甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒说明书

甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒说明书

Elecsys Anti-HAV

Elecsys 2010/MODULAR ANALYTICS E170

11820605 100人份

【名称】

通用名：甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒

英文名：Elecsys Anti-HAV

汉语拼音：Jia xing gan yan bing du kang ti dian hua xue fa guang jian ce shi ji he

【使用目的】

用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的甲型肝炎病毒总抗体。甲型肝炎病毒抗体检测有助于检测过去或现在的甲肝病毒感染，观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010和MODULAR ANALYTICS E170免疫测定分析仪。

【概述】

甲肝病毒是一种没有胞膜的RNA病毒。它属于细小的核糖核酸病毒家族。至今，仅1种人血清型和7种基因型被记述。病毒衣壳由三种蛋白 (VP1-VP3) 组成，在病毒颗粒表面形成一个免疫决定簇结构，它被高度表达在所有基因型。在注射疫苗后或正常感染后这个结构诱发免疫反应1。

甲型肝炎是最普通的急性病毒性肝炎，通过消化道传播。这种肝炎不会发展成慢性肝炎，病毒也不会持续存在组织中2。

甲型肝炎病毒是引起病毒性肝炎爆发流行的最常见原因(10-20%)3。

甲型肝炎感染发作时总的甲型肝炎抗体呈阳性。在自然感染后，抗HAV-IgG抗体能够终生存在，如果组织再次感染会对机体起到保护作用4。

现在已经有甲肝病毒疫苗和甲肝和乙肝混合疫苗5。在注射甲肝疫苗后, 抗HAV-IgG抗体两周后就可以检测到。在完全免疫过程中，这种保护作用可以持续很多年6。免疫保护作用对于抗体值没有限定，但是抗HAV浓度在10-20IU/L以上对机体有保护作用。

抗HAV抗体检测用于检查甲型肝炎病毒存在或过去感染过。同时也用于观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。

【原理】

竞争法：总检测时间18分钟。

·第1步孵育：50µl标本；标本中的抗-HAV与HAV抗原结合。

·第2步孵育：加入生物素化的和钌标记的抗HAV抗体以及链霉亲和素包被的微粒，HAV抗原上仍然游离的位点被占据。形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和

素间的反应结合到微粒上。

·反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

【试剂主要成份】

M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml：

链霉亲和素包被的微粒：0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg微粒。含防腐剂。

R1：HAV抗原（灰盖），1瓶，10ml：

HAV抗原(人)：40U/ml（罗氏单位），HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐

剂。

R2：生物素化的抗HAVAg抗体；Ru(bpy) 32+标记的抗HAV Ag－Ab（黑盖），1瓶，

10ml：

生物素化的抗HAVAg单克隆抗体(鼠)：0.25ug/ml；Ru(bpy) 32+标记的抗HAVAg

单克隆抗体(鼠)：0.15ug/ml；HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐剂。

Cal 1 定标液1（白盖），2瓶，1.0ml/瓶：抗HAV阴性人血清, 含防腐剂。

Cal 2 定标液2（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶, 抗HAV（人）浓度约46IU/L在人血清中,

含防腐剂。

【预防措施和警告】

仅用于体外诊断。

采用正确的预防措施，遵照实验室试剂使用规定。

所有废物的丢弃应遵循当地法规的要求。

定标液（Cal 1和Cal 2）制备使用的献血者血清经FDA批准的方法检定HB S Ag、HCV 抗体、HIV1＋2 抗体均为阴性。

含有Anti-HAV(定标液2)和HAV-Ag(人,R1)的血清使用β-丙稀内酯和UV射线低温消毒。

但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人标本一样仔细处理。一旦泄漏，应遵循权威机构的指令7，8。

超过保质期后，不能再使用。

【试剂使用】

试剂盒为即用型,提供的试剂瓶与分析系统是相容的。

Elecsys2010：定标物Cal 1和Cal 2只有在定标过程中才被放在分析仪上(在20-25︒C)。定标物用完后,应立即盖好瓶盖并储存在2-8︒C。确保在打开盖子后没有定标物粘在盖子上。因为可能会挥发，每瓶定标液定标次数不宜超过5次。

E170：除非在E170上定标需要全部容量，否则将部分准备使用的定标液装入空的

带标签的有盖小瓶（CALSET），并将提供的标签贴在分装的其余小瓶上。储存在2－8︒C。每瓶分装物只用作一次定标。

所有必要的操作信息,可分别通过试剂的二维条码读取。

【储存和稳定性】

存放在2－8℃。

为了确保使用前自动混匀期间有足够量的磁性微粒, Anti-HAV试剂盒（M,R1, R2）储存,切莫倒置。

2－8℃下未开封，可稳定至标明的保质期。

M，R1 ，R2试剂开封后： 2－8 ℃, 8周；

在E170和 Elecsys2010上： 20－25℃，8周；

Cal 1和Cal 2开封后：2－8 ℃, 8周；

在Elecsys2010上（20－25℃）：最多5小时

在E170上：一次性使用

注意：定标液要垂直保存。确保定标液不污染瓶盖。

【标本采集和准备】

标本只有按照下列方法收集、检测才能被接受。

血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。

血浆：肝素(Li-,Na-)、K3－EDTA或枸橼酸钠抗凝。

关于使用含分离胶试管的血清的稳定性的资料,要注意试管制造商提供的资料。

（标准:血清值的批内回收率 90-110%或斜率 0.9-1.1 + 相关系数>0.95 + 批内干扰±2×分析灵敏度(LDL)）。

标本在2－8℃可稳定7天，-20℃可稳定3个月。标本可冻融6次9。

冻融样本和含沉淀的标本使用前需离心。

不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。

确保病人样本、定标物、质控物在测试前温度达到室温20-25℃.

因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在两小时内测试完。

【检测步骤】

提供的材料：

货号：11820605，100人份的Elecsys 抗HAV试剂盒包含：

· M 链霉亲和素包被的微粒

· R1 HAV Ag

· R2 生物素化的抗HAV Ag抗体，三联吡啶钌标记的抗HAV Ag抗体

· Cal 1 定标液1

· Cal 2 定标液2

· 2×6 小瓶标签

需要的材料（未提供）：

· Elecsys 抗HAV质控品1和2，每个8×1.0ml, 货号11876350

· Elecsys 甲型肝炎稀释液，2×15ml样本稀释液，货号11361252

· Elecsys 定标液小瓶，2×56带盖空瓶，货号 11776576

·常用实验室设备

· Elecsys 2010或MODULAR ANALYTICS E170

Elecsys2010分析仪需要:

· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）,6×380ml，货号11662988

· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），6×380ml，货号11662970

· Elecsys 添加剂液（SysWash），1×500ml，货号11930346

· Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean），货号11933159

· Elecsys 2010反应杯（Assay Cup），60×60，货号11706802

· Elecsys 2010吸样头（Assay Tip），30×120，货号11706799

MODULAR ANALYSIS E170分析仪需要:

· Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,1×2L,货号12135019

· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）,1×2L,货号12135027

· Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货号03023141