常见大鼠心肌梗塞模型建立方法对比

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心肌梗死动物模型具体方法及步骤

心肌梗死动物模型具体方法及步骤原型物种人来源结扎冠状动脉左前降支（LAD）导致心梗模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雌雄各半，体重为180g-200g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期72h建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，是一种急性及严重的心脏状态。

心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现，需要冠状动脉不断提供的血流供应，当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞，使得冠状动脉的血流急剧减少或中断，便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，心肌无法得到足够氧气，最终导致心肌不可逆的缺血性坏死，心脏的收缩和舒张功能降低，机体供血不足，严重者最终导致机体死亡。

1. 大鼠用3%戊巴比妥钠（30mg/kg），腹腔注射麻醉，用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇术区消毒。

2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。

打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸比2：1，潮气量6-8 mL，频率70 次/min），将气管插管沿声门插入气管，取下大鼠接上呼吸机，观察大鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。

3. 大鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。

4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线，于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD)，以完全阻断LAD血流。

5.关胸：结扎完成后，5-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。

6.术后管理：术后密切关注大鼠状态，有无呼吸异常等。

待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。

心肌梗死的动物模型制作

心肌梗死的动物模型制作心肌梗死是一种严重的心血管疾病，其主要病理特征是冠状动脉的阻塞导致心肌缺血与坏死。

为了研究心肌梗死的发病机制和寻找可能的治疗方法，研究人员常常利用动物模型来模拟心肌梗死的发生。

下面，我将介绍一种常用的大鼠心肌梗死动物模型制作方法。

制作大鼠心肌梗死动物模型可以按照以下步骤进行：1.动物选择。

常用的实验动物有大鼠和猪。

由于大鼠的心血管解剖和生理特征与人类较为接近，同时成本较低，因此大鼠是一种常见的选择。

2.麻醉动物。

使用适量的麻醉剂，如异氟醚或七氟醚等，来使动物处于麻醉状态。

确保动物处于无痛苦的状态。

3.固定动物。

将动物固定在手术台上，以避免动物在手术过程中的移动。

4.体表消毒。

在手术区域进行局部消毒，以防止感染。

5. 做出胸骨切口。

在胸骨两侧做出1-2cm的胸骨切口，用手术器械将胸骨分开，暴露出心脏。

6.找到冠状动脉。

用吸引管或者类似的器械将心包囊抽吸，暴露出心脏表面。

紧邻左心室肌肉的左前降支是心肌梗死的常见发生区域。

7.梗死诱导。

用细导管或者相似的器械将一根可以封堵冠状动脉的丝线或者微球导入至冠状动脉中，使其堵塞。

这一步骤可以模拟冠状动脉的阻塞引发心肌梗死。

8.恢复心脏正常血流。

待梗死产生一段时间后（一般为30分钟-60分钟），再次将导管或器械取出，恢复冠状动脉的血流。

9.缝合胸骨。

将胸骨进行缝合，确保伤口能够愈合。

10.外科处理。

术后外科处理，如用抗生素进行预防性治疗，避免可能的感染。

研究人员可以通过观察心肌梗死后的心电图变化、心肌组织的病理切片等方式来评估心肌梗死的程度与发展。

总的说来，大鼠心肌梗死动物模型是一种常见的研究心肌梗死发病机制的实验模型。

通过制造大鼠心肌梗死动物模型，研究人员可以更好地模拟心肌梗死的发生，寻找新的治疗策略和探索其发病机制。

当然，在制作动物模型时，需要严格遵循相关伦理规范和动物保护法律法规，确保动物的利益和权益不受损害。

此外，动物模型只是研究的一部分，结合体外实验和临床数据，才能更全面地了解心肌梗死的病理机制及治疗方法。

大鼠急性心肌梗死模型的制备

实验流程： 1、麻醉动物 2、建立人工气道，机械通气 3、开胸，暴露心脏，结扎左冠状动脉 4、心电图验证损伤电流，确认心肌梗死 5、关胸，抗感染处理 6、附加实验，可练习制备心动过缓模型
实验步骤：
大鼠称重后用戊巴比妥钠溶液(30 mg／kg)或水合氯醛(300 mg／kg) 腹腔注射，麻醉后仰卧固定于手术台板上。手术野皮肤去毛，碘酒、酒精消毒，铺消毒巾。同时连心电图机，用肢体导联进行心电图监测。
实验步骤：
迅速将心脏复位，逐层缝合；
最后一针先穿针打虚结，通过此间隙用注射器抽出胸腔内气体，恢复胸腔负压后关胸。待动物苏醒后拔除气管插管，以7／0 无损伤逢合针将切口处相邻两个气管软骨环拉拢后闭合气管。（如为经口腔插管则不需缝合。）术后每天肌肉注射青霉素80万U，预防感染3 d。
关键要点： ① 剪开心包，挤压右侧胸腔使心脏暴露于胸腔外，或用小药匙将心脏小心移出胸腔。 ② 以左冠状静脉主干为标志，于左心耳根 Байду номын сангаас下方2mm处进针，在肺动脉圆锥旁出针。观察心电图，待其稳定后双重结扎前降支。此后的心电图变化才能说明冠脉结扎情况。
附加实验——大鼠缓慢心率模型制备
结扎冠脉成功后，可不关胸，继续进行缓慢心率模型制备练习实验方法：
用棉签蘸40％甲醛，于上腔静脉根部与右房交界处，接触1min，损伤窦房结，观察心电图，如出现心率减慢，提示模型成功，其余关胸步骤同前。
（因心梗可出现缓慢心率，此结果判定不排除是心肌梗死引起的，仅供练习。）
实验步骤：颈部正中切开气管并插管，用动物人工呼吸机进行人工呼吸；潮气量 30 ml／kg，机械通气频率60-70次／min。人工呼吸下，在胸骨左缘扪及心脏搏动处纵行切开皮肤约3 cm，逐层分离皮下组织、肌肉，于第4肋间开胸，剪开心包，暴露心脏、血管。

大鼠心肌梗死动物模型的制备

ＲｅｕｔＳｒｉａａｅｏｈａｄｌａ０．ＬＥＦｏｅＡＭ［ｇｏｐｄｃｅｓｄｓｇｉｃｎｌ（＜０Ｏ，ｏａｅｓｌｓｕｖｖｌｒｔｆｔｅｒｔｍｏｅｓ％ｗ６ＶｆｔｈｒｕｅｒａｅｉｎｆａｔＰｉｙ．１）Ｃｍｐｒｄｗｔｈｈｍｇｏｐ．ＬＳｎ－ｄ／ｔｏｅＡｒｕｅｒａｅｉｎｆａｔ（＜００ｉｔｅｓａｒｕｈＶＰａｄ１ｐｄｆｔＭＩｇｏｐｄｃｅｓｄｓｇｉｃｎｌＰ－ｈｉｙ．５，Ｐ＜０Ｏ），ｂｔｈＶＰ．１ｕｅＬＥＤｔ
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（．ｉｇａｎｒｌＨｏｐｔｌ＆ＳｃｎａｉｔｔｄＨｏｐｔｌｆＱｎｄｏＵｎｖｒｉ，Ｑｉｇａ６０２Ｃｉａ１ＱｎｄｏＣｅｔｓｉａａｅｏｄＦｃｌａｅｓｉｉｇａｉｅｓｔｉａｏｙｎｄｏ２６４，ｈｎ；２ＬｂｒｔｒｆＣｒｉｌｇ，ＣｉａＰＡＧｅｅａｓｉｌｅｊｇ１０５Ｃｉａ．ａｏａｏｙｏａｄｏｏｙｈｎＬｎｒｌＨｏｐｔ，Ｂｉｎ０８３，ｈｎ）ａｉ
率６％；０手术组ＬＥＶＦ较假手术组显著降低（００）与假手术组比，术组的ＬＳＰ＜．１；手ＶＰ明显下降（００） ±ｄ／Ｐ＜．５，ｐｄ显著降低（００）而ＬＥＰ明显升高（００）病理组织学检查可见瘢痕形成，维组织增生。结论本ｔＰ＜．１，ＶＤＰ＜．１；纤

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估1 对象与方法?1. 1研究对象清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只，体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实验动物中心提供。

随机分为假手术组和心肌梗死组。

1 .2 研究方法?1 . 2. 1 MI 模型的建立[2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3〜5 ml/100 g ，呼吸频率60次/min，吸呼比1? : ?1。

左侧胸部备皮，消毒手术区域，经胸骨左缘第4 肋间开胸，钝性分离肌肉，以眼科开睑器撑开肋间肌切口，暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥与左心耳之间距主动脉根部2~3 mm处，用7-0眼科无创缝合针，穿过前降支深部连同一小束心肌一并结扎。

根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉结扎成功。

逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。

大鼠清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。

术后连续3 d 予以青霉素40 万U 腹腔注射以预防感染。

假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。

1. 2. 2 超声心动图检查[4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹腔注射麻醉，用Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12探头，频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和M型超声测量左室收缩末径（LVSd、左室舒张末径（LVDd、舒张期左室后壁厚度（PWd、舒张期左室前壁厚度（AWd Ml组为梗死区室壁厚度）、左室射血分数（LVEF和短轴缩短率（FS）,分别计算梗死区变薄指数（BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度）和非梗死区增厚指数（ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度）。

所有参数均在3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。

1．2．3 血流动力学检查[5]3%戊巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射麻醉，气管切开插管，保持呼吸道通畅。

大鼠心肌梗塞模型

大鼠心肌梗塞模型
大鼠：用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)行腹腔注射麻醉，麻醉满意后置于手术台，四肢及头部仰卧固定于手术台上，四肢皮下连接心电图电极，记录标准Ⅱ导联心电图，颈部皮肤备皮消毒，胸骨上窝上正中切开皮肤0.5cm，向上钝性分离推开下颌下腺，剪除气管前肌肉，使气管在没有任何拉钩牵引的情况下能充分显露，彻底止血后于第2～3气管环间行气管横行切开，注意不要切断气管软骨环，切口长度不超过气管周径的1/3，擦干其内分泌物后插入气管插管，深度为0.5～1cm。

连接空气呼吸机进行人工控制呼吸，呼吸频率90次/min，潮气量10～12ml，呼吸比设为1:1。

左前胸去毛，消毒铺巾，顺肋间隙方向于胸骨左旁第3～4肋间切开皮肤，长约1cm，逐层分离皮下组织、肌肉，于2～3肋骨间撑开进胸，向右上方推开胸腺，可暴露心脏及大血管根部，切开心包，轻挤大鼠胸廓，将心脏挤出，有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部，线缝针的进针深度控制在0.1cm，宽度为0.1～0.2cm；回纳心脏入胸廓，待动物的数十次心动周期后，收线打结；观察数分钟后，彻底止血后逐层关胸。

关胸过程中于切口内放置排气管，关胸毕，抽空胸腔积气后拨除。

恢复大鼠自主呼吸，拨出气管内插管，清除气管内分泌物，气管切口及颈部切口开放，不作缝合。

手术过程中分开胸后、缝针后、结扎后和关胸后四个点记录心电图变化；合格动物2周及6周后均复查心电图。

以上手术均在严格无菌条件下进行。

术后肌内注射青霉素钠2×10U/d，连续5d抗感染。

大鼠心肌梗死模型建立方法选择及心电图表现

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中国实验动物学报 2011 年 12 月第 19 卷第 6 期
Acta Lab Anim Sci Sin ， December ， 2011 ， Vol． 19. No． 6
spectively． There was no myocardial infarction and the survival rate was 100% in the sham operation group． ECG ： QRS-T wave displayed an intersection “M ” shape in the sham group and before left coronary artery ligation． The R wave and T wave fused into one large tent-like single wave after the left coronary artery ligation ，and without visible ST segment． Histopathological changes of myocardial infarction were seen at 4 weeks after operation． Conclusions tip ，and all ECG showed no visible ST segment in the rats．【Key words 】 Rat ； Model ，myocardial infarction ； Electrocardiogram It is a novel method to establish myocardial infarct model that the suture is placed about 2 mm distal to the horizontal line of left atrial appendage

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估【摘要】目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死模型。

方法SD大鼠经氯胺酮麻醉后，经口人工呼吸，开胸结扎左冠状动脉前降支。

4周后行超声心动图、血流动力学和组织病理学检查。

结果①心电图和组织病理学检查证实，成功建立了大鼠急性心肌梗死模型，梗死面积40%~45%（平均42%）；②与假手术组比较，心肌梗死大鼠左室收缩末径、左室舒张末径和非梗死区增厚指数明显增加（P＜0．01），左室后壁、左室前壁、梗死区变薄指数、左室射血分数和左室短轴缩短率显著降低（P＜0．05，P＜0．01）；③心肌梗死大鼠动脉收缩压、舒张压、左室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均低于假手术组（P＜0．01），心率和左心室舒张末压高于假手术组（P ＜0．01）；④两组大鼠左、右心室实际和相对重量以及胶原容积积分之间的差异有统计学意义（P＜0．01）。

结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简单、重复性好、结果可信。

【Abstract】Objective To develop a steady and reproducible myocardial infarction(MI) model in rats.Methods SD rats were anaesthetized with ketamine.After linking with respiration machine，left anterior decending coronary artery was ligated.Echocardiogram，haemodynamics and histopathology were done four weeks after ligation.Results ①The model of MI was established successfully and proved by electrocardiogram and histopathology.Infarct sizes were 40%~45%(average 42%).②Compared with sham operation group，MI rats had higher left ventricular systolic diameter，left ventricular diastolic diameter and non-infarcted region thickening index (P＜0．01)，and lower posterior wall diameter，anterior wall diameter，infarcted region thinningz index，left ventricular ejection fraction and fractional shortening (P＜0．05，P＜0．01).③Systolic blood pressure，diastolic blood pressure，left ventricular systolic pressure and the maximum rising and dropping rates of left ventricular pressure decreased，while heart rate and left ventricular end-diastolic pressure increased after MI.④There were significant differences in left ventricular actual weight，right ventricular actual weight，left ventricular relative weight，right ventricular relative weight and collagen volume fraction between sham operation group and MI rats (P＜0．01).Conclusion This experiment provided an easy way to establich the MI model，which was reproducible and credible.【Key words】Coronary artery;Myocardial infarction;Modelanimal;Rats心肌梗死（myocardial infarction，MI）是21世纪医学亟待解决的难题之一[1]。

急性大鼠心肌梗死实验模型的制备ppt课件

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3 结果讨论两只实验鼠死亡原因讨论： ①号实验鼠在结扎冠状动脉时心脏停止跳动死亡 ②号实验鼠在关闭胸腔时呼吸停止死亡考虑以下可能原因： ⑴. 鼠龄过大，适应手术能力较适龄鼠差，多篇文献提出实验鼠体重以250 ±25 g 为宜，本次实验鼠体重分别为① 290g及②360g;
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⑵. 实验鼠体重较实验前预期的要重，麻醉剂有使用过量的可能，实验鼠术中出现呼吸抑制；
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1.7 术后抗感染及护理大鼠本身具有比较强的抗感染能力，但是预防感染有利于促进术后恢复，并且良好的术后护理可以提高动物模型的生存率。因此，术前所用手术器械均要用75％酒精浸泡消毒。术后腹腔注射青霉素80万U。待大鼠麻醉清醒后即可与其糖水和饲料，无须禁食。术后可适量补充能量。冬天应注意保嗳。
⑺. 呼吸机频率和潮气量没有掌握好； ⑻. 时值冬季，气温较低，手术操作时间较长，
开胸后实验鼠体温丧失较大，存在低体温、手术和麻醉多重打击。
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大鼠心肌梗死实验模型的制备
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背景
有关心肌梗死模型的制作，国内外采用结扎、药物、冷冻、栓塞、电凝等方法制作兔、大鼠、狗等不同动物的心肌梗死模型，但大多数学者认为结扎法复制的心肌梗死模型与心肌梗死实际发病过程更符合。
由于临床大多心肌缺血或心肌梗死都是一渐进性过程，会不断发生缺血或梗死后再灌现象。而冠状动脉结扎法能人为地仿造临床心肌梗死过程的冠状动脉梗死，其梗死部位、分布范围相对一致，病理生理、生化改变与临床心肌梗死更相似。
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1. 2 试验材料和药品 : 10%水合氯醛溶液、青霉素注射液、碘伏、小动物呼吸机、心电图机、大白鼠手术板、 5ml注射器2个、7号或4号针头、眼科剪、手术灯、眼科开睑器、小镊子、小弯钳、缝针、缝合线(6 - 0线)、小无菌棉签

心肌梗死动物模型比较分析

心肌梗死动物模型比较分析[摘要]：心肌梗死(myocardial infarction,MI)是心血管病中最危重的急性事件，近年来的发病有明显的增高趋势，是21世纪医学亟待解决的难题之一[1]。

在心血管疾病研究中，动物模型被广泛用,研究目的不同则所需的动物模型平台亦不同。

MI动物模型的建立对于研究人类MI的病理生理变化、心电生理改变以及评价各种治疗方法具有重大价值。

近年来，通过干细胞移植修复受损心肌成为研究热点，大量临床试验及动物实验研究表明干细胞移植可改善心肌梗死后的心脏功能，而建立心肌梗死动物模型则成为深入研究干细胞移植修复心肌损伤的重要基础。

结扎左前降支制作MI模型,是一个被广泛接受近于成熟的制模方法。

但随着实验技术的发展,它的一些操作步骤、评价指标等方面仍需进一步改进。

因此，本文将回顾MI动物模型的进展情况，及主要探讨研究细胞移植研究用心肌梗死动物模型的选择。

[关键词] 心肌梗死；动物模型；细胞移植；WWHLMI家兔；不稳定斑块1 目前已有报道的常用心肌梗死动物模型目前国内外常用的建立心肌梗死动物模型的方法主要分两大类：(1)采用各种方法直接造成冠状动脉狭窄或堵塞，其试验周期短，可以观察梗死后再灌注对心肌的损害。

（2）诱发冠状动脉粥样硬化形成狭窄与梗死，其试验周期长，死亡率较高。

通过开胸结扎不同部位冠状动脉建立急性心肌梗死模型已沿用多年[2-5] 结扎大鼠冠状动脉在医学实验中已得到公认，最常用的心肌梗死动物模型。

国外多采用Jons法[6-7]，即在自主呼吸下，开胸迅速挤出心脏，结扎冠状动脉。

这种方法需要在极短的时间内完成操作，技术要求高，难度大，难以掌握；而且由于心脏移位，容易导致血流动力学紊乱和心律失常等并发症；开胸后小动物呼吸无法得到保证，因而手术死亡率极高。

此后Fisbein[8]和Pfeffer[9]在Johns法的基础上略加改进，应用小动物呼吸机维持呼吸，明显提高了手术的成活率，但是又增加气管切开的的创伤，延长手术时间势必会增加感染机会。

反复冷冻与冠状动脉结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型方法的比较

ｔｈｅｍｏｄｅｌｒａｔｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＦｏｒｔｙＳＤｒａｔｓ（２０ｍａｌｅｓａｎｄｆｅｍａｌｅｅａｃｈ）ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓ：ｃｒｙｏｉｎｊｕｙｒｇｒｏｕｐ
ｌｉｇａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｍｏｄｅｌｓｏｆａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ
ＷＡＮＧＹａｎ－Ｆｅｉ，ＺＨＡＯＷｅｎ— ｐｉｎｇ。ＣＡＯＸｕｅ．ｂｉｎ，ＣＵＩＬｅｉ，ＪＩＡＸｉｎ — ｗｅｉ，ＹＡＮＧＭｅｉ
不同，并比较大鼠死亡率及心功能指标。方法将４Ｏ只成年ＳＤ大鼠随机分为２组：冷冻组、结扎组。冷冻组大鼠
无呼吸机支持下采用浸过液氮的铜金属棒反复３次，每次５Ｓ冷冻左室前壁。结扎组大鼠在呼吸机支持下开胸结
化，两组心功对冠状动脉结扎法，反复冷冻法制作心肌梗死模型方法
对大鼠损伤小，死亡率低，并且不需应用呼吸机支持，值得进一步研究探讨。
【关键词】冷冻法；动物模型；冠状动脉；心功能；呼吸机【中图分类号】Ｒ３３【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７１－７８５６（２０１３）１２－００３１－０４

两种大鼠心肌梗死模型的比较研究

两种大鼠心肌梗死模型的比较研究童敏;贺亮;刘文亮;周胜华【摘要】目的通过对大鼠冠状动脉前降支结扎法和超声波凝固法制作心肌梗死模型进行对比研究,探讨两种心梗模型的优缺点.方法 45只SD大鼠,随机分成假手术组(n=15)、冠状动脉结扎组(n=15)、超声刀组(n=15).假手术组:冠脉左前降支只套线,不结扎；冠状动脉结扎组:用620缝合线结扎大鼠左冠状动脉前降支；超声刀组:用超声刀凝固冠状动脉左前降支.术后4周分别测定大鼠血清肌酸磷酸激酶(CK)及其同功酶(CK-MB),乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转换酶(AST)水平,并行心肌HE染色进行病理组织学分析,探讨两种模型的优劣.结果与冠脉结扎组比较,超声刀组血清CK、CK-MB、LDH、AST活性均无明显差异(P＞0.05);HE染色显示:两组心肌组织均出现凝固性梗死,炎细胞浸润,继而有肉芽组织长入,最后形成瘢痕.冠状动脉结扎组大鼠术后死亡率50％,超声刀组大鼠术后死亡率20％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论二者均可有效复制心肌梗死模型.超声刀凝固法操作简单,死亡率低,能建立稳定的大鼠心肌梗死模型,可用于心肌梗死的相关研究.%Objective To compare two rat models of myocardial infarction established by coronary artery ligation and harmonic scalpel method for their advantages, disadvantages and applications. Methods Sixty Sprague Dawley rats were randomly divided into sham-operated group, coronary artery ligation group and harmonic scalpel group. In the latter two groups, myocardial infarction was induced by ligation of the left anterior descending coronary artery and coagulation of the artery, respectively. Four weeks after the operations, the rats were sacrificed to measure the serum levels of CK, CK-MB, LDH and AST, and the hearts were collected for histopathologicalobservation with HE staining. Results The rats in the sham-operated group and coronary artery ligation group showed no significant differences in serum levels of CK , CK-MB , LDH or AST. Histologically, the myocardial tissues of the two models all showed coagulation necrosis and inflammatory cell infiltration, with granulation tissue ingrowth in the infracted tissues and scar formation. The mortality rate of the rats in coronary artery ligation group was 50% at 4 weeks, ' significantly higher than that of the harmonic scalpel group (20%, P<0.05). Conclusion Coronary artery ligation and harmonic scalpel method are both effective means to produce rat models of myocardial infarction. The latter method can establish a more stable model for studying the mechanism and treatment of myocardial infarction.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2011(031)011【总页数】3页(P1941-1943)【关键词】冠状动脉结扎法;超声刀;心肌梗死【作者】童敏;贺亮;刘文亮;周胜华【作者单位】中南大学湘雅二医院动物实验室,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院麻醉科,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院胸外科,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院心内科,湖南长沙410012【正文语种】中文【中图分类】R758.22在心肌梗死（myocardialinfarction，MI）［1-2］发病率和死亡率不断上升，严重威胁人类健康的今天，成功制备心肌梗死动物模型是我们进行相关研究的基础。

大鼠心肌缺血模型制备方法的比较及改进浅析

型制备方法的选择、具体操作过程、影响因素等进行综合评述，为研究者选择合适的动物疾病模型提供参考。
【关键词】冠心病；心肌缺血；动物模型；方法；心脏；手术【中图分类号】Ｒ一３３【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７１－７８５６（２０１７）０７－００９８－０４
ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ，ａｒｅｏｆｐｒａｃｔｉｃａｌｖａｌｕｅａｎｄｈａｖｅｂｅｅｎｃｈｏｓｅｎｂｙｍａｎｙｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｏｒｆｐｈａｒｍａｃｏｌ０ｇｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｆｄｒｕｇｓｏｒｆｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｉｓｓｔｉｌｌｌａｃｋｉｎｓｏｍｅｄｅｔａｉｌｓｏｆｔｈｅｉｒｏｐｅｒａｂｉｌｉｔｙａｎｄｐｒａｃｔｉｃａｂｉｌｉｔｙ．Ｗｅｒｅ — ｓｅｌｅｃｔｅｄｔｈｅｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｌｉｇａｔｉｏｎｓｉｔｅ，ｓｉｍｐｌｉｉｅｆｄｔｈｅｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｏｄｅｌｓ，ａｎｄ

两种大鼠心肌梗死模型的比较研究

ｅｚ￣］ｎａＪ．Ｖａｃｎ，０７２（０：６７５４．ｃｉｅ２０，５３）５３６４
ｐｉｒｕｎａｖｏａｎｒｎｈａｅｉｅａｅｌＥ］ｅｒｙｈｍａｌｅｌｒａｄｂｏｃｉｌｐｔｌｌｅｓＪ．Ｒ — ｍａｈｉｌ
Ｅ］ＢｏＳａｌｎｃｔＤＥ．Ｗｉｉｕｖｉａｃｒｈ４ｒｗｎＪＤ，ｔｌｅｈｋｌｂｒｓｒｅｌｅｆｅａｄｄｌｎｏｔ
关键词：状动脉结扎法；冠药物注射法；丙肾上腺素；肌梗死；鼠异心大
中图分类号：３Ｒ３文献标识码：Ａ文章编号：０７５３（０００ — ０９０１０ —０８２１）４０１ —７
ｓｉＲｅ，０５６：３．ｐｒｓ２０（）１５
［］Ｃｅ，Ｌ７ｈｎＨｉＹ，ＬｉＺ，ｅ１ｒｐｒｉｓａｄｄｓｅｎｔｎｏｔａ．Ｐｏｅｔｎｉｍｉａｉｆｅｓｏ
Ｈ５ｉｓｓｉｌｅｕｉｇａｎｌｅｚｕｂｅｋｉｇａＮｌｖｒｅｓａｄｄｒｎｉｆｎａｏｔｒａｎｍｉｒ一ｕｏｔｎｕ
ｖａｆｅｚｉｓＪ．Ｍｅｈｄｌｉｌ２ｏ，３：５９．ｉｎｉｌｎａｖｒ［］ｎｕｕｔｏｓＭｏｏ，０８４６８ —７Ｂ
［］ＢｉｅＪ５ｅｌＨ，Ｆｒａ，Ｈａ，ｅ１ＡｖａｎｌｅｚｇａｒｒＪｎＡＭｔａ．ｉｉｆｎａＡｎｕ
（．南省新乡医学院附属中心医院，南新乡４３０；．南省新乡医学院形态实验室，南新乡４３０）１河河５００２河河５００

大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｎｇｒａｔｍｏｄｅｌｓｏｆｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，
杨涛涛，肖颖，奚赛飞，马毅超，方明笋，寿旗扬，潘永明，陈民利
（浙江中医药大学动物实验研究中一５＇／比较医学研究中心，杭州３１００５３）
【摘要】目的
优化和改良大鼠心肌梗死模型的构建和评价方法，提高模型的可靠性和稳定性。方法取
血危险区面积随术后时间的延长明显减少（Ｐ＜０．０１）；ＴＴＣ与依文思蓝双重染色相对ＴＴＣ染色能明显观察到心肌
缺血危险区和梗死区范围。结论观准确。优化和改进后的大鼠心肌梗死模型，提高了动物福利，制备和评价方法更加客
【关键词】大鼠；心肌梗死模型；方法；改良【中图分类号】Ｒ３３【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７１ — ７８５６（２０１４）０２－００４６￣６
ｄｏｉ：１０．３９６９．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１．７８５６．２０１４．００２．０１１

大鼠心梗模型

• 关胸过程中于切口内放置排气管(用小儿头皮针的软管自制)，关胸毕，抽空胸腔积气后拨除。
• 试停呼吸机，大鼠恢复自主呼吸后，拨出气管插管，充分清除气管内分泌物。
• 根据文献[l”一]和本实验室条件建立模型:健康成年雄性sD大鼠，体重 200一2509，术前禁食12h，不禁饮。3%戊巴比妥钠30m叭g腹腔注射麻醉大鼠，起效后仰卧位固定于鼠板。用0号婴儿喉镜片经口气管插管，插入16G静脉留置针，接小动物呼吸机控制呼吸。确定插管位置深度正确后，口角挂线固定导管，根据血气结果，呼吸参数设定为潮气量4一6ml，频率60一70次/分，吸呼比1:1。
• 备皮，消毒，铺单后，在左侧腋下和剑突连线偏上Icm做一斜切口，长度约为2.scm，以心脏搏动最强点为中心。依次钝性分离深浅筋膜、胸大肌、前锯肌，显露肋骨，可见心脏暗影。
• 将皮肤与各层肌肉做一个荷包缝合备用。充分止血后，由第3、4肋间入胸(心搏最强点偏上一肋)，钝性分离肋间肌，分离肋间肌范围应适当，不能太接近胸骨以免造成大出血。
• 待大鼠出现吞咽动作时，拔除气管插管。术毕肌肉注射青霉素10
• 活体取出心脏，迅速取材，去除左、右心房及右心室，冲洗后4%多聚甲醛溶液固定，沿左室长轴由心尖至心底做厚切片，将左室分为6片，石蜡包埋切片
• 用6一OProlene线缝针在距左心耳下缘 1mm处，左冠状静脉主干附近的室间沟内，将LAD连同少量心肌组织一起缝扎，进针深度控制在1~2mm，宽度为2~3mm
• 用0号婴儿喉镜片经口气管插管，插入16G 静脉留置针，接小动物呼吸机控制呼吸。
• 动物的选则：健康雄性SD大鼠，建议使用250g左右体重的，耐受力强。而且小一点的胸壁较薄，开胸容易。麻醉：我用的是10% 水合氯醛，感觉效果还不错，20分钟左右待大鼠呼吸平稳即可手术，2~3个小时后苏醒。剂量 0.4~0.45ml/100g体重，这个也有个体差异，要大家自己摸索一下。这里给大家一些建议：1.麻药刚发挥作用的时候大鼠状态不平稳，这时候不要急于作手术，多观察一会儿。2. 麻醉程度宜浅不易深，如果麻药打浅了，只要大鼠没有过分挣扎，可适当局麻，千万不可反复补麻药，我的经验这样的情况即使手术成功大鼠也活不长。关于呼吸：这是关系到手术成功与否的最主要因素。麻醉药会使大鼠呼吸道产生分泌物，我一般都是在麻醉大鼠后腹腔注射阿托品0.1mg/只，但据我观察我们学校动物中心的大鼠分泌物不多，不用药也行，曾经买过河南一批大鼠，分泌物极多，必须用药。气管插管我用的是临床上的静脉输液套管针，创伤小，目前术后没发生过呼吸道感染情况。关于呼吸机：我也用过江西特力公司的小动物呼吸机，但发现不太适用于大鼠这样的小动物，潮气量的调节非常粗略，不好控制。现在我用的是我们学校自己生产的呼吸机，其实就是一个简易的空气泵，我自己又改装了一下，现在是医用氧和空气的混合气，呼吸频率60/分钟，潮气量3ml/100g。这里由于条件限制，所以潮气量是比较粗略的，而且氧气含量也无法测量，但是据我的经验，给纯氧对大鼠的损伤比不上呼吸机还大，只要有呼吸肌支持，适当给些氧气辅助一下，大鼠成活不成问题。关于手术切口：我是在胸壁正中剪开皮肤，然后在胸骨左侧1CM左右钝性分离皮下组织和肌肉，最后用血管钳撑开胸腔，助手用自制小拉钩拉开胸壁。这样的好处是每一层的开口不在一个位置，关胸后胸腔自然就闭合，不会漏气。我是在心脏搏动最明显处打开胸腔，一般就是从剑突向上两个肋间。关于心包膜：有的时候不破心包膜心脏也能挤出来，但大部分时候还是要破的，打开胸腔后会看到在心脏下方有脂肪样东西随着心脏跳动而活动，用眼科弯镊夹起这层膜一拽心包膜就开了，这时候助手从胸部的左右压迫胸壁，术者从腹部轻轻一压心脏就出来了。关于结扎：针和线都是以前的师兄传给我的，总之是很细的那种，型号我就说不太清楚了，结扎方法也和坛子里其他人写的一样，找到冠状静脉前降支，针穿过心肌一起结扎住，这里就不再罗嗦了。关于感染的问题：大鼠抗感染能力还是很强的，所以术前术中的消毒问题一般注意就行，术后抗生素在天气不热的情况下不给也行，但是还是给些抗生素好，可以减少炎症造成的胸腔粘连。以上是我想到的一些体会，如果有不明白的地方，愿意和大家交流。

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常见大鼠心肌梗塞模型建立方法对比
心肌梗塞是危害人类健康的主要疾病之一，主要是由于某支冠状动脉持续缺血，其所支配的心肌发生不可逆转坏死而形成的病理过程。

90%以上的心肌梗塞是由于冠状动脉粥样硬化病变基础上血栓形成而引起的，较少见于冠状动脉痉挛，少数由栓塞、炎症、畸形等造成管腔狭窄闭塞，使心肌严重而持久缺血达1小时以上即可发生心肌坏死。

心肌梗塞的发生常有一些诱因，包括过劳、情绪激动、大出血、休克、脱水、外科手术或严重心律失常等。

美国每年约有150万人发生心肌梗塞。

而在中国，近年来心肌梗塞发生率呈明显上升趋势，每年新发至少50万名患者，现存至少200万名患者。

为了更好地筛选有效治疗心肌梗塞的药物并研究心肌梗塞的发病机理，实验人员常以大鼠、兔和实验用小型猪来建立标准化的心肌梗塞模型。

相对于其他动物，大鼠有许多优势：
1.大鼠的品系纯正，组内差异较少；
2.大鼠饲养成本低，造模前后管理较容易；
3.大鼠的冠脉系统侧支循环比较少，结扎后易出现一个比较固定的缺血区，能很大程度上提高造模的成功率；
4.大鼠心肌梗塞模型手术较小，单人就能操作。

下面我们将就较常见的几种大鼠心梗造模方法来进行一一详细介绍。

a.传统冠状动脉结扎法
冠状动脉结扎是最常选用的大鼠心肌梗塞造模方法，其具体操作步骤为：将大鼠用氯氨酮麻醉后接上小动物呼吸机，经左侧第4肋间剪开皮肤，钝性分离肌肉组织，打开胸腔并剪开心包膜，挤压出心脏，在左心耳与肺动脉圆锥之间穿线，结扎左冠状动脉前降支（于分支的起点处约1～2mm），用Ⅱ导生理记录仪记录心电
图，心电图ST段弓背抬高示心肌梗塞造模成功。

然后迅速将心脏放回胸腔，随即缝合胸腔及皮肤。

假手术组（阴性对照组）除不结扎冠状动脉外，其余操作与手术动物相同，术后给予庆大霉素局部处理。

b.异丙肾上腺素注射法
除冠状动脉结扎法之外，药物注射法也常用于大鼠的心肌梗塞模型的建立。

将大鼠用1%的戊巴比妥钠20～25mg/kg体重给予大鼠腹腔注射麻醉，直接按5mg/kg 体重，皮下注射4%异丙基肾上腺素（ISO），或直接将药物注入腹腔均可造模，每天注射1次，连续注射2-8天，可造成心梗、心衰、冠状动脉痉挛。

一般在注射后4-8周发病。

c.反复冷冻法
沿大鼠胸骨左缘前外侧第4肋间进入胸腔打开，充分暴露心脏，用浸过液氮的直径6mm铜棒充分接触左室游离壁，持续时间5s/次，随即闭合胸腔，待自主呼吸恢复正常后，按分组情况再次原位反复共3、5次或8次进行心肌冷冻损伤。

这三种大鼠的心肌梗塞模型的建立方法各有优缺点，通过对这三种方法所建立疾病类型、手术实验技术要求、实验室仪器要求、术后死亡率及造模稳定性等方面的对比，我们对比总结了这三种造模方法(如表1所示)。

表1.三种心肌梗塞造模方法对比
模型类型造模类型实验技能要求仪器要求死亡率造模稳定性
冠状动脉前降支结扎法急性心梗高需要小动物
呼吸机
较高高
冷冻法急性心梗较高需要小动物
呼吸机
较高低
药物注射法慢性心梗低无要求低较高从上表可见，冠状动脉前降支结扎法与冷冻法类似，均会造成大鼠的急性心肌
梗塞，且对实验技术的要求较高，均涉及到大鼠的麻醉、开胸、肋间分离等多个实验步骤。

特别是结扎法，因为结扎部位的确定和伤口缝合均需要一定的手术经验，不熟练者会有术后大鼠气胸的风险，造成术后大鼠死亡率偏高，但经过相关培训和练习后，结扎法相对于其它造模方法造模稳定性更高，心肌梗死较彻底且梗死面积的大小与结扎部位的高低呈正相关，是全球公认的大鼠心肌梗塞造模方法。

相比之下，冷冻法亦能造成大鼠的急性心肌梗塞，且操作方法较较结扎法简便，但由于术后发病与否与冷冻部位及冷冻时间有直接关系，较难保证每次造膜的稳定性，且容易造成组内发病程度差异过大。

与以上两种方法不同，以异丙肾上腺素诱导为代表的药物注射法，主要是诱发慢性心肌梗塞，一般在注射后4-8周发病，该方法的优点在于只要选择合适的药物剂量，注射后一般可保证较高的大鼠生存率，且不需要小动物呼吸机等特殊的仪器支持，简便易行，容易操作掌握。

但这种方法造成的梗死区域内偶尔可见有未坏死心肌,梗死灶主要分布在左心室壁和室间隔上,尤以靠近心尖部为重。

实验人员可根据自身实验需要及实验室自身硬件设施来综合选择最适宜的心肌梗塞模型大鼠的建立方法。