植物学实验1 显微镜的使用及植物细胞观察

预习：植物细胞的结构与代谢产物
细胞质 细胞核 细胞壁
洋葱表皮
（三）生物绘图 记录植物形态结构的方法: 绘图法、照相法、 录像法等。 1. 生物绘图的特点

生物绘图是形象描述生物外部形态和内部 结构的一种重要的科学记录方法，通常用 点线图的形式来描绘。
生物绘图具有以下基本特征：
① 具科学性
② 比例正确 ③ 层次分明
2. 生物绘图的步骤
物镜的工作距离 ：从物镜组最前面一块透镜的 表面到被观察标本的距离。 4×、10×、40×和100×物镜的工作距离分别为 34.7、7.634、0.53和0.198毫米。 调焦时要特别小心，以免碰坏镜头或损坏标本。

齐焦：当用某一倍率的物镜 观察图像清晰后，再转换另 一倍率的物镜时，其成像应 基本清晰，即齐焦。

合轴：物镜转换时，像的中 心应在视野中央允许的范围 内，即合轴。齐焦性能的优 劣和合轴的程度是显微镜质 量好坏的重要标志。


反光镜/集光器： 简单光学显微镜，依靠反光镜反射自然光或灯光来提供光源； 高级光学显微镜，自身配备集光器，内有电光源，可通过调节电流的强弱来 调节光线的强弱。 遮光器/聚光器： 简单光学显微镜，遮光器上面有大小不等的圆孔（光圈）。 高级光学显微镜，可通过调节聚光器内孔径光阑的大小来调节光线的强弱。 若将孔径光阑放大，图像亮度增高，分辨率增加，而反差减小； 若将孔径光阑缩小，图像亮度降低，分辨率下降，但反差增大。 因此，观察时要调节聚光器孔径光阑以达到适当的反差和良好的分辨率。
（3）定稿：对草图进行修正和补充，用硬铅 笔（2H或3H）将全图绘出。 用线条表示轮廓和各部分的界限，线条要 均匀，光滑，不可时粗时细，不可时深时 浅或时虚时实。 用圆点表示观察各部位的明暗或颜色深浅。 点密表示背光、凹陷或色彩重的部位；点 疏表示向光、突出或色彩轻的部位；打点 的方法是铅笔垂直向下打。
（1）细心观察：绘图前要对观察的对象进行 细致的观察，对各部分的位置、比例、特 征等有完整的认识，充分利用所学的理论 知识，将正常的结构与偶然的、人为造成 的假象区分开。 （2）起稿：是勾画轮廓的过程，要根据绘图 纸的大小，绘图的数量，确定某个图在纸 上的位置和大小，注意整体布局，避免图 像过大或过小或偏斜，并注意留有引线和 注字的位置。用软铅笔（HB）绘草图。
1、将清洁的载玻片置于实验桌上；取实验 桌上的清水滴瓶，用滴管滴一滴水。
2. 将要观察的材料（经徒手切片的实验观察材 料撕取的实验观察材料或透明过的实验材料） 平贴于已滴水的载玻片上 3、从一侧将盖玻片轻轻盖上,尽量保证压 好的片子上无气泡

练习：撕取洋葱鳞叶的内表皮进行临时封 片练习，注意盖盖玻片的方法。
实验一 显微镜的使用及植物细胞观察
一、实验目的
1. 培养学生掌握植物学研究的基本方法、养 成良好的实验习惯、打下良好的实验基础。 2. 了解光学显微镜的基本结构和工作原理，并 掌握其使用方法。 3. 了解临时水封片制作技术。 4. 掌握生物绘图的基本方法。
二、实验仪器 光学显微镜、刀片、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、培养皿、滴管、蒸馏水 三、实验材料 洋葱鳞叶、洋葱表皮细胞永久封片
2）标本放置
（1）放载玻片。 （2）从左侧观察移动推进器，使观察物于光束中央。 （3）双手调节粗准焦螺旋使载物台升至最高。 （4）调节目镜间距。
3）低倍镜观察（双眼同睁） （1）调节粗准焦螺旋下降载物台使物像清晰。 （2）调节细准焦螺旋（前后半圈）百度文库 （3）观察部位于视野中央。 （4）左眼观察，右眼画图。
四、实验内容 （一）光学显微镜的结构和使用
1. 光学显微镜的结构 眼距调节装置 镜筒 机 物镜转换器 械 镜臂 系 载物台 统 调焦螺旋 集光镜 推进器 镜 座 目镜 视度调节圈
光
物镜 聚光器 统 学 系
目镜 眼距调节装置
视度调节圈
物镜转换器
物镜 载物台 聚光器 推进器 集光镜 调焦螺旋
光源亮度调节钮
水笔
生物绘图（点线图）要求： 1、正确、简单、线条清楚 2、亲眼所见，符合标本 3、将完整、典型、显著的 部分画在一起 4、画图和注字用铅笔
铅笔
五、实验作业
1. 简述光学显微镜的使用方法。
2. 制作临时水封片的操作要点是什么？ 3. 详细说明生物绘图的具体步骤和要求。 4. 绘制洋葱鳞叶表皮细胞3-4个，并注明结构。



（二）常用的植物制片技术 植物制片技术是观察植物内部形态结构的主要手段之一， 常用的有徒手切片法、压片法、石蜡切片法和树脂切片法 等。 （1）临时封片：是植物学实验中最常用的观察植物形态 结构的方法之一。基本方法是：①准备好载玻片、盖玻片， 擦拭时要小心，以免弄碎玻片；②在载玻片的中央滴一滴 蒸馏水，用镊子或解剖针取植物材料置于水滴上，并使材 料展开或分散均匀；③盖上盖玻片，方法是用镊子夹住盖 玻片的一边，另一边与水滴的边缘接触，然后慢慢放下盖 玻片，这样可避免混入气泡。如盖玻片下水过多，可用吸 水纸吸掉多余的水。做好的封片可直接放在显微镜下观察。
曹建国
上海师范大学生物系 2013年2月
课程性质:生物科学（师范）专业必修课 学分：2分 (实验)总学时：3×18=54学时 教材:曹建国，戴锡玲，王全喜编著，《植物学实验指导》，北京：科学出版 社， 2012年 参考书: 1、王全喜，张小平主编，《植物学》，北京：科学出版社，2004年9月 2、赵遵田，苗明升主编，《植物学实验教程》，北京：科学出版社，2004年 3、叶创兴，冯虎元主编，《植物学实验指导》，北京：清华大学出版社，2006 4、贺学礼主编，《植物学实验实习指导》，北京：高等教育出版社，2004年 上课要求: 实验前必须做好实验预习工作，认真实验并写出实验报告 考核方式：闭卷 总评成绩=期末考试成绩（60%）+ 平时成绩（40%） 期末考试=实验操作内容(50%) + 实验理论内容(50%) 平时成绩=实验报告+课堂实验操作测试+出勤率
4）高倍镜观察
（1）侧面观察转换到高倍物镜（不跨油镜） （2）调节光源亮度旋钮 （3）调细准焦螺旋 （4）使观察物在中央，画图
5）更换载玻片 （1）载物台降到最低。 （2）转换到最低物镜。 （3）换新载玻片。 （4）低倍镜观察。
6）用后处理 （1）关闭电源，拔掉插头。 （2）载物台降到最低。 （3）取下载玻片。 （4）4×和10 ×物镜靠内呈“八”字放置。 （5）镜筒复原。 （6）电线缠绕在镜筒上固定。

物 镜：通常有4倍（4×）、10倍 （10×）、20倍（20×）、40倍 （40×）和100倍（100×，油镜)
物镜数字：表示镜头的主要性能 参数 “40”：放大倍数 “0.65”：镜口率（或称数值孔径， 数值越大分辨率越高） “160”：镜筒长度（mm） “0.17”：盖玻片厚度（mm）


2. 光学显微镜的使用方法
1）安置
（1）右手拿镜臂，左手托镜座；放桌上旋转180度， 偏左侧放在距桌边3—4厘米。 （2）旋松镜筒固定螺丝，将镜筒旋转180度，拧紧。 （3）插电源，开电源开关。 （4）旋转物镜转换器，低倍镜就位。 （5）孔径光阑调到最大，聚光器转到最高，适当调节 光源亮度调节器。
（4）标注名称

用直线指明要标注的部位，用正楷字标注相应的名 称，一般可分为直接标注和间接标注。
引指示线时要注意：①指示的部位要典型，具有代 表性；②指示线要尽量引向图的右侧；③要尽量避 免指示线的迂回、交叉，以免混淆各部分结构。 （5）核实绘图内容，保持画面整洁

用橡皮把轮廓线、虚线等轻轻擦掉。最后在图的下 方写出本图名称。
答疑:
植物实验室的要求：
1. 实验室是进行科学实验、培养严谨求实作风、启发思维创新的场所，必 须持严肃科学的态度。
2. 实验室必须保持清洁，仪器设备要摆放整齐、安全规范。
3. 凡进入实验室工作学习的人员必须着装整洁，服从本室工作人员的管理， 遵守实验室的规章制度；借用的实验仪器在实验结束后清点归还。 4. 实验前需进行认真准备，明确实验目的，掌握实验的基本原理、实验方 法、操作步骤等，了解有关仪器设备的配置、性能，熟悉操作规程及安 全注意事项。发现设备故障或其它异常情况时应立即采取应急措施并及 时报告。 5. 科学实验中应规范操作、细致观察、如实记录并及时整理实验结果，完 成实验报告。 6. 爱护节约实验材料，不得损坏永久装片，不将实验材料随意丢弃。 7. 实验结束后将物品归还原处，打扫室内卫生，废弃物倒入指定地点，注 意关闭仪器设备、关闭电源、关水、关门窗。