农药残留分析

名词解释
农药残留：由于农药得应用而残存于生物体、农产品与环境中得农药亲体及其具有毒理学意义得杂质、代谢转化产物与反应物等所有衍生物得总称。

(P1)
农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物产生急性或慢性中毒。

(P2) 可提取残留：可提取残留就是农药残留分析得对象。

(P1)
残留半衰期：农药初始残留量至消失降解一半所需得时间。

(P2)
固相萃取（SPE）：指液体样品中得分析物通过吸着作用被保留在吸着剂上，然后用一定得溶剂洗脱得过程。

(P27)
衍生化：一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构得物质。

最大残留限制(MRLs)：指由食品营养标准委员会推荐得，食品或动物饲料中允许得农药残留物得最大浓度（mg/kg）(P3)
可接受得日摄入量(ADI)：指在一生中，对消费者健康没有可感知危险得日摄入量。

单位为：mg/kg/day。

溶剂萃取：根据溶解性差异，选用对残留农药溶解度大得溶剂，将分析物从样品基质中提取出来得方法。

（P23）
净化（纯化）：就是指通过物理得或化学得方法除去提取物中对测定有干扰作用得杂质得过程。

（P38）实验室样品：从群体采集得送达残留分析实验室得样品材料
测定：把通过参照比较农药标准品得量（外标法与内标法）测算出试样中农药残留得量(P5)
结合残留：农药亲体或代谢产物与土壤中得腐殖质、植物得木质素、纤维素通过化学键或物理结合作用，牢固结合形成得残留物。

(P2)
检测样品：实验室样品经过缩分减量或经过精制后得样品。

固相微萃取法：它实际就是利用固相提取得方式实现对样品得分离与净化，但所用得固相材料及其分离机制不同。

（P44）
单残留方法：就是定量测定样品中一种农药得残留量得方法。

农药残留动态：农药残留动态就是多方面因素综合作用得表现：农药本身物理化学性质，使用方法，施药时期，作物、土壤得类型与性质及环境条件、(P10)
多残留方法：就是在一次分析中同时测定一种以上农药残留得方法。

浓缩：通过减少样品溶液中得溶剂或水分而使组分得浓度升高。

富集：利用液-固萃取得方法浓缩某种组分。

填空
1、气相色谱得特点：分析速度快、分离效率高、选择性高、适用范围广
2、固相萃取得操作程序：活化吸附剂、上样（吸附）、洗涤（去除杂质）、洗脱与收集
3、常用得定量分析方法：标准曲线法、直接定量（外标法、面积归一化法与内标法）
4、层析柱主要有：弗罗里硅土柱、氧化铝柱、硅胶柱、活性碳柱、其她填料层析柱子
5、液相色谱得特点就是：高效、高速、高灵敏度、高度自动化
6、气相色谱仪常用得检测器有：火焰离子化检测器（FID）、火焰光度检测器（FPD）
电子捕获检测器（ECD）、氮磷检测器（NPD）、原子发射检测器
7、检测器得评价指标：噪声、漂移、灵敏度、线性范围与动态范围、最小检测量
8、气相色谱柱有：填充柱、毛细管柱（开管型与填充型）
简答
1、简述农药残留有哪些来源？（P2)
答：水，空气，土壤，环境因子，人为因子
2、农药残留分析得复杂性体现在哪些方面？
答①残留水平低分析需分离与测定得物质就是在ng(10-9g)、pg(10-12)g甚至fg(10-15g)水平。

②分析过程得复杂性就是由农药历史得未知性与样品种类得多样性造成。

③农药品种得不断增多对农药多残留分析提出了越来越高得技术适应性要求。

3、农药残留分析方法得可靠性如何衡量？
答：农药残留分析方法直接决定残留分析结果得真实程度。

所以应尽可能采用国际或国家认可得标准方法，但就是在很多情况下，残留分析实验室使用非标准方法也可以保证方法得可靠性。

无论何种方法，对其可靠性得确认有灵敏度、准确度、精密度、等要素。

方法灵敏度：单位浓度（质量）/相应量；
方法得准确度：测定值与真值（假定）之间符合程度得度量；
方法得精密度：测定值之间得一致程度。

4、简述农药残留风险性评估得构成（P342）
答：（1）危害鉴定收集与评价可能由某种化学品引起得疾病或健康伤害类型得数据，以及发生此类疾病或健康伤害得暴露条件。

（2）剂量-反应评价描述一种化学品得暴露量与毒害程度得定量关系，其数据或者来自于动物实验或者来自于暴露得人群
(3)人群暴露评价描述暴露于某种化学品得人群性质与大小，暴露得程序与时间，这种评价考虑到暴露得过去、现在以及可以预测得未来
(4)风险性特征根据以上三部分得资料与分析，确定人们经历任何一种与某种物质相关得毒性得可能性。

5、简述农药残留分析得方法(P4)
答：有两种，单残留分析方法与多残留分析方法。

单残留分析方法就是测定样品中一种农药（包括其具有毒理学意义得杂质或降解产物）残留得方法。

多残留分析方法就是在一次分析中能够同时测定样品中一种以上农药残留得方法。

6、简述农药残留田间试验得内容（P9)
答：a、农药残留动态为研究农药在农作物、土壤、田水中残留量变化规律而设计得试验，就是评价农药在农作物与环境中稳定性与持久性得重要指标。

b、施药因素与最终残留量水平相关性试验为评价各种施药因素与收获得农产品以及土壤中得残留量相关性而设计得试验。

7、比较HPLC与SPE得异同点
答：两者得原理相同
8、简述农药残留风险性评估得步骤（P343）
答：(1)测定农药毒性，建立ADI
(2)确定农药残留得最大膳食摄入量
(3)摄入量与可能接受水平比较
(4)得出风险性评价结论
9简述选择农药残留分析方法就是要特别考虑哪些问题？（P5)
答：①农药得理化特性、送检样人得要求；
②单残留或多残留方法；
③最大残留限量、方法检测限、总误差；
④分析方法得有效性；
⑤分析时间与费用。

10、简述农药残留分析得程序(P4)
答：分析程序：①样品采集②样品预处理③样品制备④分析测定
根据杀虫剂毒死蜱与溴氰菊酯得分子结构式特点，请设计一种蔬菜中残留量得检测方法（包括主要仪器、试剂与检测步骤
毒死蜱得测定
主要仪器设备：1、气相色谱仪：具有氮磷检测器(NPD) 2、电动振荡器
3、旋转蒸发器
4、离心机。

试剂：丙酮 、石油醚（60-90℃）：重蒸 、无水硫酸钠、活性炭、毒死蜱标样：≥99%
检测步骤：
1．试样得制备
取谷物实验样品经粉碎机粉碎，过20目筛后，制成谷物试样。

取蔬菜实验样品洗净，晾干，去
掉非食部分后剁碎或经组织捣碎机捣碎，制成蔬菜试样。

2．提取与净化
（1）蔬菜：称取蔬菜试样10g ，精确至0、001g ，用无水硫酸钠(因蔬菜含水量不同而加入量不同，
约50～80g)研磨呈干粉状，倒入具塞锥形瓶中，加入0、2～0、4g 活性炭(根据蔬菜色素含量)及80mL
丙酮，振摇0、5h ，抽滤，滤液放入250ml 离心分液漏斗中，加入30ml 5%无水硫酸钠与20ml 石油醚，
去掉下层，再加入20ml 石油醚，去掉下层，重复三次浓缩定容至5mL ，待气相色谱分析。

3、色谱条件
（1）色谱柱：HP-5（30m×mm×0、25um ）毛细管柱。

（2）气流：载气，氮气40mL/min ，空气0、7kg/cm2，氢气2kg/cm2。

（3）温度：进样口250℃，柱温240℃，检测器280℃。

4、测定
（1）定性：以毒死蜱农药标样得保留时间定性。

（2）定量：用外标法定量，以毒死蜱农药已知浓度得标准样品溶液作外标物，按峰高定量。

5、计算 m V h V E h X si si i i ⨯⨯⨯⨯=
21
溴氰菊酯
仪器 气相色谱仪附电子捕获检测器、 高速组织捣碎机、 电动振荡器、 高温炉
K －D 浓缩器或恒温水浴箱、具塞三角烧瓶 玻璃漏斗、10μL 注射器。

试剂
石油醚、丙酮、无水硫酸钠、层析中性氧化铝、层析活性炭、脱脂棉、溴氰菊酯 97、5%
检测步骤
1.提取 称取20g 经匀浆处理得样品于250mL 具塞三角瓶中，加入丙酮与石油醚各40mL 摇匀，振荡30min
后让其分层，取出上清液4mL 待过柱用
2.净化 用内径1、5cm 、长25～30cm 得玻璃层析柱，底端塞以经处理得脱脂棉，在中性氧化铝层上加
0、02～0、03g 层析活性炭粉 。

依次从下至上加入1cm 得无水硫酸钠，3cm 得层析用中性氧化铝，2cm
得无水硫酸钠，然后以10mL 石油醚淋洗柱子，弃去淋洗液，待石油醚层下降至无水硫酸钠层时，迅速
将样品提取液加入，待其下降至无水硫酸钠层时加入淋洗液淋洗，淋洗液用量30～35mL 石油醚，收集
滤液于尖底定容瓶中，最后以氮气流吹，浓缩体积至1mL ，供气相色谱用。

3. 测定 用具有ECD 得气相色谱仪。

色谱条件 色谱柱：玻璃柱3mm(内径)×1、5m 或2m ，内填充3% OV －101/Chromosorb W(AW －
DMCS)80～100目。

温度：柱温245℃，进样口与检测器260℃。

载气：高纯氮气流速140mL/min(GC －5A 型色谱仪)，其她型号仪器自选流速。

结果计算
用外标法定量，计算公式如下：
x s x Q m h V •••••=
s s x k V C h C
同时检测毒死蜱与溴氰菊酯得方法 仪器 HP6890气相色谱仪(美国安捷伦公司)、火焰光度检测器(FPD)、电子捕获检测器(ECD)；
食品粉碎机、RE ．52AA 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、T18型匀浆机(德国IKA 公司)；
KL512型氮吹仪(北京康林公司)、HH ．1型漩涡混合器(天津市富兰斯电子科贸有限公司)；
sHA —c 水浴恒温振荡器(常州国华电器有限公司)
试剂 蒸馏水；乙腈、丙酮(重蒸馏)、正己烷(重蒸馏)、氯化钠(140℃烘烤4 h)、滤膜(0．2斗m)； 铝箔；固相萃取柱；聚苯基甲基硅氧烷柱与聚甲基硅氧烷柱；毒死蜱、溴氰菊酯，且纯度≥96％。

操作步骤：
1.样品得提取 准确称取25 g 待测样品放入烧杯中，加入50ml 乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后，
用滤纸过滤，收集滤液至装有8 g 氯化钠得100 ml 得具塞量筒中，盖上塞子，剧烈振荡1 min ，在室温
下静置10 min ，使乙腈相与水相分层。

2.样品得净化 毒死蜱 从具塞量筒中吸取10 ml 得乙腈溶液，放入150 ml 得烧杯中。

在烧杯中加入丙酮
溶解样品，将其完全移至15 ml 得刻度离心管中，再用约3 IIll 得丙酮分3次冲洗烧杯，并转移至离心管，
最后定容至5 rnl 。

在漩涡混合器上混匀，供色谱测定。

如样品过于混浊，用滤膜过滤后，再进行测定。

溴氰菊酯 从具塞量筒中吸取10ml 得乙腈溶液，放入150 ml 得烧杯中。

将弗罗里矽柱依次用5ml 丙酮：
正己烷(体积比10：90)、5 ml 正己烷预淋条件化，当溶剂液面到达吸附层表面时，立即倒入样品溶液，用
15 ml 刻度离心管接受洗脱液，用5ml 丙酮一正己烷溶液(体积比10：90)刷洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，并
重复1次。

将盛有淋洗液得离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于5 ml ，用正己
烷准确定容至5 ml ，在漩涡混合器上混合，分别移入2个2ml 得自动进样器得样品瓶中，待测。

3、质量测定 毒死蜱残留量测定用气相色谱仪得FPD 测定有机磷农药残留量。

采用2根色谱柱：
A 柱50％聚苯基甲基硅氧烷柱(30 m ×0．53 mm ×1．0斗m)，
B 柱100％聚甲基硅氧烷柱(30 m ×0．53 mm
×1．5斗m)。

柱温为程序升温：150℃保持2 min ，以8℃／min 升温至200℃，保持5 min ，以10℃／min
升温至250℃，保持10 min 。

进样口220℃；检测器温度250℃；载气(N ：)流速lO ml ／min ； 氢气流速
75 ml ／min ；空气流速100ml/min 。

不分流进样，样品l 式2份，双塔进样器自动进样。

溴氰菊酯 用气相色谱仪得ECD 测定农药残留量。

采用2根色谱柱：
A 柱100％聚甲基硅氧烷柱(30 m ×0．25 mm ×0．25斗m)，
B 柱50％聚苯基甲基硅氧烷柱(30 m ×0、25ml
×O ．25ul)。

柱温为程序升温：150℃保持2 min ，以6℃／min 升温至270℃，保持23 min 。

进样口200℃；
检测器温度320℃；载气(N2)流速l ml／min。

分流进样，分流比l：10，样品1式2份，双塔自动进样器同时进样网。

4、质量控制
样品分析前先绘制标准曲线，添加O．05、O．15、O．50ug／ml上述农药得标准样品溶液于蔬菜样品中，作加标回收率试验，每一浓度作3个平行样。

加标回收率为70％～120％，RSD<20％。

以双柱保留时间定性，以色谱柱B获得得样品溶液峰面积定量。