Nrf2-Keap1抗氧化系统与肝脏疾病

研究生课程论文（作业）封面（2014 至2015 学年度第1 学期）

课程名称：兽医内科学专题

课程编号：206332

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年级：2014级

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提交日期：2014年11月25日

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东北农业大学研究生部制

Nrf2-Keap1抗氧化系统与肝脏疾病

（东北农业大学动物医学院，黑龙江哈尔滨150030）

摘要

氧化应激与肝脏疾病关系密切。Nrf2-Keap1是细胞抵御氧化应激的一个重要调控系统，可诱导抗氧化酶及Ⅱ相解毒酶的表达，清除活性氧族，减轻细胞凋亡，本文对Nrf2-Keap1抗氧化系统进行概述，探讨其与肝脏疾病的联系。

关键词：Nrf2-Keap1；氧化应激；肝脏

Nrf2-Keap1 Antioxidant System and Liver Disease （College of veterinanry Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China）

Abstract

Oxidative stress and liver disease are closely related. Nrf2-Keap1 is an important regulatory system cells against oxidative stress, and can induce the expression of phaseⅡdetoxifying enzymes, scavenging reactive oxygen species, reducing apoptosis, This article mainly reviewed Nrf2-Keap1 antioxidant system, discussing its links with liver disease.

Key words: Nrf2-Keap1; oxidative stress; liver

引言

Nrf2是一个由氧化应激介导的转录因子，伴随一系列下游目的基因以保护细胞。有研究表明Nrf2-Keap1抗氧化系统能增加肝脏抵抗氧化应激的能力[1]。

1 Nrf2的概述

Nrf2首次从人类白血病细胞系（K562）的互补DNA文库中克隆出来，属于帽和领（Cap'n'Collar，CNC）转录因子家族成员，是一个由2.2kb的碱基对编码的相对分子质量为66000的蛋白质。Nrf2基因区域含有6个功能区，分别被命名为Nehl-6，Keap1是其特异性受体，正常情况下Nrf2作用被Keapl抑制，在氧化应激等情况下与Keapl解离被激活，Nehl 区中有一个亮氨酸拉链结构bZIP，bZIP与小Maf蛋白（small Mafproteins，包括MafG、MafK、MafF）形成异二聚体，识别抗氧化反应元件（ARE）上DNA基序（GCTGAGTCA）并与之结合，启动ARE调控的第Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶基因表达，增加细胞对氧化应激和亲电子化学物质的抗性[2-6]。

2 Keap1的概述

Keap1即Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1，也被称作INrf2。Keapl最初描述在胞质中锚定于肌动蛋白，对Nrf2起着重要的负调节作用。在生理状态下，Nrf2的N末端上Neh2结构与Keap1的C末端上Kelch重复区域结合，铆合在肌动蛋白细胞骨架上。Keap1有三个主要的区，N末端BTB区、一个连接片段（IVR）以及C末端肌动蛋白结合区（DGR）。Keap1的N末端，与其他BTB家族蛋白相似，是Cullin依赖性E3泛素连接酶的作用底物，可致使Nrf2泛素化并最终被Cullin依赖性E3泛素连接酶降解，所以BTB域是Cul3/Rbx1诱导Nrf2降解时的中间接合物[7]。Keap1的C末端DGR区，对铆定Nrf2起重要作用[8]。

3 Nrf2与Keap1的相互作用

Keap1在哺乳动物细胞中以同源二聚体形式存在，并以这种形式与一个单分子Nrf2结合。对于Nrf2与Keap1的结合，近来的研究提出了一个“铰链与门闩（hinge and latch）”的相互作用理论。实验研究发现，Nrf2上Neh2域中存在2个不同的Keap1结合位点，即保守的29DLG31和79ETGE83基序，其可与Keap1上DGR域中一个独立重叠的部位紧密结合，从而保证泛素的有效转移和Nrf2被蛋白酶体降解；在正常情况下，Keap1与高亲和力的ETGE 基序结合后，可使Nrf2相对自由地移动，类似于“铰链”，而同时与低亲和力的DLG域结合后，严格限制了Nrf2使其靶赖氨酸处于与泛素结合的最佳位置，类似于“门闩”；而在化学/

氧化应激条件下，由于Keap1失去与DLG的“门闩”式结合，导致Nrf2泛素化受阻，且同时因Nrf2上靶赖氨酸的位置出现偏差，Nrf2不再能被蛋白酶体降解，但可能由于ETGE的“铰链”式连接仍存在，致使Keap1与Nrf2的结合处于饱和状态，任何新合成的Nrf2得以在细胞核蓄积，并激活细胞保护性基因，从而对细胞应激起解毒作用。

3.1 Keap1上的氨基酸残基

大量研究数据表明，Keap1上某些确定的半胱氨酸残基可能是诱导Nrf2和细胞保护性酶等亲电子化合物的靶标。靶标定点突变实验显示，Keap1上Cys-151、-273和-288对Keap1功能发挥起至关重要的作用，这些半胱氨酸残基也可能就是Nrf2等亲电子诱导剂的靶标，其中，Cys-151位于Keap1的BTB域，在化学或氧化应激条件下，可使Nrf2的抑制和泛素化减少，是诱导Nrf2从Keap1中释放的关键靶位，而Cys-273和-288处于Keap1上半胱氨酸丰富的插入区（IVR），在生理条件下其抑制Keap1活性的作用十分必要，在Keap1上Cys-273和-288发生突变的细胞中，Nrf2活化分子的反应性降低或消除[9]。此外，新近的研究发现，Keap1上还有其他靶位的作用也可将Nrf2从抑制中解除而激活。例如，Keap1对Nrf2的抑制作用还依赖于其是否能形成二聚体，Keap1上104位保守的丝氨酸残基（Ser-104）在二聚化过程中起重要作用，其突变将导致Keap1二聚体的解离和Nrf2的释放；而Keap1上141位酪氨酸（Tyr-141）的磷酸化和脱磷酸化也能调节Keap1的稳定性和降解，Tyr-141的磷酸化是Keap1维持稳定所必需的，Tyr-141的脱磷酸化则会导致Nrf2的释放。

3.2 Nrf2的磷酸化

半胱氨酸残基的存在是Nrf2活化分子的一个共同特征，而磷酸化信号传导通路的激活也可能刺激Nrf2依赖性细胞防御，如可促进蛋白高度磷酸化的蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸在HepG2细胞中能刺激Nrf2的核蓄积和ARE受体转基因的激活[10]。许多研究显示，作为对Nrf2功能的一个调节性影响，磷酸化过程可通过药理上抑制特异性蛋白激酶而起作用，这将减弱Nrf2被已知的活性分子的诱导；抑制一条蛋白激酶通路确实对多种细胞信号传导过程有显著影响，并可能影响Nrf2信号传导通路的完整性[11]。而另有研究显示，蛋白激酶C(protein kinaseC，PKC)、细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）、PKR样内质网激酶（protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase，PERK）、磷脂酰肌醇3激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）等的磷酸化作用会促进Nrf2和Keap1的解离[12]。目前，研究得比较透彻的是，PKC致使Nrf2上Neh2域的Ser-40磷酸化，能导致Nrf2与Keap1的解离；Nrf2的翻译后修饰也会诱导激活ARE[13]。但最近有实验研究表明，酪氨酸

激酶Fyn致使Nrf2上Tyr-568磷酸化后，可使Nrf2从核中移出[14]。因此，Nrf2的磷酸化过程可能是其激活和失活的一个重要信号传导事件，可分别促进Nrf2的核蓄积和从细胞核中移出。

4 Nrf2-Keap1在肝损伤和肝病中的作用

肝脏是机体的主要代谢器官。作为代谢的第一站，肝脏通常暴露在较高浓度的外源物和其他化学物质下，因此肝脏具备一系列抗氧化机制，能够清除自由基，维持体内自由基的代谢平衡。尽管如此，但是由于肝脏所处的位置与功能，它仍易受到中间活性物质引起的氧化损伤。氧化应激主要通过启动膜脂质过氧化来改变生物膜功能、与生物大分子共价结合及破坏机体内酶的活性等，在细胞因子（如TNF-α，NF-κB）的共同作用下引起不同程度的肝损伤[15-16]，这是动物健康的一个巨大困境。Nrf2-Keap1抗氧化系统，调控抗氧化酶基因的转录活性，包括醌氧化还原酶（NADPH），谷胱甘肽-S-转移酶（GST）、谷氨酸半胱氨酸连接酶（GCLC and GCLM）、谷胱甘肽（GSH）等。这些酶能够保护肝脏免受中间活性物质引起的氧化损伤[17-19]。所以Nrf2-Keap1抗氧化系统涉及肝脏的各个领域，如调节肝脏的代谢、解毒及促进肝细胞再生，在肝损伤、脂肪肝、肝纤维化及肝癌等方面也具有保护作用。

在肝脏代谢方面，运载体是肝脏对药物和环境化学毒物解毒的完整组件，Nrf2可调控运载体的表达，肝脏的Nrf2-Keap1抗氧化系统通过Ⅱ相解毒酶和运载体调节代谢和转运过程来参与药物、胆固醇、糖的代谢及解毒。如Nrf2缺失小鼠使扑热息痛的葡萄糖酸化降低，导致N-乙酰-对-苯醌亚胺（NAPQ1）和肝毒性的增加，激活的Nrf2通过Nqo1及经由运载体多药耐药相关蛋白3（Mrp3）增加对扑热息痛葡萄糖苷酸化代谢产物的排除来促进NAPQ1的解毒[20]。Nrf2缺失小鼠能抵制胆结石的形成，Nrf2在肝脏对胆固醇的摄取、代谢及排泄方面有一定的影响[21-22]。在链唑霉素诱导的小鼠1型糖尿病中，Nrf2缺陷小鼠肝脏糖异生葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸丙酮酸羧基激酶的mRNA增加并且糖酵解丙酮酸激酶的mRNA减少，所以导致小鼠高血糖和尿排出量增加。楤木属根的乙醇抽提物对叔丁基-过氧化氢（t-BHP）所致的肝毒性的保护作用是经由Nrf2信号途径的抗氧化酶HO-1。

Nrf2是肝癌的重要调节剂，Nrf2调整的抗氧化酶及解毒酶的基因多态性与肝癌的发生密切相关。HBV的慢性感染和饮食中摄入黄曲霉素可增加肝细胞癌的发生率，虽然乙型肝炎疫苗及减少食物储存过程中被黄曲霉素污染的措施已广泛采用，然而完全排除黄曲霉素污染是不可能的。所以用化学预防措施对黄曲霉素进行生理处理来降低肝细胞癌的发生率很关键。在上海，科学家正在研究饮用红茶以激活Nrf2的活性来预防黄曲霉素-B1诱导的肝癌。

对啮齿类动物及临床研究发现：Nrf2-Keap1-ARE信号诱导物能增加细胞保护酶的表达，能有效地调节体内黄曲霉素的处理，有效地降低肝细胞癌的发生。

5 结论

Nrf2-Keap1系统是抵抗各种环境应激和内源性应激防御机制中必不可少的部分，被认为是最重要的抗氧化系统，受到越来越多的关注。Nrf2-Keap1系统对于动物肝脏疾病的预防和治疗是一个重要的目标，有望为动物肝脏疾病的防治提供新的思路。

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抗氧化实验方法

1还原力的测定样品2ml加到2ml 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.6）和2ml 1%的铁氰化钾溶液的混合液中。混合物在50℃保温20min，然后在反应混合物中加入2ml 10%的TCA，混合后以3000rpm 离心10min，取上清液2ml与2ml蒸馏水以及0.4ml 0.1%氯化铁在反应试管中反应，10min 后测定其在700nm处的吸光值。吸光值越大表明还原力越强。注意：建议蛋白浓度以5mg/ml左右变化，例如2.5，5之类变化。但具体情况应根据吸光值大小而定。 0.2mol/L pH6.6的磷酸盐缓冲液的配制见附表。铁氰化钾溶液应盛装在棕色瓶中。比色皿的用法：可见光(>400nm)用玻璃比色皿（即没有标字母或者标G的比色皿），紫外光时（<400nm）用石英比色皿（即标Q字比色皿）。 2 DPPH自由基清除活性的测定将1.5ml样品液添加到1.5ml含0.1 mmol/L DPPH的95％乙醇中，混合，振荡，在室温下放置30min，然后在波长517nm处检测（Ai）。清除率计算公式为：空白为1.5 ml 95%的乙醇加入1.5 ml蒸馏水调零。式中：Ac——对照为1.5 ml DPPH溶液加上1.5 ml蒸馏水在517nm处的吸光值；Aj——1.5ml样品液加上1.5 ml 95%的乙醇在517nm处的吸光值； Ai——1.5ml样品液加上1.5 ml DPPH溶液在517nm处的吸光值；注意：建议酶解液蛋白浓度以2mg/ml 左右变化，如0.5,1,2,2.5之类变化，但是具体情况应视清除率而定，最终结果应有清除率大于50%和小于50%的情况。 DPPH样品有毒，需戴口罩和手套进行操作。而且DPPH试剂很昂贵，用时注意节约。0.1m mol/L DPPH 乙醇溶液的配制：准确称取0.00395gDPPH，用95%的乙醇溶液溶解并定容到100ml。 3 在卵黄磷脂体系中抗氧化能力的测定以卵黄脂蛋白为底物的LPO模型反应体系包括:体积比为1:25稀释的卵黄悬液(卵黄用等体积的pH7.45，0.lmol/LPBS配成，使用前磁力搅拌10min)0.2 mL、一定浓度的样品溶液0.lmL、25m moll/LFeSO4溶液0.2mL，用PBS缓冲液补足至2.0mL。对照管除不加样液外其他试剂同前。将上述2种试管同时置37℃恒温水浴锅中保温培养1h。取出后，加入20%TCA0.5mL，静置10 min后，与对照管于3500r/min离心10min，取2.0mL上清液，分别加入质量分数为0.8%硫代巴比妥酸(TBA)溶液1.0mL，加塞于100℃水浴15min，取出冷却。空白管以2.0mLPBS溶液代替，在532nm下测定吸光度，样品对卵黄脂蛋白LPO的抑制率表示为: SA(%)=(Ac一AS)/A C×100 式中:Ac一不加样品的吸光度 As一加入样品的吸光度注意：卵黄溶液不用时应放置冰箱保存。酶解液蛋白浓度以5mg/ml左右调整，但具体应视清除率大小而定，对酶解液蛋白浓度

高温胁迫对辣椒抗氧化系统的影响

高温胁迫对辣椒抗氧化系统的影响摘要：本文测定了无土栽培辣椒在高温胁迫下的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）的活性。研究了栽培品种的的抗逆性和耐热性强弱。测定了辣椒果实中的有机酸、VC、蛋白质、氨基酸的含量，为育种筛选好的育种材料。关键词：高温胁迫、抗氧化系统、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）植物抗氧化酶包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）等。它们普遍存在于植物的各种组织中，可以通过催化植物体内的活性氧，防止发生氧化反应。所以抗氧化酶活性与植物的代谢强度及逆境适应能力有密切关系，经常被用来衡量植物的抗性强弱和衰老程度。辣椒通常在高温胁迫下生长受阻，开花、结果减少，落花落果严重，严重影响产量。为了筛选出具有高温下生长良好的辣椒新品种，本文以近年来培育的辣椒新品系为实验材料，测定植株中的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）的活性，筛选抗性强的育种材料，以期建立辣椒抗性筛选技术体系。 1．材料与方法：采用辣椒的叶片测定SOD/CAT/POD含量，对应采用该品系果实测定果实中的有机酸、VC、蛋白质、氨基酸的含量。有机酸采用滴定法，VC采用2,6-二氯靛酚进行滴定法，蛋白质采用凯氏定氮法测定，氨基酸采用茚三酮比色法测定。超氧化物歧化酶（SOD）采用NBT（氮蓝四唑）法测定、过氧化氢酶（CAT）采用滴定法测定、过氧化物酶（POD）采用愈创木酚法测定。实验在阜阳市农科院生物技术研究中心测定，采用科技示范园无土栽培辣椒叶片，品种为湘研3号与塔兰多杂交F1代品系。采样时平均气温39.6℃。栽培基质为稻壳：沙子=3:1，营养液为日本山崎配方。 ------------------------------------------------------ 作者简介：李素梅，1974，助理农艺师，主要研究方向：设施栽培 2．结果与分析：本实验共测定10个品系，每个品系取10个样品，分别测定辣椒

肝损伤时的抗氧化防御机制

一、前言肝脏是人体最大的实质性器官，执行大量的新陈代谢的功能，是药物和其他异物如杀虫剂主要的代谢器官。这些功能的实行需要线粒体中很多的有氧代谢来提供足够量的三磷酸腺苷（ATP）。然而，这种代谢过程可不断产生一些氧化活性物质(reactive oxygen species，ROS)。除此之外，药物的代谢和炎症时细胞的损伤能明显地增加细胞与器官氧化应激的负担。本篇重点讨论活性氧和过氧化硝酸盐的形成，介绍不同细胞和血管腔隙中抗氧化系统，并分析肝脏中过多的氧化应激所产生的不良后果。二、活化氧和氮的中间产物氧分子可以通过一个电子的转移生成超氧化物(O2-)，过氧化氢(H2O2)，羟自由基(OH.),然后可以生成水。超氧化物不稳定，可在超氧化物歧化酶的作用下快速生成过氧化氢和单价氧分子，以及另一个ROS。然而，在一氧化氮中，超氧化物易跟一氧化氮反映，生成过（氧化）亚硝酸盐。过（氧化）亚硝酸盐生成的比率取决于一氧化氮和超氧化物（一级动力学）的浓度，这个反应倾向于扩散控制。在生物体内，由于二氧化碳和碳酸氢根的普遍存在，过（氧化）亚硝酸盐根二氧化碳快速反应，生成反应中间体，这些中间体是可以高效的氧化和硝化的物质。除此之外，过（氧化）亚硝酸盐可以经过质子化生成过氧乙酸，过氧乙酸是很强的氧化剂。过氧化氢可以与过渡态金属发生氧化还原反应，生成羟基（芬顿反应）。然而，如果吞噬细胞释放髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO)，次氯酸就会产生，次氯酸也是一种强力氧化剂。除了一些被发现的活性中间体，一些次要的自由基也可以形成，如烷基、过氧自由基和烷氧自由基。一般而言，在反应中，次要的自由基反应活性低且有更多的选择性。在机体中，这些活性氧和氮的形成和浓度的稳定取决于很多因素，包括：前体的形成率，解毒反应，酸碱度和过渡金属的可利用性。三、细胞内和血管中氧化剂的来源 1．线粒体所有的肝细胞和脉管产生的主要的初始氧化活性物质就是超氧化物和过氧化氢。细胞内一种主要的连续的超氧化物形成的来源就是：线粒体中的电子传递链。每个细胞中约有2%的氧用来产生超氧化物。即使在生理条件下，还原型辅酶I脱氢酶（复合体1）和泛醌-细胞色素b复合体（复合体3）也能释放超氧化物。研究发现，在缓慢的安静状态下，每分钟呼吸四次，线粒体中超氧化物的形成最多，话句话说，当呼吸链中的组分主要处于简化形式时，超氧化物的形成最多。当线粒体受损时，线粒体中的超氧化物可以明显增加。当超氧化物从电子传递链中释放出来时，它可以和一氧化氮反应生成过（氧化）亚硝酸盐。据推测，线粒体中包含一氧化氮合成酶(NOS)。然而，是否真的存在一氧化氮合成酶

自由基的致病和花青素在机体内抗氧化去除自由基机理

自由基的致病和花青素在机体内抗氧化去除自由基机理天然色素应用技术推广实验室aingw@https://www.360docs.net/doc/aa1651137.html, 花青素是机体内抗氧化，还原自由基的重要成分。自由基的作用及危害：自由基是一些具有不配对电子的氧分子，它们在机体内漫游，损伤任何与其接触的细胞和组织，摧毁细胞膜，导致细胞膜发生变性，使细胞不能从外部吸收营养，也排泄不出细胞内的代谢废物，并走失了对细菌和病毒的抵御能力；自由基攻击正在复制中的基因，造成基因突变诱发癌症发生；自由基激活人体的免疫系统，使人体表现出过敏反应，或出现如红斑狼疮等的自体免疫疾病；自由基作用于人体内酶系统，导致胶原蛋白酶和硬弹性蛋白酶的释放，这些酶作用于皮肤中的胶原蛋白和硬弹性蛋白并使这两种蛋白产生过度交联并降解，结果使皮肤失去弹性，出现皱纹及囊泡；类似的作用使体内毛驯血管脆性增加，使血管容易破裂，这可导致静脉曲张、水肿等与血管通透性升高有关疾病的发生；自由基侵蚀机体组织，可激发人体释放各种炎症因子，导致出各种非菌性炎症；自由基侵蚀脑细胞，使人得早老性痴呆的疾病；自由基氧化血液中的脂蛋白造成胆固醇向血管壁的沉积，引起心脏病和中风；自由基引起关节膜及关节滑液的降解，从而导致关节炎；自由基侵蚀眼睛晶状体约织引起白内障；自由基侵蚀胰脏细胞引起糖尿病。自由基破坏胶原蛋白及其它结缔组织，干扰重要的生理过程，引起细胞的DNA突变，自由基与70多种疾病有关包括心脏病、动脉硬化、静脉炎、关节炎、过敏、早老性痴呆、冠心病及癌症。

自由基和体内细胞中的有机物质发生链式反应，使得体内过氧化合物大量堆积，让细胞失去正常的生理功能，从而导致疾病的产生。花青素的发现及清除自由基的机理：1986年，法国波尔多大学的玛斯魁勒博士发现花青素(原花青素)具有强烈的自由基清除功效。花青素属于酚类化合物中的类黄酮（flavonoids）的一种，类黄酮则为水溶性色素，存在于细胞的液泡中，易受细胞内化学环境所影响，酸度、温度及其他在液泡中的新陈代谢，都会使其分子结构改变，造成颜色的变化，而能产生粉红色、红色、紫色及蓝色的颜色。花青素是迄今为止所发现的最强效的自由基清除剂，其抗自由基氧化能力是维生素C的20倍、维生素E的50倍，尤其是体内活性，更是其他抗氧化剂无法比拟的。花青素的应用范围：花青素作为一种抗氧化功能食品由于不受作为药物需有明确适应症的限制，花青素基于清除体内自由基的功效，其应用范围越来越大。目前已发现花青素对近70多种疾病具有直接或间接的预防和治疗作用。花青素在国外的应用非常广泛。作为一种抗氧化功能食品，它具有非常强大的清除自由基的能力，花青素的防病保健功效的基础就是其清除自由基的能力。另外花青素还有一些其它特点，如很好的生物利用度，易与胶原蛋白结合，稳定细胞膜以及抗酶活性（组胺脱羧酶），这些特点与抗氧化能力协作，使花青素成为一种基于清晰理论基础和严格实验结果之上的保健功能食品。

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料 ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚 Trolox 的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。b5E2RGbCb5E2RGbC
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。通过过硫酸钾（potassium persulfate）氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline6-sulfonic acid)，diammonium salt；ABTS）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基或者消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。p1EanqFDp1EanqFD
产品内容
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几种抗氧化酶的作用

一.超氧化物歧化酶(SOD): 超氧化物歧化酶，是一种新型酶制剂，是生物体重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体，如动物，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体清除自由基的首要物质。SOD在生物体的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标；现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD 的地位越来越重要！超氧化物歧化酶(SOD)按其所含金属辅基不同可分为三种，第一种是含铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称（Cu.Zn—SOD），最为常见的一种酶，呈绿色，主要存在于机体细胞浆中；第二种是含锰（Mn）金属辅基的称（Mn—SOD），呈紫色，存在于真核细胞的线粒体和原核细胞；第三种是含铁（Fe）金属辅基的称（Fe—SOD），呈黄褐色，存在于原核细胞中。 SOD是一种含有金属元素的活性蛋白酶。超氧化物岐化酶（SOD）能催化如下的反应：O2-+H+→H2O2+O2，O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。SOD 是机体天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶（POD）会立即将其分解

为完全无害的水。这样，三种酶便组成了一个完整的防氧化链条。目前，人们认为自由基（也称游离基）与绝大部分疾病以及人体的衰老有关。所谓的自由基就是当机体进行代时，能夺去氧的一个电子，这样这个氧原子就变成自由基。自由基很不稳定，它要在身体组织细胞的分子中再夺取电子来使自己配对，当细胞分子推出新一个电子后，它也变成自由基，又要去抢夺细胞膜或细胞核分子中的电子，这样又称会产生新的自由基。如，超氧化物阴离子自由基、羟自由基、氢自由基和甲基自由基，等等。在细胞由于自由基非常活泼，化学反应性极强，参与一系列的连锁反应，能引起细胞生物膜上的脂质过氧化，破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联，使体的许多酶及激素失去生物活性，机体的免疫能力、神经反射能力、运动能力等系统活力降低，同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代失常等，最终使机体发生病变。因此，自由基作为人体垃圾，能够促使某些疾病的发生和机体的衰老。虽然自由基会对机体产生诸多危害，但是在一般的条件下人体细胞也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系，它们有的属于抗氧化酶类，有的属于抗氧化剂。像SOD就是一种主要的抗氧化酶，能清除超氧化物自由基，在防御氧的毒性、抑制老年疾病以及预防衰老等方面起着重要作用。 SOD能专一地清除体有害的自由基，以解除自由基氧化体的某些组成成分而造成的机体损害。如氧中毒、急性炎症、水肿、自身免疫性疾病、辐射病等疾病都与活性氧的毒性有关。实验证明，SOD 能够清除自由基，因此可消除上述疾病的病因。此解毒反应过程是两

镉胁迫和植物抗氧化系统、营养元素相互关系的研究以及多胺的调控作用

镉胁迫和植物抗氧化系统、营养元素相互关系的研究以及多胺的调控作用重金属是全球环境最重要的污染物之一,毒性强,难降解,不仅能通过活性氧和营养胁迫等的中介作用,导致植物氧化伤害、代谢紊乱,乃至死亡,并且能通过食物链富集危害人类身体健康。因此,研究植物重金属伤害及其抗性机理,已经成为有关环境和人类健康的重要问题。多胺是一种抗氧化剂,具有调节生长发育、延缓衰老和提高植物的抗逆性等多重功能。研究多胺对重金属胁迫下植物生理生化作用的影响,可以为了解多胺缓解植物重金属伤害的机理、提高环境重金属污染的植物修复效率等提供参考依据。对镉胁迫下萝卜幼苗水培实验的研究表明,镉胁迫能使 O₂^-、H₂O₂和MDA的含量增加;抗氧化酶活性随处理所用的镉浓度和处理时间的不同而各异,在这些酶中,根系和叶片的GR活性的增加均与营养液所用镉浓度和处理时间正相关。通过营养液栽培试验,研究外源Spd对Cd²⁺胁迫下宽叶香蒲叶片和地下茎中抗氧化系统生理指标的变化、镉的亚细胞分布、以及镉和微量营养元素的吸收和转运的影响。结果表明,单一镉处理（对照组）可以增加宽叶香蒲叶片和地下茎 O₂^-、H₂O₂、MDA、GSH以及叶片AsA的含量;除叶片SOD活性下降外,叶片和地下茎中的CAT、GPX、GR和地下茎中SOD,以及叶片APX的活性都不同程度地升高。外源Spd可以进一步提高叶片和地下茎的GSH含量以及叶片AsA的含量、叶片和地下茎的GR和APX的活性

冷蒿抗氧化防御系统对机械损伤的响应机制

目录摘要 (Ⅰ) ABSTRACT (Ⅱ) 中英文缩略词表 (Ⅲ) 前言 (1) 第一章文献综述 (3) 1.1冷蒿研究现状 (4) 1.1.1冷蒿生物学特性 (4) 1.1.2冷蒿的生态效应 (4) 1.1.3冷蒿化感作用对其周围其他物种的影响 (5) 1.1.4放牧下冷蒿的响应机制 (5) 1.1.5冷蒿的抗性研究 (6) 1.2逆境与植物抗氧化保护酶系统 (6) 1.2.1逆境与活性氧的产生 (6) 1.2.2超氧化物歧化酶研究现状 (7) 1.2.3过氧化氢酶研究现状 (7) 1.2.4过氧化物酶研究现状 (7) 1.2.5抗坏血酸-谷胱甘肽循环研究现状 (8) 1.3逆境与植物生长相关物质 (9) 1.3.1逆境与蛋白质 (9) 1.3.2逆境与氨基酸 (9) 1.3.3逆境与叶绿素 (10) 1.3.4逆境与碳水化合物 (10) 第二章材料与方法 (13) 2.1采样地概况 (13) 2.2试验材料处理 (13) 2.3试验方法 (13) 2.3.1可溶性糖含量测定方法 (13) 2.3.2蛋白质含量测定方法 (14) 2.3.3叶绿素含量测定方法 (14) 2.3.4氨基酸含量测定方法 (15) 2.3.5淀粉含量测定方法 (15) 2.3.6ROS和丙二醛含量测定 (16) 2.3.7抗氧化酶活性测定 (17)

2.3.8AsA和GSH含量测定 (17) 2.3.9AsA-GSH循环相关酶活性测定 (18) 2.4数据处理 (18) 第三章不同程度机械损伤对冷蒿生长相关物质含量的影响 (19) 3.1结果与分析 (19) 3.1.1不同程度机械损伤对冷蒿葡萄糖含量的影响 (19) 3.1.2不同程度机械损伤对冷蒿蔗糖含量的影响 (20) 3.1.3不同程度机械损伤对冷蒿果糖含量的影响 (20) 3.1.4不同程度机械损伤对冷蒿淀粉含量的影响 (21) 3.1.5不同程度机械损伤对冷蒿蛋白质含量的影响 (22) 3.1.6不同程度机械损伤对冷蒿氨基酸含量的影响。 (22) 3.1.7不同程度机械损伤对冷蒿叶绿素含量的影响 (23) 3.2结论与讨论 (24) 第四章不同程度机械损伤对冷蒿抗氧化防御系统的影响 (27) 4.1结果分析 (27) 4.1.1不同程度机械损伤对冷蒿ROS和MDA含量影响 (27) 4.1.2不同程度机械损伤对冷蒿抗氧化酶活性的影响 (29) 4.1.3不同程度机械损伤对冷蒿AsA水平的影响 (29) 4.1.4不同程度机械损伤对冷蒿GSH水平的影响 (30) 4.1.5不同程度机械损伤对冷蒿AsA-GSH循环相关酶活性的影响 (30) 4.2结论与讨论 (31) 第五章冷蒿抗氧化防御系统对机械损伤的响应 (33) 5.1结果与分析 (33) 5.1.1机械损伤后冷蒿ROS和MDA含量的变化 (33) 5.1.2机械损伤后冷蒿抗氧化酶活性的变化 (34) 5.1.3机械损伤后冷蒿AsA和DHA水平的变化 (35) 5.1.4机械损伤后冷蒿GSH水平的变化 (35) 5.1.5机械损伤后冷蒿AsA-GSH循环相关酶活性的变化 (36) 5.2结论与讨论 (37) 第六章全文结论与展望 (41) 6.1全文结论 (41) 6.2展望 (39) 参考文献 (43) 个人简介 (48) 致谢 (49)

系统引导菜单自动修复工具(中文帮助文档)NTBOOTautofix v2.5.7

NTBOOTautofix v2.5.7NT系统引导菜单自动修复工具 (简繁英三语版中文帮助文档) 免责声明：本软件为免费软件，作者对使用本软件而给用户带来的任何损失不负任何责任。如不同意本免责声明，你必须立即删除本软件。 -------------------------------------------------------------------------------- 更新概述： v2.5.7：修正v2.5.6在win8中运行时把系统错认为winPE而不进行修复的BUG。 v2.5.6：修正win8部分情况下winRE不能修复的BUG，增加一种少见的系统环境的修复支持。 v2.5.5：修正v2.5.4修复后主引导菜单为英文的一个BUG。 v2.5.4：一些不常用功能的修复结果上小修改。 v2.5.2：初步支持EFI的GPT磁盘系统。 v2.5.1：更换NTLDR文件以减少软件体积，修正修复WES7系统时可能发生的一个BUG。v2.4.6：错误修正 - 修复OSLetter的一处错误；繁体高级菜单2和3位置错误 v2.4.3：增加繁体支持，添加BCD修复区域设定，增强查看/管理BCD功能 v2.2.9：增加对Win8的WinRE修复；自动修复默认禁用Win8的Metro引导界面，恢复为经典的黑白引导界面 v2.2.2：去除了以前版本在使用实例中的大部分限制，更新较多，不详述 v2.0.0：NTBOOTautofix前身为BCDautofix，版本号顺延更新，但工具名因功能改变而更换，纯修复BCD的BCDautofix最新版本为v1.2.3，BCDautofix v1.1.x已经有nt5.x的boot.ini的自动生成，应属NTBOOTautofix系列。v2.0.0是更名后的第一个版本。 -------------------------------------------------------------------------------- 使用方法： * 非安装软件，直接双击运行，傻瓜式修复，可运行于32位和64位系统和WINPE系统* "自动修复"自动判断和系统引导有关的条件并自动修复程序支持的盘符上的NT系统引导，无需用户手工干预 * "高级"只供特殊需要的朋友，参看下面应用实例中的更改活动分区盘符后修复 * 由于不少PE使用各种手段调整了系统默认盘符，程序未必准确判定活动分区，所以在PE中修复时推荐使用"高级"再选定活动分区后进行修复，如在PE中进行过调整/重分区操作，推荐重启后再使用本工具 * 默认禁用windows8的Metro引导菜单(v2.2.9开始)，如需恢复Metro引导菜单， v2.5.2的两种方法操作：方法1. “高级”，“查看/管理BCD引导配置”，管理 Windows8，把bootmenupolicy 这一行值修改为Standard - Metro引导开启（如本来为Standard则修改两次），再点击“默认”。方法2. 手动修复，只开启METRO引导并修复Windows8，其它系统跳过修复。 * Win8多系统时推荐在Win8中关闭快速启动或管理员身份运行命令提示符后执行Powercfg -h off关闭休眠以免出现引导菜单冲突 * 没关闭休眠功能时，在Win8中修复后会出现无法关机，重启一次即可

认识体内重要的抗氧化物

认识体内重要的抗氧化物当今社会，科学在不断发展，社会在不断进步，人们的生活水平在日益提高，可是也出现了许多疾病，如心脑血管病、糖尿病、肿瘤等慢性病的发病率不断增高，同时，还存在大量症状不明显的“亚健康”人群。人群健康现状警示我们：靠药物得不到长寿，换不到健康；健康重在保养，疾病重在预防。医学研究表明，许多慢性病的发生和发展与营养代谢、机体氧化、机体抗氧化能力密切相关。人体在利用氧的过程中，会因各种内因和外因而产生各种活性氧和自由基。由于自由丛电子转移过程常与“氧”有关，故自由基电子转移发生反应的过程被称为”氧化”或“过度氧化”。由于“氧化”而产生的活性氧和自由基是一种因失去一个电子而成的不对称、不稳定的原子或分子，具有很大的能量，对机体极具侵略性，它会不断攻击正常细胞组织中的脂质、蛋白质、糖类和遗传物质DNA，企图夺取一个电子以求得到重新平衡，这就造成了脂质和糖类的氧化、蛋白质的变性、酶失活、DNA正常结构的切断等种种氧化损伤。据报道，由于机体氧化损伤而引起的疾病已超过100种，在我们的生活中，过氧化现象处处可见，例如：铁锅生锈，苹果去皮后很快变黄，食用油存放过久后产生异味。而我们身体上也存在可见或不可见的过度氧化现象，如：皮肤色素色斑的形成，血管内低密度脂蛋白(LDL)氧化引起动脉粥样硬化、心脑血管疾病，细胞遗传物质DNA氧化损伤、基因突变引起恶性肿瘤以及某些自身免疫性疾病、白内障、衰老等等，均可能是从氧化损伤开始而导致的后果。人体内也有各种消除活性氧和自由基的抗氧化防御体系，维持体内“氧化与抗氧化”的平衡，但当体内抗氧化防御体系出现超负荷状态时，活性氧和自由基的形成与消除之间的平衡丧失，从而诱发各种组织损伤和疾病。例如，日常接触的一些物质(如腐败、霉变的食物、抗菌素、农药)、污染的空气、吸烟时产生的烟雾和焦油、阳光和电磁辐射，甚至运动、心理压力等都会激发活性氧和自由基的产生，引起机体的氧化损伤。因此，为了健康，人们应注意合理营养，经常摄入一些富含抗氧化营养素和植物化学物质的食物，以提高机体抗氧化能力，维护机体“氧化与抗氧化”的平衡。其中类胡萝卜素，维生素C和维生素E等是可从食物和营养补充剂中获取的重要抗氧化物。类胡萝卜素类胡萝卜素由植物合成，包括600多种化合物，如?—胡萝卜素、叶黄素、虾青素等，?—胡萝卜素是其中的典型代表类胡萝卜素以色素形式存在于自然界，约有50种在人和动物体内可转变成维生素A，发挥维生素A的生理作用，故有”维生素A原”之称。类胡萝卜素及其代谢产物有多种生物学功能，对人体健康有一定保健作用。类胡萝卜素的生理和营养作用抗氧化作用类胡萝卜素的重要化学特征之一是猝灭单线态氧。单线态氧是极易转变为自由基的氧化物，能与细胞中的许多成分相互作用产生多种过氧化物而引发氧化损伤。而类胡萝卜素可与单线态氧相互作用，生成类胡萝卜素氧化物，它可以向周围的细胞溶液释放能量，从而消除细胞内强氧化剂的毒性。类胡萝卜素能直接捕获自由基而阻断自由基的链式反应，因而防止自由基对蛋白质、脂质和DNA的氧化损伤，进而有效地预防多种疾病和癌症的发生，并具抗衰老和美容作用；研究显示，?—胡萝卜素是防止红细胞氧化老化的有效成分之一。随着?—胡萝卜素摄入量的增加，红细胞膜中?—胡萝卜素的含量也相应增加，而红细胞中过氧化脂质的含量相应降低，可帮助预防老年性痴呆患者红细胞膜的脂质过氧化。免疫调节作用人体免疫系统主要具抵御病原体的作用，主要由免疫细胞、免疫器官和免疫分子组成，

简述抗氧化和延缓衰老的区别

简述抗氧化和延缓衰老的区别在卫生部原来批准的保健功能中没有“抗氧化”，只有“延缓衰老”，在颁布新标准后，很多人以为“抗氧化”就是“延缓衰老”，而实际上，“延缓衰老”只是“抗氧化”的主要作用之一。由于化学制剂的大量使用、汽车尾气和工业生产废气的增加等，令环境污染日趋严重，自由基与日俱增;而人们每天处于电视屏幕、电脑屏幕、复印机、手机等现代化工具的大量辐射中，射线可加速细胞的氧化，使自由基在体内乱窜，加速老化。除此之外，吸烟、酗酒、运动过度、压力过大、食用过多的加工食品，过度摄取油脂等也会诱导过多自由基产生。这些骤然增加的自由基超过了生命所能正常保持平衡的标准，令人体应接不暇，皮肤可能出现皱纹、斑点等老化现象，而内脏器官与血管也会因过度氧化而产生老化与功能衰退，这是引起心脑血管疾病、高血压、糖尿病等退化性疾病的主要因素。不要以为“抗氧化”就是“延缓衰老”，而实际上，“延缓衰老”只是“抗氧化”的主要作用之一。抗氧化物的定义为“任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质”，其作用机理可以是直接作用在自由基，或是间接消耗容易生成自由基的物质，防止发生进一步反应。人体在不可避免地产生自由基的同时，也在自然产生着抵抗自由基的抗氧化物质，以抵消自由基对人体细胞的氧化攻击。研究证明，人体的抗氧化系统是一个可与免疫系统相比拟的、具有完

善和复杂的功能的系统，机体抗氧化的能力越强，就越健康，生命也越长。我们都知道，人体每天都需要能量的补充，吃的食物在体内经消化代谢，氧化产生能量。在这一过程中会产生自由基，它对酶蛋白活性有破坏作用，进而加速细胞的衰老。人体自身有抗氧化能力，这种能力来源于一种酶，这种酶可以对自由基进行分解，医学界把它称没为人体的‘清道夫‘。但是，随着年龄的增长，人体内的酶活性下降，最后体内的抗氧化能力就无力清除那些不断积蓄下来的自由基。清除自由基目前最好的方法就是用抗氧化及帮助人体提高抗氧化能力，通过提高人体抗氧化能力来降低体内自由基的积蓄。目前，抗衰老医学，普遍使用抗氧化剂类药物，来提高人体抗氧化能力来减少体内自由基的积蓄。自由基与衰老及治疗。自由基学说认为;人之所以会出现身体机能衰退，除要使体内积蓄的自由基过多。这不仅干扰了人体内其他正常细胞的代谢功能，自由基自身还能引发一系列的连锁反应。自由基是机体代谢过程中不断产生的毒性物质，并由于这种自由基的连锁反

自由基-抗氧化-营养与健康

收稿日期:2003208223 中图分类号:R 151.2 文献标识码:A 文章编号:051227955(2003)0420337207 自由基、抗氧化剂、营养素与健康的关系方允中,　杨　胜1,　伍国耀2 (北京放射医学研究所生物化学与分子生物学研究室,北京100850; 1 中国农业大学畜牧系动物营养研究室,北京100094 2 D ep a rt m en t of A n i m a l S cience and F acu lty of N u trition ,T ex as A &M U n iversity , Colleg e S ta tion ,T ax as ,U SA 77843) 超氧化物歧化酶(SOD )清除O 2?作用的新发现揭开需氧生物体内产生氧自由基的奥秘,从而诞生并发展了自由基生物学。一氧化氮(NO )的生理学作用与病理生理学作用的首次发现和随后的研究进展不仅充实了这门崭新学科的内容,而且使其发展更为迅速、蓬勃。该学科的研究范围已扩展到其它生物学科,包括营养学[1,2],如抗氧化剂已成为“热点”研究领域。对于自由基、抗氧化剂与营养,我们业已论述[3]。,现进一步提出自由基、抗氧化剂、营养素与健康的关系的初步见解。1　需氧生物体内自由基、抗氧化剂、营养物质与生命的关系从自由基的活泼化学性质可以推想,无论是生命的起源,还是生物的进化,自由基均起到很重要的作用。当地球上出现原核生物后,大气中的O 2进入原核生物体内,通过非酶反应或酶反应接受一个电子,转变为O 2?,并可衍生其它活性氧如H 2O 2。H 2O 2可在Fe 2+或Cu +等金属离子介导下产生?OH ,损伤生物膜脂质、蛋白质、DNA 等重要生物大分子,显示出“氧毒性”,从而危及原核生物的生存。在生物进化的初期,对“氧毒性”无适应能力的厌氧菌就不能在有O 2的大气中生存或者藏匿于无氧环境,但进化为耐氧厌氧菌,其菌体内有清除O 2?的SOD ,就成为“适者”而生存,并再进化为需氧菌。需氧菌内的有氧代谢中葡萄糖产生A T P 的量较无氧代谢增高到18倍,活性氧的产量也相应增加,远超过其生理作用量,但需氧菌可生物合成SOD 、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶和某些内源性抗氧化剂,清除活性氧。没有清除掉的自由基仍可损伤重要生物大分子,但机体对自由基损伤具有修复的能力。在进化的过程中需氧菌等单细胞生物还可初步利用活性氧[4]。从单细胞生物进化到多细胞生物、动物及人类一直保持着以抗氧化酶与内源性抗氧化剂为主的、并发展到有外源性抗氧化剂参加的抗氧化体系,而且对自由基所致重要生物大分子的损伤仍具有修复的能力。在进化中需氧生物利用活性氧的信号传导和调控细胞分裂、分化与基因转录、表达等功能[1]。在哺乳类等动物中还需要NO 合酶(NO syn 2thase )的酶促反应产生的NO 自由基,发挥其生理学作用[5],但受到膳食因素的影响[6]。在需氧生物体内自由基的产生、清除、利用、损伤及其修复所需物质与能量均直接或间接来源于营养物质及其代谢物[1],如人体内营养素及其代谢物是自由基产生的物质来源;清除自由基系统的成分均直接或间接来自营养素与膳食中抗氧化剂;营养状况应能维持自由基的产生与清除处于正常动态平衡,内环境处于稳定的还原态,并使活性氧与NO 的生理作用以及彼此相互作用能正常发挥[3];营养素及其代谢物与外源性抗氧化剂是自由基所致重要生物大分子损伤的修复、置换、降解代谢和重新生物合成的物质基础[1],其中谷胱甘肽(GSH )在自由基、抗氧化剂与营养素及其代谢的协调关系中起到很重要的作用[7]。为了维持生命,生物体内的某些重要物质均有其稳衡性动态(hom eo stasis )。自由基按理也不应例外,但从1966～2003年6月的M edline 数万篇有关自由基的文献中仅有十几篇提到该名词,而且未涉及其内涵。我们认为,由于自由基的活泼化学性质,其稳衡性动态的特征很特殊,表现于既能履行其生理作用、又参予不伤害机体的一些程序。例如:自由基不断地产生并不断地被清除;其产生与清除的量达

引导丢失windows7开机不能进系统修复方法

写在最前面：经常有些TX在开机之后发现进不了系统，电脑屏幕上面只显示一行英文字母"bootmgr is missing"，这种情况就是属于系统引导丢失的范畴，今天和大家分享一下修复系统引导的分享。首先这个方法本身不难，他其实就是硬盘安装win7或者vista方法的一个变种。整个过程需要只需要鼠标操作以及输入一行命令即可。同样的，想干掉预装系统自带的100M的分区的同学也可以参考次方法（实施的时候一定记得看备注）说明：由于要编辑帖子，我实在win7系统下做演示的。实际操作的时候，由于进不了系统需要在pe下修复。因此在后面说明中，win7系统盘的盘符我会用x:表示首先将附件中的boot.rar(点击下载)文件，复制到win7系统盘x（pe下win的系统盘盘符不是C，要仔细注意），并解压到x盘的根目录。解压后x盘根目录应该有下图中红色框框标识出来的文件。 2011-8-5 15:19 上传下载附件(62.4 KB) 同样的，再将附件中的bootsect.rar文件bootsect.rar(35.63 KB, 下载次数: 92) ，解压到X盘根目录。

下面，按win键+R→输入cmd→回车在弹出的对话框中输入下列命令 1.x:\bootsect /nt60 x: 复制代码注意命令中的空格以及斜线的方向。输入命名之后按回车，在几秒钟之后，如果收到的提示中含有successfully，那就代表引导已经修复成功。下面就可以重启看见熟悉的启动画面了。含有100M隐藏分区的TX修复引导或者想干掉100m分区的TX请继续看2L备注备注 ok，提到100M的隐藏分区，就设计到关于硬盘分区的一些基本概念，有兴趣的可以参考我的另外一个帖子：https://www.360docs.net/doc/aa1651137.html,/thread-1675491-1-1.html 具体的操作步骤如下。在存在100M的隐藏分区情况下，win7系统是处于非活动状态，不能作为启动分区。因此，在用bootsect重做引导之后，还需要修改分区的活动状态。修改方法多种多样，利用diskpart命令也可以用分区软件。这里介绍一种WinPm软件的修改方法,其他软件也是类似。在WinPm下，右击想要设置成活动状态的分区，点击设置活动(不同软件，可能会显示成激活分区)，就ok。

抗氧化作用的机制

一：碳氢化合物氧化和抗氧化作用的机制1.1润滑油的自身氧化总所周知，碳氢化合物通过自动氧化过程氧化，这个过程形成酸和油的稠化。更严重的情况下，油泥和油漆类可能形成。润滑效果下降，降低燃油经济性，和增加摩擦，抗氧剂是很重要的添加剂来最小化氧化的影响，机理分析如下： 1.1.1 油的自身氧化自由基机理[179-181]，包括链引发，增长，分支，终止。 1）链引发链引发的特征是通过烃类化合的C-H、C-C的断裂产生烷基自由基，这个过程一般是在烃类暴漏在氧气氛围、则加热状态下、紫外光、机械剪应力等条件下【182】，这种均裂的难易程度有以下规律：C-H的键能和自由基的稳定性，183.苯基﹤伯﹤仲﹤叔﹤烯丙基﹤苄基。这样的话烃类化合物如果含有叔氢和氢在碳碳双键的α位时特别容易受到氧的影响。这个过程在室温下一般比较慢，但是通过加热或则金属催化下会大大加快（铜、铁、镍、钒、锰、钴等）。 2）链增长：增长过程包括一个不可逆的烷基自由基与氧气反应生成烷基过氧自由基。这个反应很快，速率与自由基上的取代基有密切的关系【179】。一旦形成，过氧自由基可以随机与其他烃反应生成氢过氧化物（ROOH）和新的烷基自由基，基于以上机理，一个烷基自由基的形成，大量的烃类化合物会被氧化为氢过氧化物。 3）链分支： A：自由基的形成 B:醛酮的形成：链分支过程开始于氢过氧化物断裂为烷氧基自己基和羟基自由基。这个反应需要很高的活化能一般是温度大于150℃.金属则催化这个过程。结果就是自由基可能经历以下过程a：烷氧基自由基从烃吸收氢变为醇，而烃生成新的烷基自由基b：羟基自由基通过吸收烃上的氢变成水和新的烷基自由基。c：仲烷氧基自由基可以通过分解变为醛和和新的烷基自由基。d：叔烷氧基自由基则降解为酮和新的烷基自由基。以上过程对于加快润滑油的氧化过程是非常重要的，不但生成大量的烷基自由基来加速氧化过程，而且生成很多小分子的醛和酮，这个物质无疑会降低润滑油的粘度、增加润滑油的挥发性和极性。在高温条件下醛和酮则会被继续氧化为酸和其他大分子化合物使油变得粘稠，从而形成油泥和varnish deposits。 4）链终止：在氧化过程中，大分子碳氢化合物的形成会增加油的粘度。当润滑油的粘度增加到影响氧气在有油中的传递的时候，链终止过程就开始了，比如：两个烷基自由基可以反应生成新的烃类化合物。烷基自由基可以与烷基过氧化物自由基反应生成新的过氧化物。当然这种过氧化物不稳定，容易形成更多的烷氧基自由基。在这个过程中生成的羰基化合物和醇类化合物也可能是含有α氢的过氧自由基反应所得：金属催化主要是通过氧化还原过程作用在链分支阶段催化氢过氧化物降解，【184】。可以显着减低氧化反应的活化能，使氧化反应能够在低温下进行。初始阶段：增长阶段：

体育运动与自由基及抗氧化剂.

体育运动与自由基及抗氧化剂周迎松 (宁波大学体育学院315211 摘要活性氧(ROS的产生是需氧生物生命的正常过程。在生理的条件下,这些有毒性的物质大部分会被抗氧化系统清除掉,这个系统主要有具有抗氧化作用的维生素、蛋白质、硫醇和抗氧化酶组成。由于体内的抗氧化系统储备相当有限,在紧张的体育训练会引起大量的氧消耗,从而产生大量的ROS对抗氧化系统进行考验。在一场急性的高强度的训练中,可以刺激抗氧化酶的活性。这被认为在氧化压力下细胞的自我防御体系。然而,长时间的高负荷的训练会引起体内组织维生素E减少与谷光甘肽(GSH与谷光甘肽过氧化物(GSSG比率的改变。缺少抗氧化剂的营养物质会出现阻碍抗氧化系统,增加训练引起氧化压力,破坏体内的组织。长时间训练似乎可以使体内抗氧化物酶的活性增加和体内的GSH含量的提高。最近研究表明,补充抗氧化营养物质对于长期训练的运动员是非常必要的。关键词:自由基,抗氧化剂,训练,活性氧 Physical activity and free redicals and antioxidant Zhou ying-song (Physical department of Ningbo university 315211. Abstract Generation of reactive oxygen species (ROS is a normal process in the life of aerobic organis -ms. Under physiological conditions, these deleterious species are mostly removed by the cellul ar antioxidant systems, which include antioxidant vitamins, protein and non-protein thiols, and anti-oxidant enzymes. Since the antioxidant reserve capacity

双系统启动修复方法(精)

以下内容摘自 https://www.360docs.net/doc/aa1651137.html,/hoxolo123/blog/item/70c1b22a733b1c21d42af1c3.html，我本人仅用过bcdboot这个命令,其他的没用过。 Win7：双启动引导修复问题一：原系统xp，在C盘。ghost安装win7到D盘。显然，D盘的win7没有引导，需要手动修复。修复方法【内为注释】： 1. 进入C盘xp，运行cmd进入xp命令行模式。输入 d: cd d:\windows\system32 bcdboot d:\windows /l zh-cn /s c: 运行上述命令后，在C 盘根目录生成了\boot文件夹和bootmgr文件。【D盘下已经具备了一个完整的win7，唯一欠缺的是系统盘内的引导，因此首先要在C盘重建win7的引导环境。通过Windows7内置的bcdboot命令可以轻易做到这一点。这个命令不能修改引导记录，我用VHD验证过】 2. 去win7安装光盘，找到bootsect.exe文件(找不到就网上下载一个，注意要win7的），复制到C:\boot\文件夹。然后进入命令行： cd c:\boot bootsect /nt60 c: bootsect /nt60 c: /mbr 这个命令执行完毕后，在完成所有后续步骤之前，一定不能重启XP，否则XP将无法启动！【bootsect ——用来写win7需要的引导信息到引导记录，第一个bootsect命令把引导信息写入C盘分区引导记录，第二个bootsect命令把引导信息写入硬盘主引导记录。由于主引导记录和分区引导记录都被修改为支持bootmgr，因此XP的引导器ntldr将不能被引导，后续步骤中我们会修复它】 3. 继续在xp的命令行模式，输入 d: cd d:\Windows\system32 bcdedit /create {ntldr} /d "Windows XP" bcdedit /set {ntldr} device boot bcdedit /set {ntldr} path \ntldr bcdedit /displayorder {ntldr} /addlast bcdedit /timeout 10 【这一步，我们用bcdedit命令来给XP在bcd中重建引导项。这样通过bootmgr加载bcd中XP的引导项，进而把启动控制权交给XP的引导管理器ntldr，实现XP的启动】至此，双系统引导修复完成。上述命令中，每个命令都必须成功。有可能，bcdedit命令会返回失败信息。此时步骤3中的命令改为： bcdedit /store c:\boot\bcd /create {ntldr} /d "Windows XP" bcdedit /store c:\boot\bcd /set {ntldr} device boot bcdedit /store c:\boot\bcd /set {ntldr} path \ntldr bcdedit /store c:\boot\bcd /displayorder {ntldr} /addlast bcdedit /store c:\boot\bcd /timeout 10 ——————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————