叶绿体色素提取、分离及理化性质
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实验五 叶绿体色素的提取、分离及其理化性质
一、目的及要求
掌握叶绿素的分离、提取方法； 了解叶绿体色素的种类、性质和功能；
二、实 验 原 理 叶绿体色素？ 叶绿体色素分离原理？ 叶绿体色素性质？
（一）叶绿体色素：
叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
胡萝卜素
类胡萝卜素
C32H304 酸盐
3 +2
20H39
C32H304
叶绿
三、材料及试剂
新鲜的植物叶片。 80%乙醇、3、醋酸铜结晶、无水硫酸钠、1N盐酸。 量筒，新华滤纸，大试管一支，长滴管，剪刀。
四、操作步骤
提取 ： 称取1g左右的鲜叶
研磨 过滤 色素提取液
层析：
四、操作步骤
研磨提取叶绿素（80%乙醇）
↓过滤、洗研钵及残渣
↓
↓
2乙醇提取液 余下的色素提取液
↓
↓↓ ↓↓
加入1N 纸层析 荧光 皂化反应 光破坏
（脱镁叶绿素） ↓
↓
分离色素
取代
↓
扫描光谱
荧光
酮取代反应
四. 结果及分析
对实验现象作好详细记录， 并加以解释 请对皂化反应现象做出合理解释，而不
是单单用反应方程式来表示
（三）叶绿体色素性质？
物理性质：不溶于水，易溶于有机溶剂 化学性质：皂化反应，置换反应
功能：吸收光能、电子传递、光能转化素溶液
叶绿素的吸收光谱
叶绿素的荧光现象
置换反应
皂化反应:
、 是双羧酸的酯可发生皂化反应 一个羧基被甲基酯化 另一个羧基被叶醇基酯化
2：1
叶黄素
3：1
叶绿体在细胞中的分布及结构
类囊体膜的结构及功能
类胡萝卜素的结构式
（二）叶绿体色素分离原理？
色素分离的方法有多种，纸层析是最简 便的一种。当溶剂（有机推动剂）不断 从纸上流过时，由于混合物（叶绿素提 取液）中各种成分在固定相（滤纸纤维 素所吸附的水分）和流动相（有机推动 剂）间具有不同的分配系数，所以移动 速度不同，经过一定时间后，可将各种 色素分开
一、目的及要求
掌握叶绿素的分离、提取方法； 了解叶绿体色素的种类、性质和功能；
二、实 验 原 理 叶绿体色素？ 叶绿体色素分离原理？ 叶绿体色素性质？
（一）叶绿体色素：
叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
胡萝卜素
类胡萝卜素
C32H304 酸盐
3 +2
20H39
C32H304
叶绿
三、材料及试剂
新鲜的植物叶片。 80%乙醇、3、醋酸铜结晶、无水硫酸钠、1N盐酸。 量筒，新华滤纸，大试管一支，长滴管，剪刀。
四、操作步骤
提取 ： 称取1g左右的鲜叶
研磨 过滤 色素提取液
层析：
四、操作步骤
研磨提取叶绿素（80%乙醇）
↓过滤、洗研钵及残渣
↓
↓
2乙醇提取液 余下的色素提取液
↓
↓↓ ↓↓
加入1N 纸层析 荧光 皂化反应 光破坏
（脱镁叶绿素） ↓
↓
分离色素
取代
↓
扫描光谱
荧光
酮取代反应
四. 结果及分析
对实验现象作好详细记录， 并加以解释 请对皂化反应现象做出合理解释，而不
是单单用反应方程式来表示
（三）叶绿体色素性质？
物理性质：不溶于水，易溶于有机溶剂 化学性质：皂化反应，置换反应
功能：吸收光能、电子传递、光能转化素溶液
叶绿素的吸收光谱
叶绿素的荧光现象
置换反应
皂化反应:
、 是双羧酸的酯可发生皂化反应 一个羧基被甲基酯化 另一个羧基被叶醇基酯化
2：1
叶黄素
3：1
叶绿体在细胞中的分布及结构
类囊体膜的结构及功能
类胡萝卜素的结构式
（二）叶绿体色素分离原理？
色素分离的方法有多种，纸层析是最简 便的一种。当溶剂（有机推动剂）不断 从纸上流过时，由于混合物（叶绿素提 取液）中各种成分在固定相（滤纸纤维 素所吸附的水分）和流动相（有机推动 剂）间具有不同的分配系数，所以移动 速度不同，经过一定时间后，可将各种 色素分开