两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较

两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较

朱武军(贵州省贵阳市第六人民医院检验科550005)

【摘要】目的比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测人类免疫缺陷病毒抗体(抗一HIV)的一

致性。方法收集45份室间质评样本，分别用两种方法进行检测。结果化学发光法检测样本的吸光度／临界值

比值明显高于ELISA法，两种方法对抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25．002，P

法检测抗一HIV较ELISA法敏感性高、假阳性少，可以推广应用。

【关键词】化学发光法；酶联免疫吸附试验；人类免疫缺陷病毒；对比研究

中图分类号：R446．61；R512．91 文献标志码：B 文章编号：1672—9455(2009)06—0455—02

艾滋病即获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒

(HIV)引起的严重疾病，迄今仍无法有效治疗，除了行为干预

等社会学手段外，阻断输血传播，及时发现HIV感染者并采取

针对性措施，是目前疫情控制的重要技术手段。由于HIV进

入人体后需要经过一段时间才会产生HIV抗体(抗一HIV)，这

一时间医学上称为“窗口期”。艾滋病研究的重点领域之一就

是尽可能缩短“窗口期”，而达到这一目的最重要的手段就是高

质量的艾滋病诊断试剂盒和敏感性高的检测方法。化学发光

标记方法是近年来发展起来的一种新的非放射性免疫分析技

术。为比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测

抗一HIV的一致性，本文对同一份标本采取两种方法进行检测，

现将结果报道如下。

1材料与方法

1．1 标本来源所有标本均来自贵州省临床检验中心2006

～2008年全省室间质评样本，一20℃以下保存。

1．2仪器化学发光仪KPS-KM(北京科美东雅生物技术有

限公司生产)；酶标仪Muhiskan MK3(芬兰)；洗板机(芬兰雷

勃Wwllwash Plus)。

1．3试剂ELISA法检测试剂由北京万泰生物药业股份有

限公司提供，批号120080101；化学发光法试剂为北京科美东

雅生物技术有限公司生产，批号20070920。

1．4方法随机抽取室间质评10份阳性标本分别以1：5稀

释作为待测标本，与另外35份标本，共计45份标本分别用两

种方法进行检测，均严格按照各自的试剂盒说明书操作。

1．5统计学方法用SPSSl2．0统计软件进行数据处理，数

据资料比较采用Y2检验。

2 结果

在45份标本中，化学发光法和ELISA法均为阳性29份，

其样本吸光度／临界值(OD／CO)范围分别为2．379～179．100

和1．633～28．375；两种方法均为阴性的标本12例，其OD／CO 值范围分别为0．077～0．525和0．053～0．617；在化学发光法为阳性而ELISA法为阴性的3例标本中，ELISA法的样本

OD／CO值范围为0．607～0．849，而化学发光法的OD／CO值范围为1．230～1．787。结果见表1。

表1 两种方法对45份样本抗一HIV检测结果(”)

由表1可以看出，化学发光法的敏感性高于ELISA法，两

种方法抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25．002，P< 0．01)。

3讨论

艾滋病是由HIV感染所引起的一种获得性免疫缺陷性疾

病，可通过性传播、血液传播和母婴传播途径感染人类，检出

抗一HIV是艾滋病诊断的重要条件，而诊断HIV感染是艾滋病

预防控制工作的重要组成部分。因此，建立敏感、实用的检测

方法，对于监测、诊断或血液筛查以及控制艾滋病的流行显得

尤为重要。目前艾滋病诊断技术主要包括病毒检测和病毒特

异性抗体检测等。由于HIV病毒分离、病毒载量测定、病毒核

酸测定以及病毒抗原检测等方法难度大、费用高，因而抗体检

测是常规检测方法，包括ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接

免疫荧光试验和斑点印迹在内的检测技术用于筛选实验，免疫

印迹试验用于确认实验。由此可见，提高敏感性、特异性，缩短

窗El期和方法简便、快速，是HIV检测试剂未来发展的主要

趋势。

白1985年第1代抗HIV检测试剂问世至今，HIV血清

学检测试剂已经发展到第4代。但使用第4代试剂对艾滋病

病毒抗体进行检测，仍然有2～3周的窗口期。此外，由于把抗

宣石曲瓞一荟士浊包的击田休全

原和抗体同时包被在反应板上存在着相互干扰的可能，影响了

免疫反应的特异性。另外，从方法学上来讲，这种基于ELISA

的分析方法，灵敏度终归是有限的[1]。本实验结果表明，化学

发光法检测样本的OD／CO比值明显高于ELISA法，对于抗

体效价较低的弱阳性血清样本，化学发光法具有明显优势，可

以大大缩短“窗V1期”，最大可能地避免漏检，降低窗El期导致医院感染的风险，早期发现疾病，对防治艾滋病等传染病有着

更大的技术优势。而且该技术与国外普遍采用的管式发光法

不同，首创板式发光法，具有高通量的特点，更加适合我国国

情。目前，该方法的不足之处是试剂成本比较贵，但随着该技

术逐步实现产业化，试剂成本有望大幅降低。由于化学发光法

是测定发光强度的变化率，从而决定被测物质的浓度，不受黄

疸、溶血及脂血影响，因此其假阳性率较低[z]。该法具有高灵

敏度、宽线性、反应快速、影响因素少、结果准确等优点，其在免疫学检验方面的应用日益受到人们的重视。相信在不久的将

来，化学发光分析技术将在艾滋病检测领域占有越来越重要的

地位，以进一步提高抗HIV的检出水平。

(志谢：感谢贵阳市第五人民医院检验科提供部分检测

样本。)

参考文献

[1]吕传臣，马雪梅，曾毅．人类免疫缺陷病毒(HIV)检测技

术的研究进展[J]．临床和实验医学杂志，2006，5(4)：421—

423．

[2]王巧莲．化学发光法与ELISA法检测乙肝标志物结果比

较[J]．包头医学院学报，2006，22(1)：82—84．．

(收稿日期：2008一11—25)