动物细胞膜的通透性观察
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0.89g 0.05g 0.42g
蒸馏水
Hale Waihona Puke Baidu
100ml
调PH至7.2,过滤灭菌或高压灭菌10min,置4℃冰箱保存。
0.128mol/L NaCl溶液
0.128mol/L NH4Cl溶液 0.128mol/L NH4AC溶液 0.128mol/L NaNO3溶液 0.09mol/L Na2SO4溶液 0.24mol/L 葡萄糖
七、作业
书写实验报告,并就细胞膜对不同物质的渗透性 不同,对实验结果进行分析 ,见下表。
附表 各种溶液的溶血现象观察结果
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
测试溶液
0.128mol/L NaCl 0.128mol/L NH4Cl 0.128mol/L NH4AC 0.128mol/L NaNO3 0.09mol/L Na2SO4 0.24mol/L 葡萄糖 0.24mol/L 甘油 0.24mol/L 乙醇 0.24mol/L 丙酮 0.128mol/L KNO3
0.24mol/L 甘油
0.24mol/L 乙醇
0.24mol/L 丙酮
0.128mol/L KNO3溶液 蒸馏水
四、实验操作
1.从集市杀鸡处接血5ml(防止污染),放入盛有20ml Alsever’s液瓶中,混匀后置冰箱保存备用(1周内使用)。 2. 使用前,取用Alsever’s液保存的新鲜鸡血5ml,加入8ml 的0.128mol/L的NaCl溶液,小心混匀,1000 r/min离心 5min,如此3次洗涤,最后配成30%的鸡红细胞(CRBC) 悬液。 3. 取11支试管,按附表中所示测试溶液,分别取样各3ml, 作出标记后,各管均加入红细胞悬液2滴,混匀后静置于温 室中,观察各支试管中发生溶血的时间及其变化。
H2O
是否溶血
分析原因
目测法判断标准:快速溶血:+++;慢速溶血:++或+;不溶血:-
各种溶液的溶血现象
谢谢观看!
实验二
动物细胞膜的通透性观察
一、实验目的
1. 了解细胞膜对物质通透性的一般规律。 2. 了解溶血现象及其发生机制。
二、实验原理
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。它 是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。各种物质出 入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,水分 子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向 渗透压高的一侧扩散,这种现象就是渗透。渗透作用是细 胞膜的主要功能之一。 将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内,可 使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,由不透明的红细胞 悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种现象称为溶血。
二、实验原理
将红细胞放在某些等渗盐溶液中,由于红细胞膜 对各种溶质的通透性不同,膜两侧的渗透压平衡 会发生改变,也会发生溶血现象。 因此,发生溶血现象所需时间长短可作为测量物 质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细 胞作为细胞膜透性的实验材料,将其放入不同的 介质溶液中,观察红细胞的变化。
三、实验用品
1、材料 鸡血细胞 2、器材 普通显微镜、普通离心机、扭力天平、 10ml试管、10ml刻度离心管、试管架,2ml注射 器(无需针头)或5ml移液管、洗耳球、滴管、载 玻片、擦镜纸、记号笔等。
(三)试剂
Alsever溶液
葡萄糖
2.05g
柠檬酸钠(Na9C6H5O7.2H2O) 柠檬酸(C6H6O7.H2O) 氯化钠
五、结果
试管内液体分两层:上层浅黄色透明,下层红色 不透明为不溶血(-),镜检红细胞完好呈双凹 盘状。 如果试管内液体混浊,上层带红色者,称不完全 溶血(+或++),镜检有部分红细胞呈碎片。 如果试管内液体变红而透明者,称完全溶血(+ ++),镜检发现细胞全部呈碎片。
六、注意事项
鸡血在离心时,试管均需在扭力天平上平衡。 离心结束后,小心倾去上层血浆及中层血小板等成 分,尽量控干。目测红细胞体积或置于带刻度的离 心管中,加入生理盐水配成30%的红细胞悬液; 试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以 免造成人为的红细胞破裂。