁样行为

实验研究皮质前额叶和海马PPAR-α通路参与N-棕榈酰乙醇胺抗大鼠抑郁样行为李瑞瑞，张露文，张渺，于海玲△摘要：目的探讨皮质前额叶（PFC）和海马中α型过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARα）参与N-棕榈酰乙醇胺（PEA）调控慢性应激诱导大鼠抑郁样行为的机制。

方法将50只SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型组、氟西汀组（阳性药物对照，10mg/kg）、PEA组（10mg/kg）和PEA+MK886组（PEA10mg/kg+MK8863mg/kg），每组10只。

除正常对照组外，其余各组大鼠给予慢性不可预见性温和应激（CUMS）和孤养应激干预4周建立抑郁模型，建模1周时分组给予相应药物干预4周。

第36天麻醉大鼠后取脑组织标本，通过免疫组化染色观察皮质前额叶（PFC）和海马中多唾液酸-神经细胞黏附分子（PSA-NCAM）蛋白表达情况；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠PFC中脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的表达，及PFC和海马中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和核转录因子-κB（NF-κB）的水平。

结果PEA上调了CUMS抑郁模型大鼠PFC和海马中PSA-NCAM及PFC中BDNF和GDNF蛋白表达，下调了PFC和海马中TNF-α、IL-1β和NF-κB水平。

与PEA组相比，PEA+MK886组大鼠PFC和海马中PSA-NCAM、PFC中BDNF和GDNF的表达下调，PFC和海马中TNF-α、IL-1β、NF-κB的水平增加。

结论PEA可通过调控PFC和海马的PPARα通路促进神经可塑性、缓解神经炎症，发挥神经保护作用，从而改善CUMS大鼠的抑郁样行为。

关键词：抑郁症；海马；N-棕榈酰乙醇胺；皮质前额叶；过氧化物酶体增殖物激活α受体中图分类号：R964文献标志码：A DOI：10.11958/20211792Prefrontal cortex and hippocampal PPAR-αpathway participate in N-palmitoylethanolamineanti-depression-like behaviors in ratsLI Ruirui,ZHANG Luwen,ZHANG Miao,YU Hailing△College of Medicine,Yanbian University,Yanji133000,China△Corresponding Author E-mail:************.cnAbstract:Objective To investigate the role of N-palmitoylethanolamide(PEA)in regulating the depression-like behavior induced by chronic stress in rats,which is mediated by a potential target peroxisome proliferator-activated receptor alpha(PPARα)of prefrontal cortex(PFC)and hippocampus.Methods Fifty SD rats are randomly divided into the normal control group,the chronic unpredictable mild stress(CUMS)model group,the fluoxetine group(positive drug control, 10mg/kg),the PEA group(10mg/kg),and the PEA+MK886group(PEA10mg/kg+MK8863mg/kg).In addition to the normal control group,other groups were given CUMS intervention for4weeks to establish depression model.After1week of modeling,groups were given corresponding drug intervention for4weeks.On the thirty-sixth day,after rats were anesthetized and sacrificed,the prefrontal cortex and hippocampus were quickly separated and preserved.The expression of polysialic acid-nerve cell adhesion molecule(PSA-NCAM)protein in cortex prefrontal lobe(PFC)and hippocampus was observed by immunohistochemical method.The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to detect brain-derived neurotrophic factor(BDNF),glial cell-derived neurotrophic factor(GDNF),tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleukin-1β(IL-1β)and nuclear transcription factor(NF-κB)levels in rat PFC or hippocampus.Results Compared with the CUMS model group,PEA up-regulated the protein expression of PSA-NCAM in prefrontal cortex and hippocampus, and BDNF and GDNF in prefrontal cortex,and down-regulated the levels of TNF-α,IL-1βand NF-κB in prefrontal cortex and hippocampus in the PEA pared with the PEA group,the rats in the MK886group down-regulated protein expression levels of PSA-NCAM,BDNF and GDNF,and up-regulated the levels of TNF-α,IL-1βand NF-κB of prefrontal 基金项目：国家自然科学基金地区基金项目（81760650，81960656）作者单位：延边大学医学院（邮编133000）作者简介：李瑞瑞（1995），女，硕士在读，主要从事神经药理学方面研究。

抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化

ＴＡＴ：ｊｃｉＴｏｏｓｒｅｃａｇｓｏａｎｎｎｍｏｙａｉｔｓａｄｔｅｕｔａｔｕ－ｖｂｅｖｈｎｅｆｅｒｉｇａｄｍｅｒｂｌｉｎｈｌｓｒｃｌｉｅｒ
ｔｒｆｈｐｏａｐｓｉｅｒｓｉｎｍｏｅａｓＭｅｈｄＴｗｅｔｅａｅＳｒｔｒａｄｍｌｕｅｏｉｐｃｍｕｎｄｐｅｓｏｄｌｒｔ．ｔｏｓｎｙｆｍｌＤａｓｗｅｅｒｎｏｙ
ｄｖｄｄｉｔＷＯｇｏｐ１ｎｅｃ）：ｎｒｌｇｏｐａｄｍｏｅｒｕ．Ｔｈｏｍｅｓｇｖｎｎｉｉｅｎｏｔｒｕｓ（ｉａｈ０ｏｍａｒｕｎｄｌｏｐｇｅｆｒｒｗａｉｅｏ
组和模型组，每组１Ｏ只。正常组不给予任何处理，型组给予孤养加２模１ｄ慢性不可预见性的温和应激（ＵＭＳ。Ｃ）采用ＯｐｎＦｅｄ糖水消耗量及Ｍｏｒ水迷宫测试大鼠的行为学表现；ｅ－ｉｌ、ｒｉｓ光镜以及透射电镜观察大鼠海马组织结构。
习记忆力下降可能与应激造成海马形态结构改变有关。
关键词：慢性不可预见性的温和应激；海马；透射电镜；动物，实验；大鼠
中图分类号：一３２Ｒ３
文献标识码：Ａ
文章编号：ｏｏ２４２０）１０４０１ｏ一２９（０９０ —００－５
ＣｈｎｅｆＬｅｒｉｇａｄＭｅｏｙＡｂｌｔｅｎａｇｓｏａｎｎｎｍｒｉｉｉｓａｄ

ERβ在抑郁模型大鼠下丘脑PVN和海马中的表达

能与其受体表达减少有关。关键词：抑郁模型大鼠；下丘脑ＰＮ；海马；免疫组织化学；雌激素受体ＢＶ
中图分类号：Ｐ７９４．４．
文献标识码：Ａ
文章编号：１７ — ８６（００６００ — ３６４４９２１）０ — ０５０
１材料及组织准备．２
１１ＵＭＳ结合孤养方法造模．Ｃ１１１动物分组及筛选．．大鼠适应性饲养一周后进行Ｏｅ— ｉｄ０ｐｎＦｅｔｌ￣．
取对照组、实验组动物，乙醚麻醉，开胸后经左心室插管至升主动脉，灌注０９．％的生理盐水，至肝脏发白后灌注含４％多聚甲醛、２％戊．５
５
第６期
林圣彬唐晓伟李伟鲁亚平
Ｅ在抑郁模型大鼠下丘脑ＰＮ和海马中的表达ＲＢＶ
总第ｌ４期
二醛的０１ｏＬ磷酸缓冲液按２０ｌｇ重进行．ｌｍ／０ｍ／体ｋ
糖水偏爱度第２天显著下降，至第３１５天持续处
试，将水平运动次数加垂直运动次数不足３０次
收稿日期：２１－６１，２１ — １００００－６００１ — ２修回
基金项目：国家自然科学基￣（４０３）．３７５７；安徽高校省级自－０然科学研究重大项目（Ｄ０８０－）Ｚ２００６１；重要生物资源保护与利用研究安
治提供基、禁水（）１ｉ）２ｈ、禁食（４ｈ、鼠笼倾４２）斜４５。（４）、温箱（Ｃ，ｍｎ２ｈ４ｑ５ｉ）、摇晃５

坤宁安对围绝经期抑郁大鼠模型海马5-HTR1A和5-HTR2A受体亚型mRNA表达的影响

Ｉ１主要实验药品、剂与仪器．．２试
经人鼠剂量换算，坤宁安方组：按等效剂量ｌ２４、、倍作为低、高剂量中、组剂量标准。倍美力组：ｌ／Ｏｇｌｍｔ［Ｏ体重灌胃（．０６／）氟西汀组：Ａ￣００６ｍｇｍ１。Ｐｌ／ｏｇＪｍｌ１ｏ体重灌胃（．ｌ／）模型组：，０２ｍｇｍ１。生理盐水灌胃，ｍｌ只。日３／每１，次于每次刺激前２小时灌服，连续２天。ｌ对照组不加处理。
，
坤宁安对围绝经期抑郁大鼠模型海５ＨＲ５ＨＲＡ受马一Ｔ１Ａ和一Ｔ２体亚型ｍＲＡ表达的影响Ｎ
王晓滨王秀霞：丛慧芳赵
（．１黑龙江中医药大学附属二院２黑龙江中医药大学．
锐杨东霞段志宇
哈尔滨ｌ０３５０６；
ｔｅｉｆｒＲＴＰＲＫｉＴｚｌＲａｅｔ国Ｉｖｔｇｎ司ＢＳ．ｈｓｓｏ－Ｃ、ＲＩｏｅｇｎｓ美ｎｉｏｅ公ｒＩＡ２
５全自动图像分析系统德国Ｋｏｔｏ￣司，ＣｎｒｎＰＲ仪德国Ｅｐｎｏ公司。ｐｅｄｆ
１．实验方法２
ＴｒｎｓｒｐａｅＯｌｇｌＯｐＤＮＡａｄｒＦｉｓ—ｓｒｎＤＮＡｙｎａｃｉｔｓ、ｉｏ、ＯｂＬｄｅ、ｒｔｔａｄｃＳ —
大鼠用ｌ％水合氯醛（．ｍｌ０ｇ行腹腔内注射麻醉后，ｏ０４／１０）放于木板平台上，开胸腔，打暴露心脏，左心室插管，剪开右心耳，０ｍＦ理盐水快用２０＃速灌注冲洗血液，快速开颅取脑组织，冰上迅速分离出海马，重后液氮在称罐中保存。检测时，提取大鼠脑组织的ＲＮＡ，用琼脂糖凝胶电泳快速检测Ｒ

慢性应激抑郁模型大鼠脑内RES1mRNA表达水平的变化

慢性应激抑郁模型大鼠脑内RES1mRNA表达水平的变化发表时间：2012-09-29T09:07:26.373Z 来源：《医药前沿》2012年第12期供稿作者：何金花1 黎毓光1 刘誉2[导读] 抑郁症的发病机制主要被认为是由于患者体内5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺等神经递质紊乱所致何金花1 黎毓光1 刘誉2(1广州市番禺中心医院广东广州 510440)(2暨南大学医学院生化教研室广东广州 510632)【摘要】目的观察慢性应激(chronic mild stress,CMS)抑郁模型大鼠局部脑区RES1（Ratts homolog of zebrafish ES1）mRNA表达水平的变化，结合行为学改变，探讨RES1基因在抑郁发生、发展中的作用及抑郁的发病机理。

方法将30只成年雄性大鼠随机分为对照组和慢性应激模型组，利用慢性不可预知的温和应激建立大鼠抑郁模型，正常对照组不予任何刺激，观察并比较两组大鼠行为学表现。

提取大脑海马组织中的RNA，以GAPDH为内参照实时荧光定量RT-PCR方法检测大鼠大脑海马内RES1基因mRNA表达的改变。

结果与对照组相比，慢性应激模型组大鼠活动能力下降，兴趣丧失，与临床抑郁症的精神抑制症状相似。

模型组RES1 mRNA表达水平低于对照组，两组间差异显著具有统计学意义(p<0.05)。

结论 RES1基因表达下调可能与抑郁症的发生和发展有关。

【关键词】抑郁症 RES1基因实时荧光定量RT-PCR 海马【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）12-0083-02抑郁症的发病机制主要被认为是由于患者体内5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺等神经递质紊乱所致[1]。

研究发现海马、前额皮质体积基因组学显示多个基因位点改变，没有找到单一的遗传模式[2]。

这些观点都不能完全解释抑郁症的发病机制，也无从正确指导新的抗抑郁药物的开发和疾病的预防。

大鼠抑郁模型

一、行为绝望抑郁模型大鼠强迫游泳实验复制方法：雄性大鼠，体重为160~180g。

将大鼠放入水深15cm的玻璃圆缸内（高40cm，直径18cm），水温25℃，使其游泳5min，测定动物在5m in内累计保持漂浮不懂状态的时间。

动物不动行为的评判标准为大鼠微卷躯体，但保持垂直姿势，鼻孔露出水面。

给药时间可根据需要延长，于末次给药后1h左右进行测定。

模型特点与比较医学：大鼠强迫游泳实验的可信度较高，除了一些5—HT再摄取抑制剂之外，多数抗抑郁药在该模型中均能减少动物停止游泳不动的时间，且动物的实验结果与临床上药效显著相关。

该实验中水的深度是关键，应使动物后爪刚可触及水底，但又不能支撑身体的深度为宜。

二、习得性抑郁模型复制方法：雄性大鼠，体重为180~200g。

1、实验装置：为大鼠穿梭箱，梭箱包括2个相同大小的室，尺寸为30cm×20cm×30m，两室中间底部有一7cm×7cm的通路，可以人为开闭。

箱底均为不锈钢栅条，条间距离为1cm。

两室的栅条可分别通电，当其中一室与电刺激接通时另一室则为安全室，实验时仅一个室通电。

自动记录装置（或秒表代替）。

2、无助的“诱发”：将动物分组，实验组的动物于第1日进行不可逃避的电休克刺激。

作法是关闭穿梭箱的中间通路，将大鼠放入一侧箱内，通过箱底部金属栅条通电使大鼠足部接受0.8m A×15s的电刺激，1次/min，共60次（即15s的电刺激+45s的间歇期），总共持续时间1h。

对照组大鼠只放入箱内而不进行电刺激，时间相同。

3、条件回避实验：第2日动物开始给药，采取亚长期（3~7d）给药方法。

最后一次给药后24h，进行条件回避实验。

将动物放入穿梭箱后适应5s，然后进行试验，条件刺激为铃声（或光信号），非条件刺激为足底电击0.8mA。

在铃声响后（或光信号出现后）3s 开始刺激，动物逃到安全室后停止铃声（或光信号）和电刺激，如动物未能逃避且刺激达30s时停止。

抑郁症大鼠海马神经元改变的形态学研究

ｔｉｏｎｏｆｓｕｃｒｏｓｅｗａｓｌｏｗｅｒ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅＯｆｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｅｎｔｒｙｉｎｔｏｏｐｅｎａｒｍｓａｎｄｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｔｉｍｅｓｐｅｎｔｗｅｒｅｓｉｇｎｉｉｆ —
ｅｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｗａｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｇｉｖｉｎｇｔｈｅｒａｔｓｃｈｒｏｎｉｃｕｎｐｒｅｄｉｃｔｅｄｍｉｌｄｓｔｒｅｓｓ（ＣＵＭＳ）．１１１ｅｂｅｈａｖｉｏｒ
抑郁症大鼠海马神经［关键词］抑郁症
海马
形态学神经元
［中图分类号］Ｒ７４９．４［文献标识码］Ａ［文章编号］２０９５ — ２６９４（２０１３）０５ — ６５２ — ０２
ＪｌＲｏｎ￣ｉｎｇ，ｅｔａｌ（Ｃｏｌｌｅｇｅ
［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｎｅｕｒｏｎｓｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｌａｎｅｕｒｏｎｓｏｆｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｅｌｒａｔｓ，ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅ

β—细辛醚对抑郁模型大鼠海马CA3区超微结构的改变及脑组织ERK蛋白表达的影响

β—细辛醚对抑郁模型大鼠海马CA3区超微结构的改变及脑组织ERK蛋白表达的影响作者：荣华等来源：《中国医学创新》2013年第36期【摘要】目的：探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马CA3区超微结构及脑组织ERK蛋白表达的影响及干预作用。

方法：选取60只4～5月龄SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组和β-细辛醚组，每组15只。

采用慢性轻度不可预见性应激制作大鼠抑郁模型，造模第2天开始，氟西汀组和β-细辛醚组给予氟西汀和石菖蒲干预，于实验第1、7、14、21天，分别进行体重、糖水偏爱度检测和敞箱实验，对大鼠行为学改变进行评定。

采用电镜技术观察大鼠大脑组织海马CA3区超微结构的改变，采用免疫组织化学染色和计算机图像分析技术测定检测ERK蛋白阳性目标积分光密度及其表达的变化。

结果：电镜观察结果显示：模型组大鼠海马神经元凋亡增加，β-细辛醚能改善大鼠海马病理改变；免疫组化结果显示：与模型组比较，氟西汀组和β-细辛醚组大鼠行为学指标显著改善，海马区ERK蛋白表达增强，差异有统计学意义（P【关键词】β-细辛醚；抑郁； ERK；免疫组织化学染色；电镜抑郁是由显著而持久的心境低落为主要临床特征的精神障碍，通常由一种或多种原因引起，核心症状为情绪低落，并常伴有闷闷不乐，自卑焦虑，甚至悲观厌世，可有自杀企图或行为等意志减退及各种躯体症状[1]。

抑郁症的主要病理改变表现在中枢神经系统，有器质性的病变基础[2]。

患者有神经元的可塑性下降，脑颞叶皮层特别是海马部位密度下降，神经元的树突减少和神经元坏死，即结构和功能发生适应性改变[3]。

抗抑郁药其药理作用通常为通过激活大脑部分区域神经元内的信号通路，以达到影响神经元的可塑性[4-5]。

细胞外信号调节激酶（ Cextracellular signal-regulated kinase，ERK1/2）是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）超家族的重要成员之一，是传递丝裂原信号的信号转导蛋白，作用于胞浆或胞核内的底物蛋白，ERK 信号通路可以通过调节下游的细胞转录因子发挥作用，引起特定蛋白的表达或活化，促进细胞存活和增强细胞突触可塑性的作用。

产前应激致抑郁样子代大鼠海马磷酸化蛋白质和代谢产物变化的初步研究

第33卷第6期2022年6月中国妇幼健康研究Chinese Journal of Woman and Child Health ResearchVol. 33 No. 6Jun. 2022产前应激致抑郁样子代大鼠海马磷酸化蛋白质和代谢产物变化的初步研究何威、孙宏利\黄惠梅2,李清红3(1.西安市儿童医院陕西省儿科疾病研究所陕西省儿童疾病精准医学重点实验室，陕西西安710003;2•西安市儿童医院肾脏内科，陕西西安710003;3.西北妇女儿童医院新生儿科，陕西西安710061)[摘要]目的探讨产前应激（PS)诱导抑郁样子代大鼠大脑海马磷酸化蛋白质和代谢产物的基本特征，为儿童抑郁研究提供分子机理。

方法本研究将怀孕母鼠随机分为对照组（n=8)和P S组（n=8),P S组在妊娠第14~20d接受慢性束缚应激，使用糖水偏好实验（SPT)对45只出生后30 d的雄性子代大鼠进行P S易感性（PS~S)筛选；进一步随机选取PS~S组和对照组各8 只，采用旷场实验（OFT)、强迫游泳实验（FST)、悬尾实验（TST)评价P S模型的有效性；应用串联质谱标签（TM T)标记的磷酸化蛋白质组学和基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术的非靶向代谢组学，定量分析P S组和对照组子代大鼠之间磷酸化蛋白质和代谢产物的差异。

结果与对照组相比，PS~S子代大鼠在O F T的穿越总格数、中心格数、直立次数和在中央格内的停留时间显著减少（《值分别为14.70、6.396、9.058、14.27,尸<0.05)，在？8丁和丁5丁中的不动时间显著延长（《值分别为17. 70、8. 751，P<0. 05);本研究结果显示PS~S组和对照组之间存在197个显著差异磷酸化肽段（140个丰度升高，57个丰度降低），80个显著差异代谢产物（55个水平升高，25个水平降低）；不同的磷酸化肽段和代谢产物之间存在相关性；联合分析结果表明，差异修饰蛋白和代谢产物共同参与了胆碱能突触、甘油磷脂代谢、长时程增强等通路。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

抑郁模型大鼠海马内环境的研究
发表时间：2011-07-13T16:28:59.267Z 来源：《中外健康文摘》2011年第16期供稿作者：郑晓霓1 单德红2 [导读] 海马神经元所处的细胞外液属于机体内环境，其成分和理化特性相对稳定是神经元发挥功能的前提。

郑晓霓1 单德红2
（1辽宁省沈阳市沈和区第二中医院110015；2辽宁省沈阳市中医药大学基础医学院110032）【中图分类号】R74【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2011)16-0144-02 【摘要】目的研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用。

方法20只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组。

ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇，光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化，免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达。

结果与对照组比较，模型组皮质醇水平显著升高，雌二醇水平明显下降，海马CA3区神经元损伤严重，脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低。

结论抑郁状态下，海马内环境稳态被破坏。

【关键词】抑郁症海马内环境稳态脑源性神经生长因子血管内皮生长因子【Abstract】 Objective: To study the action of hippocampal internal enviroment in deprssion. Methods: 20 femal wistar rats were divided into the control, model group. Serum cortisol and estradiol were measured with ELISA. Hippocampal CA3 morphology were observed by light and electron miroscope. BDNF and VEGF expressions were detected by immunohistochemistry. Results: compared with those in the control, in the model group, the serum cortisol level increased obviously, serum estradiol level decreased significantly, and the CA3 neurons had severious structure damage, and the expressions of BDNF and VEGF decreased markedly. Conclusion: The homeostasis of hippocampal internal enviroment is disrupted in depression. 【Key words】 depression hippocampal internal enviroment homeostasis brain-derived neurotrophtic factor vascular endothelial growth factor
海马内环境指海马神经元的细胞外液，其理化性质和各种成分应保持相对稳定的状态，即稳态。

海马内环境的理化特性包括温度、渗透压、酸碱度等，成分有各种离子、激素、递质、细胞因子等。

海马内环境稳太破坏均会损伤海马功能和结构，进而影响行为、情绪和内脏功能。

现代医学认为海马损伤在抑郁症发病中起重要作用[1-2]，但抑郁状态下，海马内环境出现何种变化目前尚没有系统研究，这就是本课题的研究目标，而本文主要对海马内环境中相关成分进行初步观察。

1 材料和方法
1.1实验动物的选取和分组健康Wistar雌性大鼠，清洁级，体重226±20g,中国医科大学动物实验中心提供，合格证号：医大动物合格证SCXK(辽)2008-0005。

适应性饲养1周后，选择行为学得分相近的20只大鼠，随机分为对照组、抑郁症模型组（模型组），每组10只。

室温20℃～25℃，湿度40%～50%。

1.2抑郁症模型的建立模型组大鼠建立慢性不可预见性应激模型，即在21d内随机施加电击足底（36V交流电，5min）、冰水游泳（4℃,5min）、摇晃（1min）、夹尾（1min）、禁水（24h）、禁食(24h)等刺激，每种刺激4次。

1.3血清雌二醇和皮质醇检测在实验的d22，2组大鼠均腹腔注射20%氨基甲酸乙酯（0.4mL/100g）麻醉后，腹主动脉取血，离心后取血清，低温冻存。

采用ELISA方法检测皮质醇和雌二醇(Estradiol，E2)，此项工作由沈阳军区总医院内分泌实验室完成。

1.4海马组织学观察首先是HE染色：取完成1.3后2只大鼠，立即断头取双侧海马，置于10%甲醛中固定，石蜡切片，HE染色，观察海马CA3区神经元的形态学变化。

其次电镜观察：取完成1.3后的2只大鼠，升主动脉插管，150ml生理盐水快速冲去血液，快速灌入4℃
2.5%戊二醛固定液，取双侧海马，修块，再于戊二醛中固定2h，PBS反复清洗后，再经1%锇酸固定2h，双蒸水冲洗，梯度乙醇脱水，临界点干燥，离子溅射真空渡膜，扫描电镜下观察超微结构。

1.5脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达取完成1.3的6只大鼠开胸，升主动脉插管，生理盐水快速冲去血液，取双侧海马，4%多聚甲醛固定4～6h，30%蔗糖溶液沉底。

做海马石蜡冠状切片，片厚25μm，隔4片取1片，采用免疫组化SABC法检测脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophtic factor，BDNF)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor ,VEGF)表达，相关抗体和试剂盒均购于武汉博±德试剂公司，阴性对照选用PBS。

利用BI-2000医学图像分析系统，测定海马CA3区BDNF和VEGF表达的平均灰度值。

1.6数据处理数据以x-±s表示，采用SPSS13.0中ANOVA检验进行统计学处理。

2 实验结果
实验过程中没有实验动物死亡及脱失现象。

2.1海马形态学变化
光镜下，对照组CA3区有大量致密锥体细胞，排列整齐，细胞完整，边缘清晰；模型组细胞层次减少、稀疏、排列紊乱，大量细胞坏死。

电镜下，对照组细胞器丰富，轮廓清晰，细胞核呈圆形，核膜清晰光滑完整，核染色质分布均匀；模型组细胞器减少，线粒体空泡化，细胞核变小，不规则，且核膜增厚，核周电子密度降低。

2.2海马内环境相关成分变化
与对照组比较，模型组皮质醇显著升高，E2明显下降。

BDNF和VEGF免疫阳性反应产物呈棕黄色，前者分布神经元胞浆内，后者主要分布于血管内皮细胞内。

对照组BDNF和VEGF表达较多，模型组较少，二者灰度值均升高。

具体数据见表1。

表1 各组海马内环境相关成分的变化
注：与对照组比较：a P<0.05, b P<0.01
3 讨论
海马作为边缘系统的重要结构，具有形成学习记忆和协调行为、情绪和内脏活动等的重要功能。

近年来，海马在抑郁症的作用备受关注。

影像学研究观察到抑郁症患者的海马结构出现萎缩，且与病程有关［3］。

众多动物实验也证实，海马损伤是抑郁模型动物的共同表现，这在本实验中也得到了验证，如海马CA3区出现细胞层次减少、细胞损伤、细胞器破坏等。

海马神经元所处的细胞外液属于机体内环境，其成分和理化特性相对稳定是神经元发挥功能的前提。

在海马内环境成分中，有些能够保护神经元，有些则起破坏作用。

生理水平的皮质醇不会损伤海马，但高浓度皮质醇则有明显损伤作用。

雌激素与皮质醇相反，具有神经元保护作用。

本实验没有通过微透析技术检测脑灌流液中的皮质醇和E2水平，其原因是二者均为类固醇激素，能够自由通过血脑屏障，血清水平与脑内浓度基本一致。

实验观察到，模型组血清中皮质醇水平显著升高、E2则明显下降，这些变化表明抑郁状态下，皮质醇过度分泌，E2则分泌减少，提示在激素方面海马神经元失去了保护。

BDNF和VEGF均为保护海马的细胞因子，对神经元具有营养和支持作用。

本实验采用免疫组化技术检测到，模型组二者表达均下降，提示抑郁状态下，海马神经元失去了营养性细胞因子的营养和支持作用。

上述实验结果提示，抑郁状态下，海马神经元的保护成分减少，破坏因素增加，即海马内环境稳态被破坏，从而导致海马损伤，因此恢复海马内环境稳态是防治抑郁症的重要环节。

参考文献
[1]Anja Urbach, Christoph Redecker, and Otto W. Witte. Induction of Neurogenesis in the Adult Dentate Gyrus by Cortical Spreading Depression [J]. Stroke,2008,39:3064-3072.
[2] Tarique D. Perera, Sungshic Park, Yelena Nemirovskaya. Cognitive Role of Neurogenesis in Depression and Antidepressant Treatment[J]. Neuroscientist,2008,14(8):326-338.
[3]汤艳清,谢光荣.抑郁症的脑结构影像学改变及其机制的研究进展[J].中国临床心理学杂志,2005,13（3）:366-369.。