第14章 分枝杆菌属

抵抗力（四不怕）
对干燥的抵抗力特别强
结核分枝杆菌对酸（3% HCl或6% H2SO4)
或碱（4% NaOH) 有抵抗力，15min不受 影响。 对碱性染料有抵抗力
对青霉素等抗生素耐药
变异性
结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、 免疫原性和耐药性等变异。 卡介苗（Bacilli Calmette-Guerin BCG）
感染部位：原发感染病灶可发生于 肺的任何部位，常见于肺上叶下部， 中叶或下叶上部，且常靠近胸膜。
症状：多轻微和短暂，仅有微热、 咳嗽、食欲差，可有体重下降。
结核分 枝杆菌
呼吸道 肺泡MΦ 内增殖
MΦ裂解释放 结核分枝杆菌 渗出性炎症 原发灶
渗出液吸收，病灶纤维钙化而自愈
抵抗力强者 3－6周产生细胞免疫
主讲:
杨志伟 教授
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第14章 分枝杆菌属
(Mycobacterium)
主要特点
抗酸染色，故又称抗酸杆菌
生长大多缓慢 致病多为慢性
分枝杆菌的分类
分类 生长特性 主要对人致病的分枝杆菌 结核分枝杆菌复合群 生长缓慢 结核分枝杆菌、牛分枝杆菌 非结核分枝杆菌 Ⅰ组 生长缓慢、光产色 堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌 Ⅱ组 生长缓慢、暗产色 瘰疠分枝杆菌 Ⅲ组 生长缓慢、不产色 鸟-胞内分枝杆菌 Ⅳ组 生长快速、 偶发分枝杆菌 麻风分枝杆菌 人工培养基上不生长
动物试验
将集菌后的材料注射于豚鼠腹股沟皮 下，3～4周后若局部淋巴结肿大，结 核菌素试验阳转，即可进行解剖。
观察肺、肝、淋巴结等器官有无结核 病变，并作形态、培养等检查。
快速诊断
多聚酶链反应（PCR）扩增技术应用于 结核分枝杆菌DNA鉴定，每ml中只需含 几个细菌即可获得阳性，且12d得出 结果。
L管扩散
肺门LN
原发综 合征 原发灶 L管炎 肺门LN肿大 肺门LN肿大
抵抗力弱者细菌 经血管L管扩散
全身粟粒性结核或结核性脑膜炎
肺结核原发感染过程
结局：90％以上的原发感染，可纤维 化或钙化而痊愈。但病灶内常有一定 量的结核分枝杆菌存在，可成为以后 内源感染的来源。5％的感染可发展成 活动性肺结核。
据WHO预计，目前全球约20亿人已感染了MTB。
全球现有TB病人2000万。
TB的死亡将达历史最高水平，全球每天有8000 人死于TB，每年约300万人死于TB 。特别是在 发展中国家， TB的形势尤其严峻，全球98％的 TB死亡和95％的新发TB都是在发展中国家。
我国属于全球22个TB高负担国家之一，TB的患病 人数在世界各国中居于第 2 位。我国 TB 的流行具 有“五多一高”的特点： MTB感染人数多。 现患肺TB病人多。 TB死亡人数多。 耐药TB人多。
操作中需注意实验器材的污染问题， 以免出现假阳性。
四、防治原则
近 20 年国际组织提出控制结核病主要 方法有 发现和治疗痰菌阳性者 新生儿接种卡介苗 冻干疫苗 核糖体RNA(rRNA)疫苗
治疗
一般治疗 合理营养，注意休息。 抗结核药物的治疗原则 早期、联合、适量、规律、分阶段 治疗和坚持全程。
粟粒性肺结核
干酪样肺炎
慢性纤维空 洞性肺结核
原发后感染：多发生于成人，大多为内源
性感染，极少由外源性感染所致。为再次感染， 机体已形成对结核分枝杆菌的特异性细胞免疫， 病灶常限于局部；原发后感染多见于肺尖部位 。 容易发生干酪样坏死和空洞形成，菌可随痰排 出，称为开放性肺结核。
肺外感染
部分患者结核分枝杆菌可进入血液循 环引起肺内、外播散，如脑、肾结核。 痰菌被咽入消化道或食入了消毒不严 格的牛奶也可引起肠结核、结核性腹 膜炎等。 结核分枝杆菌L型
农村TB人多。
传染性肺TB患者疫情居高不下。
形态与染色
细长略带弯曲， 端极钝园，呈单个或分枝
状排列， 无鞭毛、无芽胞。
有荚膜
细胞壁脂质含量较高。
抗酸染色阳性
L 型
结核杆菌抗酸染色
在陈旧的病灶和培养物中，形态常不典型，
可呈颗粒状、串珠状、短棒状、长丝形等。
培养特性
专性需氧
脂
索状因子
质
若将其从细菌中提出，则细菌丧失 毒力 磷脂 硫酸脑苷脂
蜡质D
索状因子
由分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖脂
能使细菌在液体培养基中呈蜿蜒索状 排列
能破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸。 抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿
Cord formation in liquid media(cord factor)
试验。
结核菌素试剂
旧结核菌素（old tuberculin，OT) 每0.1ml含5单位 纯 蛋 白 衍 化 物 (purified protein derivative，PPD) 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位
试验方法与意义
肺部感染
原发感染 多发生于儿童 原发病灶 原发综合征 转归 原发后感染
肺部感染
分为原发和原发后感染。 原发感染：结核分枝杆菌初次感染在 肺内形成病灶，称为原发性肺结核， 多发生于儿童。
结核分枝杆菌经呼吸道进入肺泡，在肺 泡中被吞噬细胞吞噬，并在其中生长繁殖， 导致吞噬细胞裂解死亡，释放出大量细菌， 在肺泡内引起炎症，称为原发感染。 原发灶、淋巴管炎和肿大的肺门淋巴结 称为原发综合征。
三、免疫性
免疫机制
超敏反应 结核菌素实验
免疫机制
属胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞 为主的细胞免疫。 结核的免疫属于感染免疫(infection
immunity)，又称有菌免疫。
结核菌素试验
是应用结核菌素进行皮肤试验来测定
机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发
性超敏反应（Ⅳ型变态反应）的一种
结核分枝杆菌易发生耐药
二、致病性
致病物质
结核分枝杆菌无内毒素，也不产 生外毒素和侵袭性酶类。 其致病作用是菌体成分。
荚膜
脂质 蛋白质
荚 膜
成分－－多糖、脂质和蛋白质
有助于粘附与入侵
防止宿主的有害物质进入细菌
可降解宿主组织中的大分子物质，为 细菌繁殖提供营养。 可抑制吞噬体与溶酶体的融合
思
考
题
1.名词解释：卡介苗(BCG) 、抗酸杆菌、传染性 免疫 2.简述结核分枝杆菌的主要生物学特性。 3.试述结核菌素试验的原理、结果分析及实际应 用。 4.简述结核分枝杆菌的致病物质？与毒力有关的 主要物质包括哪些？ 5.结核分枝杆菌的免疫性与超敏反应。
营养要求高 罗氏培养基
蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等。 最适pH为6.5-6.8，最适温度为37℃。 生长缓慢， 18-24h 繁殖一代，接种后 3 ～ 4
周才出现肉眼可见的菌落。
结核杆菌培养
抵抗力（四怕）
对乙醇敏感
对湿热敏感
对紫外线敏感
对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、 乙胺丁醇、卡那霉素、对氨基水杨酸等 抗痨药物敏感，但长期用药容易出现耐 药性。
磷
脂
促使单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的 分解作用，使病灶组织溶解不完全， 与结核结节的形成有关
硫酸脑苷脂
抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合
使细菌能在吞噬细胞中长期存活
蜡 质 D
肽糖脂和分枝菌酸的复合物
具有佐剂作用，可激发机体产生迟发 型超敏反应。
蛋白质
有抗原性，和蜡质D结合后能使机体发 生超敏反应。
2种PPD5个单位两前臂皮内注射
48 ～ 72h 后红肿硬结超过 5mm 者为阳性 ≥ 15mm 为强阳性，对临床诊断有意义。
阴性反应
结果分析：
阳性反应表明机体已感染过结核枝杆菌或 卡介苗接种成功，对结核杆菌有迟发型超 敏反应，说明有特异性免疫力。强阳性反 应则表明可能有活动性结核病，尤其是婴 儿。阴性反应表明未感染过结核分枝杆菌 或未接种过卡介苗。 原发感染早期、正患严重结核病或其 他严重疾病致细胞免疫功能低下者（如用 过免疫抑制者）也可能出现阴性反应。
应用
选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种 后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应 接种或补种卡介苗。 在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感 染的流行病学调查,了解人群自然感染率。 作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核 病的辅助诊断 测定肿瘤患者的细胞免疫功能
四、微生物学检查法
标本取材
标本的选择根据感染部位
直接涂片镜检
标本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染 色。 若找到抗酸阳性菌即可初步诊断
浓缩集菌
先集菌后检查，可提高检出率。 脑脊液Βιβλιοθήκη Baidu胸、腹水可直接离心沉淀集 菌。
痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标 本需经4% NaOH处理后离心沉淀。
分离培养
结核分枝杆菌生长缓慢，一般需2～4 周长成肉眼可见的落菌。
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第一节 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis)
结核病是一种古老的疾病。
中国医史中，结核病最早记载于《内 经》并形容为“虚痨”之症。
世界结核病防治现状
自发现 MTB 以来，全球约有两亿人死 于TB，且疫情发展日趋严重。 WHO 已将 TB 作为重点控制的传染病之 一，并于 1995 年起将每年的 3 月 24 日 定为“世界防治结核病日”，以提醒 公众加深对TB的认识。
其中重要的是结核菌素（tuberculin）。
在形成结核结节中发挥一定作用
多
糖
多糖常与脂质结合存在于胞壁中，主 要有半乳糖、甘露醇、阿拉伯糖等。
多糖可使中性粒细胞增多，引起局部 病灶细胞浸润。
核酸
核糖体核糖核酸是本菌的免疫原之一， 能刺激机体产生特异性细胞免疫。
所致疾病
感染方式 呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机 体 所致疾病 肺结核 疾病种类多样化