生物药剂学 实验设计
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
不同促渗剂对新乌头碱透皮吸收率的影响
一、实验目的
研究不同促渗剂对乌头碱的透皮吸收率的影响情况.
二、实验依据
经皮给药是一种较为新颖的给药途径,其渗透能力除了和药物本身性质有关外,还与其它外界条件有一定关系,例如皮肤生理状态,促渗剂的选择,以及基质的pH等都可能影响经皮吸收药物的吸收率,本实验则主要为探究促渗剂对药物的影响.
三、仪器设备和实验材料
1.1 仪器
高效液相色谱仪,检测器,透皮扩散仪,超声波仪.
1.2 动物与试剂
实验动物:SD大鼠,7~8周龄,体重为180~200g,雌雄不限
试剂:那如一3巴布剂(主要有效成分为新乌头碱),成分为草乌、诃子、荜茇. 新乌头碱标准品
流动相:甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷为色谱纯;二乙胺、无水乙醇为分析纯;
促渗剂: 3%氮酮、3%氮酮+3%丙二醇、3%氮酮+ 3%薄荷脑、3%氮酮+ 3%油酸.
基质:CMC-Na、PVA、PVPK30、甘油
四、实验步骤(详细的操作方法)
1.1 动物离体皮肤的制备及保存
大鼠鼠皮的制备:将大鼠用10%氨基甲酸乙酯腹腔注射麻醉,背位固定于鼠台,用牙刷将含10%硫化钠的脱毛剂均匀地涂于大鼠的腹部毛上,约3~5min,鼠毛的颜色变黄后,用清水冲洗掉鼠毛,纱布擦干皮肤。
2日后处死,用剪刀将脱去毛的鼠皮取下,清理残余的皮下组织和脂肪,浸在生理盐水中,冰箱中1℃~2℃保存。
1.2 透皮扩散实验方法
1) 药物供试品溶液制备:首先要制备基质, 称取CMC-Na、PVA、PVPK30、甘油适量,加水溶胀过夜,50 ℃水浴搅拌20 min 至基质完全溶解,同温超声脱气泡得空白基质。
然后制备那如-3巴布剂提取物浸膏,分别向4个容量瓶加入制备好的提取物浸膏10ml,再向4个容量瓶加入等量完全溶解的基质,最后分别向4个容量瓶的溶液加入上述4种不同的促渗剂或混合促渗剂.
2)透皮扩散实验方法:透皮扩散试验仪的立式玻璃扩散池容积为7.0ml,扩散面积为2.92cm2。
向扩散池中加入生理盐水+PEG400水溶液(1:1)适量,水浴温度为(37±1) 度,磁力搅拌速度为300r /min ,将大鼠皮固定扩散池的给药室和接受池之间,渗透面积A为2.92cm2。
取供试品制剂(载药量60μg)涂于离体皮肤的角质层表面。
于规定时间点吸取5ml 接受液,同时补加相同体积的生理盐水。
3)含量测定:
①高效液相色谱条件色谱柱:Hypersil ODS C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动
相:甲醇一水一氯仿一二乙胺(70:30:1:0.2);流速:1.0ml/min;柱温:25℃;
检测波长:240nm.
②标准品溶液的配制:精密称量新乌头碱5.18mg,置于lOml容量瓶中,用二氯甲
烷溶解至刻度,作为母液,取适量配制成20μg/ml的标准品溶液.
③取在透皮扩散实验中得到的自接受液中得到的系列溶液0.5ml,以及标准品溶液
0.5ml,顺次进样,得到一系列色谱图.通过计算峰面积即可得到透皮扩散实验系列
溶液的浓度.
五、实验结果预测
加入不同促渗剂的同种药物,理论上其累计渗透量以及单位渗透量均应该有着较明显的差别.因为每组实验每组取样时间间隔一样,所以可以不考虑时间影响.
六、本实验的创新点
本实验用的是一般的透皮实验吸收方法,但本药物在促渗剂方面的研究还不是很完善,所以拟通过本实验,希望探究出更适合于本药的促渗剂,适用于不同人群的用药要求的促渗剂.
七、参考文献
1.祁艳,陈军,李磊,蔡宝昌.不同促渗剂对马钱子碱贴剂体外透皮吸收的影响.中国药,2011年第22卷第3期.
2. 刘志敏,牛欣,李海燕.蒙药那如一3巴布剂中新乌头碱的透皮速率测定.中华中医药杂志,2005年第2O卷第6期。