白细胞检验的基本方法
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第八章
白细胞检验的基本方法
主要内容
一、白细胞功能检验 二、白细胞代谢及其产物检验 三、白细胞动力学检验 四、白细胞免疫标记及血清粒细胞抗体检测
白细胞分类
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞 T细胞
白细胞
淋巴细胞
B细胞 NK细胞
单核-巨噬细胞
白细胞检验：运用细胞生物学、免疫学及核医学的相关技 术对白细胞的功能、代谢及其动力学进行的检验。
二、白色念珠菌法
第一节
吞噬功能试验
一、墨汁吞噬试验
【原理】 血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异 物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加入一 定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞 噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考值】 成熟中性粒细胞吞噬率74％±15％，吞 噬指数 126±60；成熟单核细胞吞噬率 95％±15％， 吞噬指数313 ±86。
第一节
【临床评价】 吞噬与杀菌功能缺陷常见于慢性肉芽肿、肌动蛋白功 能不全、膜糖蛋白缺陷、G6PD高度缺陷等，对白念的吞 噬和杀伤缺陷也见于严重感染和恶性肿瘤。
第一节
【参考值】
吞噬百分率（62.77±1.38）％
吞噬指数1.058±0.049 【临床评价】 l.吞噬细胞吞噬功能低下主要见于各种恶性肿瘤，吞噬 率常低于45％，手术切除好转后可以上升，故可作为肿瘤 病人化疗、放疗、免疫治疗疗效的参考指标。
2.一些免疫功能低下的病人，吞噬率降低，可作为预测 感染发生的概率。并观测疗效、判断预后的指标。
第一节
M5骨髓象的墨汁吞噬试验
第一节
二、细菌吞噬试验 【原理】 分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬 而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一 定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中 性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可 反映吞噬细胞的吞噬功能。
第一节
【参考值】 1.吞噬率（％）= 吞噬细菌的细胞数／200个（中性 粒细胞）X 100％；正常人为 62.8％±1.4％
白细胞功能检验：主要着眼于白细胞吞噬功能、趋化作用 及杀菌作用的检验。基于细胞水平。
白细胞动力学检验：从细胞增殖周期动力学和细胞生长期 动力学两部分对细胞进行的检验。
第一节
第一节 白细胞功能检验
吞噬功能试验 一、墨汁吞噬试验 二、细菌吞噬试验 三、吞噬细胞吞噬功能试验
白细胞趋化性试验
杀菌能力试验 一、硝基四氮唑蓝还原试验
第一节
三、吞噬细胞吞噬功能试验 【原理】 活体巨噬细胞、单核细胞在体内外均有吞 噬细菌、异物的功能，在体外将细胞与异体细胞或细菌 混合孵育后，染色观测其吞噬异体细胞或细菌的数量， 可了解其吞噬功能。利用中药斑螫 （shi） 在人的前臂皮肤 上发疱，造成非感染性炎症，诱使单核细胞游出血管大 量聚集于疱液内，抽取疱液则成为天然提纯的吞噬细胞 悬液。以鸡红细胞为靶细胞，在体外370C条件下观察吞 噬细胞对鸡红细胞的吞噬消化活性，取试管内的细胞进 行涂片染色和镜检并计算吞噬百分率和吞噬指数。
2.吞噬指数＝ 200个中性粒细胞吞噬细菌总数／200 个（中性粒细胞）；正常人为1.06±0.05
第一节
【临床评价】 吞噬细胞分大吞噬细胞和小吞噬细胞两大类。前者 包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后 者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞 噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞 吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中 性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。
第一节
杀菌能力试验
一、硝基四氮唑蓝还原试验
【原理】 硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶 性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性粒细胞后，有产生过氧 化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖 -6- 磷 酸在已糖磷酸旁路代谢中 NADPH氧化脱下的氢，而被还 原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆 内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百 分比。 【参考值】 正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10 ％以上中性粒细胞能还原 NBT ，即为 NBT 还原试验阳 性；低于10％则为阴性。
第一节
【临床评价】 粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和 成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳 性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2）、 急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼 稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒 - 单核细 胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白 血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。
第一节 二、白色念珠菌法 【原理】 白色念珠菌法是将白细胞与白色念珠菌共育 后，加入亚甲蓝染液做活体染色，观察白细胞对白色念珠 菌的吞噬情况。活菌不着色，被杀死的染成蓝色。 计数100中性粒细胞中吞噬有白色念珠菌的细胞数即 为吞噬率;计数100个中性粒细胞中吞噬有被染蓝色的白色 念珠菌的细胞数即为杀菌率。 【参考值】 吞噬率：0.910±0.058 杀菌率：0.327±0.078
第一节
白细胞趋化性试验 【原理】 在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因 子（细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体 粒细胞经滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。 【参考值】 趋化指数 3 .0－3. 5
第一节
【临床评价】 趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是 观察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋 化功能异常可见于幼年型牙周炎、糖尿病、烧伤、新生 儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、高IgE综合征、先天 性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、 肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi（切东）综合征。
第一节
来自百度文库【临床评价】
1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助 诊断儿童慢性肉芽肿。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓 过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，硝基四氮唑蓝（NBT） 还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4. 无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5 ．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴 肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。
白细胞检验的基本方法
主要内容
一、白细胞功能检验 二、白细胞代谢及其产物检验 三、白细胞动力学检验 四、白细胞免疫标记及血清粒细胞抗体检测
白细胞分类
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞 T细胞
白细胞
淋巴细胞
B细胞 NK细胞
单核-巨噬细胞
白细胞检验：运用细胞生物学、免疫学及核医学的相关技 术对白细胞的功能、代谢及其动力学进行的检验。
二、白色念珠菌法
第一节
吞噬功能试验
一、墨汁吞噬试验
【原理】 血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异 物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加入一 定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞 噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考值】 成熟中性粒细胞吞噬率74％±15％，吞 噬指数 126±60；成熟单核细胞吞噬率 95％±15％， 吞噬指数313 ±86。
第一节
【临床评价】 吞噬与杀菌功能缺陷常见于慢性肉芽肿、肌动蛋白功 能不全、膜糖蛋白缺陷、G6PD高度缺陷等，对白念的吞 噬和杀伤缺陷也见于严重感染和恶性肿瘤。
第一节
【参考值】
吞噬百分率（62.77±1.38）％
吞噬指数1.058±0.049 【临床评价】 l.吞噬细胞吞噬功能低下主要见于各种恶性肿瘤，吞噬 率常低于45％，手术切除好转后可以上升，故可作为肿瘤 病人化疗、放疗、免疫治疗疗效的参考指标。
2.一些免疫功能低下的病人，吞噬率降低，可作为预测 感染发生的概率。并观测疗效、判断预后的指标。
第一节
M5骨髓象的墨汁吞噬试验
第一节
二、细菌吞噬试验 【原理】 分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬 而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一 定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中 性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可 反映吞噬细胞的吞噬功能。
第一节
【参考值】 1.吞噬率（％）= 吞噬细菌的细胞数／200个（中性 粒细胞）X 100％；正常人为 62.8％±1.4％
白细胞功能检验：主要着眼于白细胞吞噬功能、趋化作用 及杀菌作用的检验。基于细胞水平。
白细胞动力学检验：从细胞增殖周期动力学和细胞生长期 动力学两部分对细胞进行的检验。
第一节
第一节 白细胞功能检验
吞噬功能试验 一、墨汁吞噬试验 二、细菌吞噬试验 三、吞噬细胞吞噬功能试验
白细胞趋化性试验
杀菌能力试验 一、硝基四氮唑蓝还原试验
第一节
三、吞噬细胞吞噬功能试验 【原理】 活体巨噬细胞、单核细胞在体内外均有吞 噬细菌、异物的功能，在体外将细胞与异体细胞或细菌 混合孵育后，染色观测其吞噬异体细胞或细菌的数量， 可了解其吞噬功能。利用中药斑螫 （shi） 在人的前臂皮肤 上发疱，造成非感染性炎症，诱使单核细胞游出血管大 量聚集于疱液内，抽取疱液则成为天然提纯的吞噬细胞 悬液。以鸡红细胞为靶细胞，在体外370C条件下观察吞 噬细胞对鸡红细胞的吞噬消化活性，取试管内的细胞进 行涂片染色和镜检并计算吞噬百分率和吞噬指数。
2.吞噬指数＝ 200个中性粒细胞吞噬细菌总数／200 个（中性粒细胞）；正常人为1.06±0.05
第一节
【临床评价】 吞噬细胞分大吞噬细胞和小吞噬细胞两大类。前者 包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后 者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞 噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞 吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中 性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。
第一节
杀菌能力试验
一、硝基四氮唑蓝还原试验
【原理】 硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶 性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性粒细胞后，有产生过氧 化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖 -6- 磷 酸在已糖磷酸旁路代谢中 NADPH氧化脱下的氢，而被还 原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆 内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百 分比。 【参考值】 正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10 ％以上中性粒细胞能还原 NBT ，即为 NBT 还原试验阳 性；低于10％则为阴性。
第一节
【临床评价】 粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和 成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳 性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2）、 急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼 稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒 - 单核细 胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白 血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。
第一节 二、白色念珠菌法 【原理】 白色念珠菌法是将白细胞与白色念珠菌共育 后，加入亚甲蓝染液做活体染色，观察白细胞对白色念珠 菌的吞噬情况。活菌不着色，被杀死的染成蓝色。 计数100中性粒细胞中吞噬有白色念珠菌的细胞数即 为吞噬率;计数100个中性粒细胞中吞噬有被染蓝色的白色 念珠菌的细胞数即为杀菌率。 【参考值】 吞噬率：0.910±0.058 杀菌率：0.327±0.078
第一节
白细胞趋化性试验 【原理】 在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因 子（细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体 粒细胞经滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。 【参考值】 趋化指数 3 .0－3. 5
第一节
【临床评价】 趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是 观察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋 化功能异常可见于幼年型牙周炎、糖尿病、烧伤、新生 儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、高IgE综合征、先天 性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、 肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi（切东）综合征。
第一节
来自百度文库【临床评价】
1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助 诊断儿童慢性肉芽肿。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓 过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，硝基四氮唑蓝（NBT） 还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4. 无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5 ．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴 肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。