血型复检规则

4℃NS洗涤6次
吸出上清液 （放散液）
再次离心
与AC反应，离心看 结果
证明有A抗原存在
Ac 二次
PC放 2+
OC放 0
吸收放散试验
PC OC（对照）
人-A
4℃ 1h
离心吸出上清
立即离心
56℃热放散 10min
4℃NS洗涤6次
吸出上清液 （放散液）
再次离心
放散液中加入 AC，4 ℃过夜
Ac IS
4℃过夜
结果显示：A抗原阴性，与卡式结果不一致。 分析：考虑是否是亚型抗原由于某些抗原位点的缺失，与某 些单克隆血清反应，与某些单克隆不反应。
换一个厂家的抗A、B血清
ABO亚型----案例1
换用上海血生的抗血清检测 正定 反应条件 -A IS 多次 4℃*30min 0.5+ 0.5+ 1+ -B 4+ 4+ 4+ Ac 1+ 1+S Bc 0 0 Oc 0 0 反定 自身c 0 0
ABO亚型----案例2
病例介绍：CCU患者 634582 男，58岁，入院诊断为冠心病、高血 压，无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。
正反定型不一致，首先排除 不规则抗体。
抗体筛查阴性，排除 ABO系统以外的抗体。
ABO亚型----案例2
试管法复查
正定 反定 -B 4+ 4+ 4+ Ac 3+ 3+ Bc 0 0 Oc 0 0 自身c 0 0
血型复检规则 及案例分析
武汉亚心 2014.5.8
正确的血型鉴定是 保证临床输血安全的首 要条件。
复检规则
• 仪器不能成功判读 • 正定型<4+和（或）反定型<2+ • 正反定型不一致 • RhD阴性
仪器不能成功判读
不能判读原因 反应孔为空 细胞过少 细胞过多 混合视野或纤维蛋白（正定型实验） 顶端线型或纤维蛋白（反定型） 溶血或黄疸反应 不确定反应或未成功评级结果 错误液面 柱中检测到气泡 找不到反应孔 光线太暗 光线太强 功能超出范围 缩写 EW FC TMC MF FIB HEM ? WLL BUB WNF LTL LTH OUT
H抗原强弱：O>A亚/B亚 > B > AB亚型 > A1 > A1B
PC
抗-H 2+W
OC
3+S
BC
2+
A1BC
1+
反应结果介于Bc和A1Bc之间 此鉴定目的主要与B（A）相区别：B（A） 与抗H呈强阳性反应3-4+，相当于O细胞反 应强度。
ABO亚型----案例1
综上所述：红细胞上有很弱的A抗原，正常B抗原，血清中有不规则抗A1。
反应条件
-A IS 多次 4℃*10min 2+W 2+ 2+S
A抗原减弱，血清中有不规则抗A? AB的亚型？ AxB?或B(A)？
B（A）
同cisAB的遗传方式相似，是一种罕见的ABO亚型， cisAB是在1964年发现 ，B(A)是在1985年发现； 分子机理：被认为是遗传学上的B型，在B基因基础上发生错义突变 ，由 于单碱基突变，变异的B基因具有编码双功能活性酶的能力，血清学除了 表现为B抗原特异性外，还表现为少量A抗原特异性。 血清学特点：较弱的A抗原和接近正常的 B抗原特异性，血清中有较强的 抗-A。
IS
二次
0
0
0
0
2+
2+s
0
0
0
0
ABO正反定型不一致
原因 类型
多凝集 额外抗原 正定型 获得性B 直抗强阳性
出现几率
无 无 少
血型物质增多 抗原减弱或缺失
疾病原因 亚型 抗体减弱或缺失 年龄因素 丙球减少或缺乏 自身抗体 额外抗体 假凝集 亚型不规则抗体 同种抗体
无
少 少 多 少 少 少 少 多
冷抗体效价测定：1：1024
1
4+
2
4+
4
4+
8
4+
16
3+
32
3+w
64
2+s
128
2+
256 512 1024
1+s 1+ 1+
2048 4096
0.5+ 0
结论：A型，冷自身抗体导致正反定型不一致。
冷自身抗体
输血治疗：保温输注，血液加温、肢体保温
心外科手术：慎重选择
CPB 深低温、中低温、浅低温、常温 根据手术类型及复杂 程度决定
小妹妹
A型
AB3
冷自身抗体
病例介绍：CCU患者 679896 男，56岁，入院诊断为心梗，无输血史。 入院常规检测血型发现正反定型不一致。
弱阳性
抗筛阴性
冷自身抗体
试管法复查
正定 反定 -B 0 Ac 0.5+ 0 Bc 3+ 2+ Oc 1+ 0 自身c 1+ 0
反应条件
-A 二次 37℃*30min 4+
ABO亚型----案例1
洗涤后重 做的结 果,0.5+ 排除假 阳性， 可以确 定为真 阳性。
患者DAT：阴性
试管法复查
ABO亚型----案例1
试管法复查结果，抗A、B血清厂家：南京欣迪 正定 反应条件 -A IS 多次 4℃*30min 0 0 0 -B 4+ 4+ 4+ Ac 1+ 1+S Bc 0 0 Oc 0 0 反定 自身c 0 0
1-4月份血型复检分析
类型 抗体减弱或无 EW（标本有凝块） EW（反定未加样） RhD阴性 例数（比例） 52（47.7%） 7（6.4%） 10（9.2%） 17（15.6%）
TMC FIB
FC 自身抗体干扰 抗筛阳性 HEM 假阳性 卡干涸 合计
4（3.7%） 5（4.6%）
1（0.9%） 2（1.8%） 7（6.4%） 1（0.9%） 2（1.8%） 1（0.9%） 109
A2C IS 多次
PS 0 1+W
-A1(阴性对照） -A（阳性对照） 0 0 4+ 4+
进一步排除AXB，AXB 与A2细胞不反应，此点 是鉴别B(A)与AXB最有 价值的依据之一
PC IS 多次
-A1 0 0
-A 4+ 4+ 红细胞与抗A1不反应， 符合B(A)特征。
ABO亚型----案例2
结论：根据以上血清学实验，初步定为B(A) 亚型，须经分子生物学实验进一步确认。
可定为A亚B型 与临床沟通：该患者曾在A院住过院，患者自己不清楚既往的血型。
与A院联系：该患者2012年在A院的血型鉴定为B型。?
为进一步确定A抗原的存在，进行吸收放散试验。
吸收放散试验的检测原理：由于A抗原很弱用常规血清学方法鉴定很弱或未 能鉴定出来时，可通过抗A血清来吸收待检红细胞，如果存在A抗原，就会 将血清中的抗A吸附在红细胞上，然后再将红细胞上的抗A放散下来，将放 散液再与A型试剂红细胞反应，如果有凝集，证实A抗原的存在，如果阴性， 不能证实A抗原的存在。同时用O细胞做阴性对照
MF抗原减弱
TMC：红细 胞过多
FC：红细胞 过少
4、亚型
反定型<2+
患者信息：8F 692527 男 1岁
原因：1、小于6个月的小儿
2、老年患者
3、低丙种球蛋白血症 处理：小儿，正定型为主； 对于2和3，加强反应（加大血清量； 放4度冰箱） 试管法复查结果： 反应条件 正定 -A -B Ac 反定 Bc Oc
反定型
ABO正反定型不一致
不规则抗体阳性
抗体筛查：阳性 抗体鉴定：抗-E Rh表型：CCee
反应条件
正定
反定
-A
IS 二次 4+ 4+
-B
4+ 4+
Ac
0 0
Bc
0 0
Oc
0 0
自身c
0 0
ABO正反定型不一致
不规则抗体阳性
抗体筛查：弱阳性 抗体鉴定：抗M 表型：NN型
反应条件 IS 二次
正定
-A 4+ 4+ -B 0 0 Ac 0.5 0.5 Bc 3+ 3+
抗体筛选
IS 2+ 2+ 2+S
二次 2+S 2+S 3+W 1+S
37℃*30min 0 0 0 0
确定为冷自 身抗体
自身细胞
1+
冷自身抗体
DAT 多抗 单抗IgG 单抗C3 结果 2+S 0.5+ 2+S
DAT阳性很强，主要以抗C3为 主，是冷自身抗体的一个特性， 考虑效价也很高。
卡（多抗） 4+
抗A
A1C A2C + +
抗A1
+ 0
结果如下 （由于A2C已过期，加做了阴性和阳性对照）
PS+A2C
0
抗A1+A2C（阴 性对照）
0
单抗A+A2C（阳 人源抗A+A2C 性对照） （阳性对照）
4+ 1+
阴阳对照相符，可判断该抗体为抗A1抗体
ABO亚型----案例1
用抗-H进一步验证亚型红细胞上的H抗原
仪器不能成功判读
正定型EW原因： 样本有凝块
反定型EW原因：频 繁出现，加样注射泵 漏气，加样不准，厂 家维护处理。
仪器不能成功判读
FIB原因： 抗凝不充分，纤维蛋白 析出。（外观可见）
试管法复 查，加盐 水可消除 干扰
HEM：标本溶血
高纤维蛋白血症或高球 蛋白血症。（外观不可 见）
仪器不能成功判读
结果显示：A抗原也很弱，与卡式结果一致。 分析：正定型AB型，反定B型，正反定型不一致，A 抗原很弱，可能为A亚B，如果是A亚B，红细胞上应 该是A亚型抗原而不是正常A抗原，反定中的抗A应该 是不规则抗A1，而不是抗A。 亚型试剂鉴定
ABO亚型----案例1
亚型 试剂
抗-A1 鉴定红细胞是A1抗原还是A亚型抗原 红细胞被抗AB凝集的程度
PC放 0
0
OC放 0
0
离心看结 果
未能成功吸收
ABO亚型----案例1
人-A吸收前后效价 对比：无明显差异 吸收前效价：16 吸收后效价：8 考虑人源抗A效价 太低，未能成功 被弱A抗原吸收， 但单抗A能被成功 吸收，放散阳性。
结论：A亚B，血清中有不规则抗A1。 输血或备血建议：O型或B型洗涤红；AB型血浆
反定
Oc 0.5 0.5 自身c 0 0
ABO正反定型不一致
小儿未产生抗体
6F 693571 女 1岁
以正定型判定血型
反应条件
正定 -A -B Ac
反定 Bc Oc
IS
二次
4+
4+
0
0
0
0
0
0
0
0
DAT阳性
DAT 多抗 单抗IgG 结果 2+ 2+
单抗C3
0
卡（多抗） 4+
反应条件 IS 二次
正定 -A 0 0 -B 0 0 Ac 3+ 3+s Bc 3+
体外实验：
不同温度下的反应情况：RT、30℃、32 ℃ 、35 ℃ 、37 ℃
外科决定该患者是否可以进行手术： 如不能，进行原发病治疗，待抗体低度下降后再安排手术。
如可以，手术CPB温度的选择
RH阴性
病例介绍：C28 患者 677312 女，55岁
DAT
0
IgM(试管）
0
IgG(抗人球卡） IgG(经典IAT）
抗-AB
抗-H
红细胞的H反应性程度
A2C
血清内有无抗A1抗体
ABO亚型----案例1
用抗-A1血清验证红细胞上 A亚型抗原 PC A1C（阳性对照） A2C（阴性对照）
抗-A1
0
+
0
确定为A亚型抗原，而不是A抗原
也有可能抗原太弱而出现假阴 性结果（不能排除）
ABO亚型----案例1
用A2C来鉴定血清中的是抗A还是抗A1
血型鉴定总测 试：6809，复 检例数109例， 复检率：1.6%
4+ 3+W
结论：D变异型 测序结果：与RHD*00101参考序列相比较，第1、2、3、5、6、7、8、9、 10外显子无突变，第4外显子491位点发生纯合子突变A>T.
复检记录
所有复检，均需在《血型复检记录表》 上进行登记，如有疑难血型，还需在 《输血相容性检测疑难标本实验记录 表》上进行试验记录。
ABO亚型----案例1
吸收放散，抗A血清的选择
1、单抗 效价高 ，需稀释，另需验证（能与亚型红细胞反应）
2、多抗（人源），可以用于亚型的鉴定和吸收，但效价低。
选择：上血 抗A，4倍稀释 献血者B型血浆作为人源抗A
吸收放散试验
PC OC（对照）
单-A
4℃ 1h
离心吸出上清
立即离心
56℃热放散 10min
抗血清 -A B（A) AxB 2+ w -B 4+ 4+ -AB 4+ 4+ -A1 0 0 -H 4+ w/0 A1 1-3+ w
试剂红细胞 A2 1+ 0 B 0 0 O 0 0
同
同
异
同
异
ABO亚型----案例2
-H
IS 二次
PC
3+w 3+
OC
3+w 3+
BC
1+ 1+s
ABC
1+ 1+
AXB与抗-H呈弱凝集， 而B(A)与抗-H呈强凝 集，排除AXB
反定 Oc 0 0 自身c 0 0
3+s
ABO亚型----案例1
病例介绍：CCU患者 693427 男，52岁，因反复胸痛收治入院， 入院诊断为冠心病、主动脉夹层、高血压，有痛风史，无输血史。 入院常规检测血型发现正反定型不一致。
分析：正定型非常弱，0.5+ 判断是真阳性还是假阳性 1、红细胞洗涤后检测 2、试剂卡重复试验 3、患者DAT试验
基因检测结果：B(A)02/O 700C>G
家系调查：患者儿子、姐姐、小妹和大妹
患者 血清型 基因型 B(A)
B(A)02/O
儿子 B(A)
BA02/O02
姐姐 AB3
A101/B(A)02
小妹 A
A101/O
大妹 AB3
A101/B(A)02
ABO亚型----案例2
儿子 B(A)
姐姐
AB3
大妹妹