白细胞检验的基本方法

2.吞噬指数＝ 200个中性粒细胞吞噬细菌总数／200 个（中性粒细胞）；正常人为1.06±0.05
第一节
【临床评价】 吞噬细胞分大吞噬细胞和小吞噬细胞两大类。前者 包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后 者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞 噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞 吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中 性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。
第一节
【临床评价】
1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助 诊断儿童慢性肉芽肿。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓 过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，硝基四氮唑蓝（NBT） 还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4. 无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5 ．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴 肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。
第八章
白细胞检验的基本方法
主要内容
一、白细胞功能检验 二、白细胞代谢及其产物检验 三、白细胞动力学检验 四、白细胞免疫标记及血清粒细胞抗体检测
白细胞分类
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞 T细胞
白细胞
淋巴细胞
B细胞 NK细胞
单核-巨噬细胞
白细胞检验：运用细胞生物学、免疫学及核医学的相关技 术对白细胞的功能、代谢及其动力学进行的检验。
第一节
【临床评价】 粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和 成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳 性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2）、 急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼 稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒 - 单核细 胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白 血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。
白细胞功能检验：主要着眼于白细胞吞噬功能、趋化作用 及杀菌作用的检验。基于细胞水平。
白细胞动力学检验：从细胞增殖周期动力学和细胞生长期 动力学两部分对细胞进行的检验。
第一节
第一节 白细胞功能检验
吞噬功能试验 一、墨汁吞噬试验 二、细菌吞噬试验 三、吞噬细胞吞噬功能试验
白细胞趋化性试验
杀菌能力试验 一、硝基四氮唑蓝还原试验
第一节
【临床评价】 吞噬与杀菌功能缺陷常见于慢性肉芽肿、肌动蛋白功 能不全、膜糖蛋白缺陷、G6PD高度缺陷等，对白念的吞 噬和杀伤缺陷也见于严重感染和恶性肿瘤。
第一节
三、吞噬细胞吞噬功能试验 【原理】 活体巨噬细胞、单核细胞在体内外均有吞 噬细菌、异物的功能，在体外将细胞与异体细胞或细菌 混合孵育后，染色观测其吞噬异体细胞或细菌的数量， 可了解其吞噬功能。利用中药斑螫 （shi） 在人的前臂皮肤 上发疱，造成非感染性炎症，诱使单核细胞游出血管大 量聚集于疱液内，抽取疱液则成为天然提纯的吞噬细胞 悬液。以鸡红细胞为靶细胞，在体外370C条件下观察吞 噬细胞对鸡红细胞的吞噬消化活性，取试管内的细胞进 行涂片染色和镜检并计算吞噬百分率和吞噬指数。
二、白色念珠菌法
第一节
吞噬功能试验
一、墨汁吞噬试验
【原理】 血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异 物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加入一 定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞 噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考值】 成熟中性粒细胞吞噬率74％±15％，吞 噬指数 126±60；成熟单核细胞吞噬率 95％±15％， 吞噬指数313 ±86。
第一节
白细胞趋化性试验 【原理】 在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因 子（细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体 粒细胞经滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。 【参考值】 趋化指数 3 .0－3. 5
第一节
【临床评价】 趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是 观察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋 化功能异常可见于幼年型牙周炎、糖尿病、烧伤、新生 儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、高IgE综合征、先天 性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、 肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi（一、硝基四氮唑蓝还原试验
【原理】 硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶 性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性粒细胞后，有产生过氧 化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖 -6- 磷 酸在已糖磷酸旁路代谢中 NADPH氧化脱下的氢，而被还 原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆 内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百 分比。 【参考值】 正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10 ％以上中性粒细胞能还原 NBT ，即为 NBT 还原试验阳 性；低于10％则为阴性。
第一节
M5骨髓象的墨汁吞噬试验
第一节
二、细菌吞噬试验 【原理】 分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬 而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一 定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中 性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可 反映吞噬细胞的吞噬功能。
第一节
【参考值】 1.吞噬率（％）= 吞噬细菌的细胞数／200个（中性 粒细胞）X 100％；正常人为 62.8％±1.4％
第一节
【参考值】
吞噬百分率（62.77±1.38）％
吞噬指数1.058±0.049 【临床评价】 l.吞噬细胞吞噬功能低下主要见于各种恶性肿瘤，吞噬 率常低于45％，手术切除好转后可以上升，故可作为肿瘤 病人化疗、放疗、免疫治疗疗效的参考指标。
2.一些免疫功能低下的病人，吞噬率降低，可作为预测 感染发生的概率。并观测疗效、判断预后的指标。
第一节 二、白色念珠菌法 【原理】 白色念珠菌法是将白细胞与白色念珠菌共育 后，加入亚甲蓝染液做活体染色，观察白细胞对白色念珠 菌的吞噬情况。活菌不着色，被杀死的染成蓝色。 计数100中性粒细胞中吞噬有白色念珠菌的细胞数即 为吞噬率;计数100个中性粒细胞中吞噬有被染蓝色的白色 念珠菌的细胞数即为杀菌率。 【参考值】 吞噬率：0.910±0.058 杀菌率：0.327±0.078