抗原抗体反应有以下几个特点
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第一节 抗原－抗体反应
抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生 特异性结合，呈现的某种反应现象。
抗原抗体反应有以下几个特点:
1.抗原与抗体结合是特异性结合 表位(抗原)——超变区(抗体)
2.抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合 氢键、疏水键、静电引力和范德华力
(Van der waal‘s force) 、电子云力的合 力。
直接凝集反应（玻片法）
(二)间接(被动)凝集反应(indirect/passive
agglutination)
原理：
可溶性抗原(或抗体)，吸附颗粒载体 ＋
抗体(或抗原) 凝集
间接凝集反应种类及所用载体
间验
间接炭凝实验
红细胞 聚苯乙烯胶乳颗粒
活性炭
(二)单向免疫扩散(single radial
immunodiffusion) 原理：抗体预先与琼脂混匀制成凝胶板， 打孔,•将可溶性抗原加至孔中，向周围扩散， 与抗体在比例适宜处形成白色沉淀环。沉淀 环的直径与抗原浓度呈正相关。根据沉淀环 直径大小从预先绘制成的标准曲线，查出待 测标本中抗原含量。 优点：定量测定抗原，方法简便，易观 察结果。 灵敏度：1～20μg／ml。 缺点：需时长，1～2•天观察结果。 •应用：常用于血清中IgG、IgM、IgA和C3 的定量检测。
琼脂中沉淀反应法：
双向免疫扩散(double immunodiffusion) 单向免疫扩散(single radial
immunodiffusion) 对流免疫电泳(counter
immunoelectrophoresis) 火箭电泳(rocket electrophoresis) 免疫电泳(immunoelectrophoresis)
(三)间接凝集抑制试验 (indirect agglutination inhibition test)
原理：
抗体
＋
反应 ＋ 抗原致敏载体颗粒
可溶性抗原
凝集
(四)协同凝集试验(coagglutination test)
原理：
IgG结合于SPA (金黄色葡萄球菌) ＋
抗原(可溶性）
凝集
应用：检测微量抗原(存在于血液、脑脊液和 其他分泌液)。用于流脑、伤寒、布氏菌病 等的早期诊断。
抗原和抗体可解离,•性质不变。
3.抗原抗体反应可分为两个阶段 （1）特异性结合阶段 • 此阶段需时短,仅需几秒到几分钟,无可见
反应出现 （2）可见反应阶段•
需时较长,数分,数小时或数日出现可见现 象,表现为沉淀,凝集,细胞溶解等 4.抗原和抗体结合是否呈现明显可见的反应现 象,与两者的分子比例密切相关
抗原抗体反应的主要影响因素：
1.电解质:
在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电 荷,•适当浓度的电解质会使它们失去一部 分负电荷而互相结合,出现明显的沉淀或凝 集现象。
2.温度:
37℃
3. 酸碱度:
pH6-8
抗原抗体反应包括：
沉淀反应 凝集反应 溶解反应 补体结合反应 中和反应
已知抗体 已知抗原
概念：颗粒性抗原或吸附于颗粒上的可 溶性抗原(或抗体)于相应抗体(或抗原)，在 电解质存在下出现凝集物的现象。
凝集反应包括：
◆ 直接凝集反应 (direct agglutination) ◆ 间接(被动)凝集反应(indirect/passive
agglutination) ◆ 间接凝集抑制试验(indirect agglutination
inhibition test) ◆ 协同凝集试验(coagglutination test) ◆ 抗球蛋白试验(antiglobulin test，Coomb’s
test)
(一)直接凝集反应(direct agglutination)
原理：颗粒性抗原(本身) + 抗体 凝集
包括： 玻片法：定性，用于：菌种鉴定 人ABO血型鉴定 试管法：半定量，用于：伤寒或副伤寒诊断 肥达氏反应(Widal test), 布氏菌病诊断 瑞特氏反应 (Wright test)
(一)双向免疫扩散(double
immunodiffusion)
原理：在琼脂板上按一定距离打孔，抗原 和抗体分别加入相邻孔中，使其向孔周围扩 散，比例适宜相对应的抗原抗体结合，在抗 原抗体孔间出现白色的沉淀线(沉淀物)。
灵敏度：1～20μg抗体/ml
应用：
主要用于检测体液中各种蛋白成分， 如甲胎蛋白（AFP）、乙型肝炎表面抗原 （HBsAg）等。
检测未知抗原； 检测未知抗体。
一、沉淀反应(precipitation)
概念：可溶性抗原与相应抗体在电解质 存在条件下结合，出现沉淀物的现象。
沉淀反应的试验方法：环状法 絮状法 琼脂中沉淀法
环状法 —— 重层法 灵敏度：0.5ug抗体/ml 原理：
絮状法 —— 混合法 灵敏度：1.5ug抗体/ml 原理：
(四)火箭电泳(rocket electrophoresis,又 称电免疫扩散)
原理：在电场中进行单向免疫扩散。
抗原在含抗体的琼脂中泳动，二者于比 例适宜处形成沉淀峰。沉淀峰的高度与抗原 含量成正比。从参考曲线查出抗原含量。
敏感度： 1～20μg／ml
优点：需时较短。
应用：测定抗原含量。
(五)免疫电泳(immunoelectrophoresis)
原理：将抗原在琼脂平板上进行电泳， 然后沿电泳方向挖一与抗原平行槽，加入抗 体，进行双向免疫扩散。抗原与抗体在比例 适宜处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位 置和形状，与已知标准抗原比较，即可分析 抗原的成分及性质。
应用：血清蛋白组分分析； 抗原成分分析。
二、凝集反应(agglutination)
(三)对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis)
原理：在电场中进行双向免疫扩散。 加抗原孔靠近阴极，加抗体孔靠近阳极。
通电(缓冲液pH 8.6)后，抗原向阳极泳动，抗 体向阴极泳动，二者在比例适宜处形成白色沉 淀线。 特点：出结果快于双向免疫扩散，约需1小时； 灵敏度:10μg／ml。
(五)抗球蛋白试验(antiglobulin test，Coomb’s test)
原理：
红细胞(Rh+)
抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生 特异性结合，呈现的某种反应现象。
抗原抗体反应有以下几个特点:
1.抗原与抗体结合是特异性结合 表位(抗原)——超变区(抗体)
2.抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合 氢键、疏水键、静电引力和范德华力
(Van der waal‘s force) 、电子云力的合 力。
直接凝集反应（玻片法）
(二)间接(被动)凝集反应(indirect/passive
agglutination)
原理：
可溶性抗原(或抗体)，吸附颗粒载体 ＋
抗体(或抗原) 凝集
间接凝集反应种类及所用载体
间验
间接炭凝实验
红细胞 聚苯乙烯胶乳颗粒
活性炭
(二)单向免疫扩散(single radial
immunodiffusion) 原理：抗体预先与琼脂混匀制成凝胶板， 打孔,•将可溶性抗原加至孔中，向周围扩散， 与抗体在比例适宜处形成白色沉淀环。沉淀 环的直径与抗原浓度呈正相关。根据沉淀环 直径大小从预先绘制成的标准曲线，查出待 测标本中抗原含量。 优点：定量测定抗原，方法简便，易观 察结果。 灵敏度：1～20μg／ml。 缺点：需时长，1～2•天观察结果。 •应用：常用于血清中IgG、IgM、IgA和C3 的定量检测。
琼脂中沉淀反应法：
双向免疫扩散(double immunodiffusion) 单向免疫扩散(single radial
immunodiffusion) 对流免疫电泳(counter
immunoelectrophoresis) 火箭电泳(rocket electrophoresis) 免疫电泳(immunoelectrophoresis)
(三)间接凝集抑制试验 (indirect agglutination inhibition test)
原理：
抗体
＋
反应 ＋ 抗原致敏载体颗粒
可溶性抗原
凝集
(四)协同凝集试验(coagglutination test)
原理：
IgG结合于SPA (金黄色葡萄球菌) ＋
抗原(可溶性）
凝集
应用：检测微量抗原(存在于血液、脑脊液和 其他分泌液)。用于流脑、伤寒、布氏菌病 等的早期诊断。
抗原和抗体可解离,•性质不变。
3.抗原抗体反应可分为两个阶段 （1）特异性结合阶段 • 此阶段需时短,仅需几秒到几分钟,无可见
反应出现 （2）可见反应阶段•
需时较长,数分,数小时或数日出现可见现 象,表现为沉淀,凝集,细胞溶解等 4.抗原和抗体结合是否呈现明显可见的反应现 象,与两者的分子比例密切相关
抗原抗体反应的主要影响因素：
1.电解质:
在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电 荷,•适当浓度的电解质会使它们失去一部 分负电荷而互相结合,出现明显的沉淀或凝 集现象。
2.温度:
37℃
3. 酸碱度:
pH6-8
抗原抗体反应包括：
沉淀反应 凝集反应 溶解反应 补体结合反应 中和反应
已知抗体 已知抗原
概念：颗粒性抗原或吸附于颗粒上的可 溶性抗原(或抗体)于相应抗体(或抗原)，在 电解质存在下出现凝集物的现象。
凝集反应包括：
◆ 直接凝集反应 (direct agglutination) ◆ 间接(被动)凝集反应(indirect/passive
agglutination) ◆ 间接凝集抑制试验(indirect agglutination
inhibition test) ◆ 协同凝集试验(coagglutination test) ◆ 抗球蛋白试验(antiglobulin test，Coomb’s
test)
(一)直接凝集反应(direct agglutination)
原理：颗粒性抗原(本身) + 抗体 凝集
包括： 玻片法：定性，用于：菌种鉴定 人ABO血型鉴定 试管法：半定量，用于：伤寒或副伤寒诊断 肥达氏反应(Widal test), 布氏菌病诊断 瑞特氏反应 (Wright test)
(一)双向免疫扩散(double
immunodiffusion)
原理：在琼脂板上按一定距离打孔，抗原 和抗体分别加入相邻孔中，使其向孔周围扩 散，比例适宜相对应的抗原抗体结合，在抗 原抗体孔间出现白色的沉淀线(沉淀物)。
灵敏度：1～20μg抗体/ml
应用：
主要用于检测体液中各种蛋白成分， 如甲胎蛋白（AFP）、乙型肝炎表面抗原 （HBsAg）等。
检测未知抗原； 检测未知抗体。
一、沉淀反应(precipitation)
概念：可溶性抗原与相应抗体在电解质 存在条件下结合，出现沉淀物的现象。
沉淀反应的试验方法：环状法 絮状法 琼脂中沉淀法
环状法 —— 重层法 灵敏度：0.5ug抗体/ml 原理：
絮状法 —— 混合法 灵敏度：1.5ug抗体/ml 原理：
(四)火箭电泳(rocket electrophoresis,又 称电免疫扩散)
原理：在电场中进行单向免疫扩散。
抗原在含抗体的琼脂中泳动，二者于比 例适宜处形成沉淀峰。沉淀峰的高度与抗原 含量成正比。从参考曲线查出抗原含量。
敏感度： 1～20μg／ml
优点：需时较短。
应用：测定抗原含量。
(五)免疫电泳(immunoelectrophoresis)
原理：将抗原在琼脂平板上进行电泳， 然后沿电泳方向挖一与抗原平行槽，加入抗 体，进行双向免疫扩散。抗原与抗体在比例 适宜处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位 置和形状，与已知标准抗原比较，即可分析 抗原的成分及性质。
应用：血清蛋白组分分析； 抗原成分分析。
二、凝集反应(agglutination)
(三)对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis)
原理：在电场中进行双向免疫扩散。 加抗原孔靠近阴极，加抗体孔靠近阳极。
通电(缓冲液pH 8.6)后，抗原向阳极泳动，抗 体向阴极泳动，二者在比例适宜处形成白色沉 淀线。 特点：出结果快于双向免疫扩散，约需1小时； 灵敏度:10μg／ml。
(五)抗球蛋白试验(antiglobulin test，Coomb’s test)
原理：
红细胞(Rh+)