黄芩中黄芩苷的提取分离和鉴别

黄芩中黄芩苷的提取分离和鉴别
黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的根，又名空心草、黄金茶。

味苦、性寒。

能泻实火，除湿热，止血，安胎。

治壮热烦渴，肺热咳嗽，湿热泻痢，黄疸，热淋，吐、衄、崩、漏，目赤肿痛，胎动不安，痈肿疔疮。

黄芩根含黄芩素、黄芩甙、汉黄芩素、汉黄芩甙和黄芩新素等多种黄酮类化合物，还含苯甲酸、β-谷甾醇等。

黄芩茎叶中含黄芩甙。

黄芩主要药理作用有抗炎、抗变态反应、利尿、利胆、降胆固醇、抗血栓形成、缓解哮喘等作用。

黄芩总黄酮为中成药“银黄注射液”、“三黄片”中主要有效成分，用于治疗呼吸道感染、菌痢和传染性肝炎等症。

一、实验目的
1．掌握从黄芩中提取黄酮类化合物的提取分离原理和操作方法；
2．熟悉黄酮类成分及黄芩苷的主要理化性质和一般鉴别方法。

二、仪器与试药
（一）仪器
SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器
ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱烧杯（1000mL、100mL）乳钵
电炉子移液管（10mL、5mL）离心机三角烧瓶（250mL）
（二）试药
黄芩粗粉盐酸温度计乙醇镁粉硅胶 CMC-Na 黄芩苷对照品
α-萘酚试液浓硫酸氯化氧锆甲醇柠檬酸
三、主要成分的结构与性质
R R
H 黄芩素 H 汉黄芩素 葡萄糖醛酸 黄芩苷 葡萄糖醛酸 汉黄芩苷
四、实验原理：
黄芩苷及其他黄酮类化合物在热水中溶解度大，在强酸性条件下易析出总黄酮沉淀，利用此性质从黄芩中提取总黄酮。

利用黄芩苷和黄芩素两者在95%乙醇中溶解度的差别而可将黄芩苷和黄芩素彼此分离。

五、实验内容： （一）总黄酮的提取
20分钟，过滤
20分钟，过滤
沉淀 直接在离心筒中用热水洗两次（第一次不搅，洗去沉淀表面上的酸液；第
二次加入热水把沉淀搅匀，离心后，倾去上清液）
O
O
OH
O
H RO
沉淀
60-70℃干燥2小时
总黄酮
（二）黄芩苷与黄芩素的分离
总黄酮
20mL乙醇转溶在三角烧瓶中，
（注1乙醇同上法浸泡10分钟，抽滤
醇液（同注1）沉淀
再用10mL95%乙醇直接在滤器上分次洗涤
沉淀数次，至滤液颜色变浅
醇液（同注1）沉淀
抽干，80℃干燥30分钟
黄芩苷粗品
（二）黄芩苷的精制
乙醇回流20分钟，趁热抽滤
15分钟，趁热抽滤
（三）黄芩苷的鉴别
1．化学检识：
（1）盐酸-镁粉反应：取1mL乙醇样品液于试管中，加入浓盐酸1mL，再加镁粉少许，观察颜色变化。

（2）M olish反应：取1mL乙醇样品液于试管中，加入α-萘酚试剂少许，振摇，沿试管壁加浓硫酸0.5mL，观察两层溶液界面的颜色变化。

（3）氯化氧锆-柠檬酸反应：在样品溶液中加入2%氯化氧锆甲醇溶液，如呈黄色则可能有C3-OH 或C5-OH存在，再加入2%柠檬酸甲醇溶液（在必要时要放置或水浴加热）黄色褪去，示无C5-OH 但有C3-OH。

2．薄层鉴别：
吸附剂：含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板
展开剂：a、醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)
b、苯-甲酸乙酯-甲酸（75:24:1）
对照品：黄芩苷对照品
显色剂：喷1％三氯化铁乙醇溶液
结果：与对照品色谱相应的位置上，显一相同的暗绿色斑点。

六、实验结果
1．记录黄芩苷的提取分离精制方法。

2．详细记录定性反应结果。

3．绘制色谱图，并计算R f值。

4．总结实验过程中遇到的问题和解决方法。

七、思考题
1．黄酮类化合物是如何分类？
2．黄酮类化合物定性反应机理是什么？。