布病快检三项在布鲁杆菌病中的临床应用解析
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控制所）。
１．３测定方法
组９６．４％，见表２。
表２ ＳＡＴ、布病快检三项与确诊病例的符合率比较
所有检测方法均参照试剂说明书进行操作。参 照标准：ＦＰＡ试管型抗体检测参照试剂盒说明书，检 测值＜７２ ｍｐ为阴性结果，无抗布鲁氏菌抗体，７２～
９３
注：布病快检三项包括虎红凝集试验间接酶联免疫吸附试验荧 光偏振检测方法
三项联合检测解决了布病临床诊断中一直以来依赖 血清学检测３天出结果的现状，有利于提高实验的 敏感性和检测速度，可减少血清学实验稳定性差，难 以排除假阳性交叉反应干扰和判定的主观因素等缺 陷。 参考文献
［１］郑文艳，张专才，曲芬．２０例布氏杆菌病临床分析［Ｊ］．传染病
信息，２０１１，２４（１）：３７－３９．ＤＯＩ：１００７－－８１３４（２０１１）０１－００３７－０３．
ｓｅｍｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ
布鲁杆菌病（以下简称布病）是由布氏杆菌引 起的人兽共患的传染性疾病，广泛流行于世界各
地ｕ Ｊ，其实验室诊断多以布病血清学和血培养结果
１材料与方法 １．１样本来源
作为诊断依据，而这两项出结果时间分别为３ ｄ和
７
２０１４年１０月－２０１５年３月来黑龙江省农垦总 局总医院就诊的１７～７５岁布病患者３５０例，其中男 性２３３例，女性１１７例，平均年龄５７．８３岁。空腹采 集静脉血５ ｒｎＬ，分离血清。布病诊断参照《布鲁氏 病诊疗指南（试行）》（中华人民共和国卫生部２０１２ 年１０月８日）。本研究符合医学伦理学标准，受检 者均知情同意。在各组间年龄、性别及病程情况等 方面比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
・１４６・
・技术与方法・
布病快检三项在布鲁杆菌病中的临床应用
刘景瑶赵冬梅毕惠梅何晶晶
张柠
１５００８８哈尔滨，黑龙江省农垦总局总医院检验科 通信作者：刘景瑶，Ｅ－ｍａｊｌ：６０２０９６６９８＠ｑｑ．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４３９４．２０１６．０２．０１ １
【摘要】
目的探讨布病快检三项在布鲁杆菌病诊断中的临床应用意义。方法选取来黑龙江
省农垦总局总医院就诊布鲁杆菌病患者和健康体检者为研究对象，分别用间接酶联免疫吸附试验 （ＩＥＬＩＳＡ）、荧光偏振检测方法（ＦＰＡ）、传统虎红试验（ＲＢＰＴ）和试管凝集试验（ＳＡＴ）检测布鲁杆菌病。
结果布病快检三项与试管凝集试验（ＳＡＴ）检测方法的检测结果均有较好的一致性（Ｋａｐｐａ值均≥
ｍｐ为可疑，检测值＞９３ ｍｐ，为阳性结果，有抗布
３讨论 我国的布病疫情自２０世纪的９０年代中期以来 一直处于上升趋势旧Ｊ，布鲁杆菌病的准确检疫和快 速诊断是预防和控制布鲁杆菌病的关键环节。目前 实验室的诊断方法主要有传统的血清学和血培养检 测。病原的分离为确诊布鲁杆菌病的金标准，由于 病原的分离率较低，不便于普遍的应用，因而血清学 诊断方法得到广泛的应用¨Ｊ。传统ＳＡＴ是我国布 病诊断的法定正式试验，因ＳＡＴ检测ＩｇＭ敏感性较 高，用时较长，不适于现场采用，也受人为主观因素 的影响。此法优点是操作简便，判定容易，具有较高 的诊断价值，但单独使用时特异性较差，且不能区分 人工免疫和自然感染。而且部分感染动物的抗体滴 度达不到诊断水平，因而也易造成误诊和漏诊。仅 用凝集反应对畜群进行多次检查，仍有许多布氏菌 病病畜检查不出来；对部分慢性期布氏菌病患者得 不出阳性反应结果；还有一些其他疾病患者，在血清 学上与布氏菌病存在交叉凝集反应，因而做本试验 是难于排除的。因而有必要做多种血清学实验检 查，以便综合性判定，获得正确结果。因此找到快速 简便，适用于基层的诊断布病的方法，对于降低诊疗 费用，节约患者诊治时间，提高布病治愈率，具有积
９８．３％
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ９７．２％ｏｆ Ｂｒｕｅｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｓｔ（ＳＡＴ）ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｄｕ－
ｓｉｏｎｓ
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｍｏｒｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ，Ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ
Ｚｈｅｎｇ
ＷＹ，Ｚｈａｎｇ ＺＣ，ＱＲ Ｆ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ ｉｎ ２０
Ｄｉｓ
ｃａｓｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ
Ｉｎｆｏ，２０１１，２４（１）：３７－３９．ＤＯＩ：１００７－８１３４
（２０１１）０１－００３７－０３． ［２］ 熊玮仪，李昱，周航，等．２００４－２０１２年全国布鲁氏菌病网络直
ｄ。布病快检三项由虎红滴度、布鲁杆菌病间接酶
联免疫吸附试验（ＩＥＬＩＳＡ）、布鲁杆菌病荧光偏振测 定法（ＦＰＡ）组成。我们通过对布病患者的血清做虎 红滴度、荧光偏振和酶联免疫法联合快速检测，能在
３
ｈ内报告结果，为临床对疾病的诊断和治疗节约宝
贵的时间。
万方数据
・１４７・
１．２主要仪器与试剂 荧光偏振仪（德国苏黎世大学），ＦＰＡ试管型抗 体检测试剂盒（黑龙江省平河生物技术研究所）；布 鲁氏菌病ＩＥＬＩＳＡ抗体检测试剂盒（黑龙江省平河生 物技术研究所）；虎红试剂（中国ＣＤＣ传染病预防
注：ＳＡＴ：试管凝集试验；ＲＢＰＴ：虎红凝集试验；ＩＥＬＩＳＡ：间接酶 联免疫吸附试验；ＦＰＡ：荧光偏振检测方法，下同 ２．２
布病的确证试验，又可以作为筛选试验。Ｃａｒｌｓｓｏｎ 等＂１提出用ＩＥＬＩＳＡ诊断人布病。最常用的设计是 使用聚苯乙烯包被光滑型脂多糖抗原（ＳＬＰＳＡｇ）诊 断羊种布病、猪种布病，（ＲＬＰＳＡｇ）诊断绵羊附睾种
ｔｅｓｔ（ＳＡＴ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ
ｔｅｓｔｓ
ａｎｄ ｔｅｓｔ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ
ｒａｔｅ
（ＳＡＴ）ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ
ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｈａｖｅ ｇｏｏｄ
ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ（ＫａｐｐａＩ＞０．７５）．Ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ
极的意义。
鲁氏菌抗体；ＩＥＬＩＳＡ抗体检测，血清ＯＤ比值／阳性 对照ＯＤ值＞２４％为阳性结果；虎红滴度参照试剂 说明书，根据是否产生凝集现象判断阴阳性。如为
阳性，则取３０ ｕＬ血清加入下一个３０ ｕＬ生理盐水
中，依次倍比稀释，再向稀释好的血清中加入虎红凝 集抗原３０
ｕＬ，５
ｍｉｎ内出现肉眼可见的凝集反应判
０．７５）。布病快检三项的符合率９８．３％和灵敏度９７．２％要稍高于试管凝集试验（ＳＡＴ）检测方法。结论
布病快检三项较传统的血清学方法操作简单、快速，为临床布鲁杆菌病诊断和治疗节省了时间，值得 在临床布鲁杆菌病诊断中推广应用。 【关键词】布病快检三项；人布鲁氏菌病；传统血清学试验
ＣＨｎｉｃａｌ ａｐｐＨｃａｆｉｏｎ ｏｆ Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｔｅｓｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｒｕｃｅＨｏｓｉｓ Ｌｉｕ
ｓａｖｅｓ
ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ
ｔｉｍｅ．Ｉｓ ｗｏｒｔｈ ｐｏｐｕｌａｒｉｚｉｎｇ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｔｅｓｔｓ；Ｈｕｍａｎ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ；Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ
ｈｏｓｐｉｔａｌ ｂｒｕｃｅｌｌａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ
ａｓ
ｔｈｅ ｌ＇ｅｓｅａｌｒｃｈ
ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ、ＩＥＬＩＳＡ、Ｒｏｓｅ Ｂｅｎｇａｌ ｐｌａｔｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｓｔ（ＲＢＰＴ）ａｎｄ
ｓｔａｎｄａｒｄ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ＳＡＴ和布病快检三项符合率与特异度的比较
结果显示，布病快检三项组的符合率为９８．３％ 稍高于ＳＡＴ组９８．０％；灵敏度９７．２％也稍高于ＳＡＴ
万方数据
・１４８・
布病特异性较高。ＩＥＬＩＳＡ的缺点是不能分辨出接 种牛种布氏菌Ｓ１９或羊种Ｒｅｖｌ疫苗与自然感染产 生的抗体。目前只有牛种和猪种布鲁氏杆菌的 ＩＥＬＩＳＡ试验已成为国际贸易中的指定试验，其敏感 性比试管凝集试验高１０—１００倍，较传统的补体结 合反应敏感并且特异性也高。ＩＥＬＩＳＡ不仅可以应 用于血清抗体的检测，还可应用于乳样中抗体的检 测∞１。ＩＥＬＩＳＡ检测样本的时间只需３ ｈ左右，缩短 了检验时间。荧光偏振测定法是一种简单的用于检 测抗原抗体相互作用的检测技术，世界动物卫生组 织（ＯＩＥ）标准规定采用ＦＰＡ作为国际贸易中指定的 布病初步检测方法之一。ＦＰＡ是均一、无需清洗步 骤或去除未反应的成分的检测方法。试管型可用于 田问牧场的快速诊断，当检测血清或奶液时，孵育时 间最少为２ ｒａｉｎ．以上，而全血检测最多需要１５秒的 孵育。因为只有２种试剂，即标记抗原和稀释液，该 方法技术上简单，成本低廉，结果准确，敏感性达到 ９９．９％以上。有文献报道，用ＦＰＡ检测布鲁氏杆菌 病有较高的特异度和灵敏度，是最有实用价值的布 鲁菌血清学抗体检测方法Ｌ６ Ｊ。ＦＰＡ操作简单易行， 快速准确，大量节省了检测时间，适合批量检测，患 者接触感染病原菌５～７ ｄ，试验即可为阳性，可用于 布病的早期诊断。ＦＰＡ方法因其敏感性高、特异性 强、检测时间短，将成为布病检测的重要手段之一。 按照《布鲁氏菌诊断标准》，莱特实验≥１００＋＋时 即可判定为阳性，但由于莱特实验用时较长，不能为 临床提供快速的实验室诊断，因此，我们结合布鲁氏 菌病ＩＥＬＩＳＡ和ＦＰＡ这两项目前国际国内均较为先 进的两项检验技术，组合成布病快检三项，旨在能快 速的为临床提供布病诊断和治疗的依据。在我们的 研究中分别用虎红滴度、布鲁氏菌病ＩＥＬＩＳＡ、布鲁 氏菌病ＦＰＡ三种实验与莱特实验进行比较，结果显 示各检测组之间的一致率分别为０．９６６、０．９０３、 ０．８０６，有较高的一致性。布病快检三项的符合率 ９８．３％和灵敏度９７．２％要稍高于ＳＡＴ检测方法。 ＩＥＬＩＳＡ、ＦＰＡ可以弥补虎红特异性不高，易受到试验 温度、凝集时间相对较短和人为主观因素影响的缺 点，而高滴度虎红阳性较原倍虎红特异性显著提高， 又可初步提示医生莱特凝集实验的结果。布病快检 三项检测结果与诊断的一致率要稍高于莱特实验，
２结果
２．１
ＳＡＴ与布病快检三项检测结果的比较 布病快检三项分别与ＳＡＴ的检测结果进行比
较，各检测组之间的Ｋａｐｐａ值分别为０．９６６、０．９０３、 ０．８０６，Ｋａｐｐａ值均＞０．７５有较好的一致性（表１）。
表１ ＳＡＴ与ＲＢＶｒ、ＩＥＬＩＳＡ、ＦＰＡ检测结果的比较
虎红滴度为平板凝集试验，反应敏感稳定，可抑 制引起非特异性反应的ＩｇＭ和增强特异性ＩｇＧ的活 性，特异性优，是我国常用的布病初筛实验方法ＨＪ。 布鲁杆菌病ＩＥＬＩＳＡ，操作更为方便，它既可以作为
定为阳性；莱特实验≥１００＋＋为阳性结果。
１．４统计学方法
采用ＳＰＳＳｌ０．０软件进行数据分析，分别比较试 管凝集试验（ＳＡＴ）与虎红滴度、布鲁杆菌病 ＩＥＬＩＳＡ、布鲁杆菌病荧光偏振测定法检测方法的一 致性，一致性系数（Ｋａｐｐａ值）＜０．４为较差，０．ｇ一＜ ０．７５为一般，＞１０．７５为较好。比较ＳＡＴ和布病快 检三项的诊断符合率和灵敏度。
Ｊ洫时∞．Ｚｈｎｏ
Ｄｏｖ唧ｉ，Ｂｉ Ｈｕｉｍｅｉ，Ｈｅ如耐昭，Ｚｈａｎｇ Ｍ，ｌｇ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｏｆ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ Ｂｕｒｅａｕ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈａｒｂｉｎ １５００８８，Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＩＡｕ Ｊｉｎｇｙａｏ，Ｅｍａｉｌ：６０２０９６６９８＠ｑｑ．ｃｏｍ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
ｏｆ ｈｕｍａｎ
Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｔｅｓｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ Ｃｈｏｏｓｅ ｔｏ
ｏｕｒ
ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｂｊｅｃｔ，Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
１．３测定方法
组９６．４％，见表２。
表２ ＳＡＴ、布病快检三项与确诊病例的符合率比较
所有检测方法均参照试剂说明书进行操作。参 照标准：ＦＰＡ试管型抗体检测参照试剂盒说明书，检 测值＜７２ ｍｐ为阴性结果，无抗布鲁氏菌抗体，７２～
９３
注：布病快检三项包括虎红凝集试验间接酶联免疫吸附试验荧 光偏振检测方法
三项联合检测解决了布病临床诊断中一直以来依赖 血清学检测３天出结果的现状，有利于提高实验的 敏感性和检测速度，可减少血清学实验稳定性差，难 以排除假阳性交叉反应干扰和判定的主观因素等缺 陷。 参考文献
［１］郑文艳，张专才，曲芬．２０例布氏杆菌病临床分析［Ｊ］．传染病
信息，２０１１，２４（１）：３７－３９．ＤＯＩ：１００７－－８１３４（２０１１）０１－００３７－０３．
ｓｅｍｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ
布鲁杆菌病（以下简称布病）是由布氏杆菌引 起的人兽共患的传染性疾病，广泛流行于世界各
地ｕ Ｊ，其实验室诊断多以布病血清学和血培养结果
１材料与方法 １．１样本来源
作为诊断依据，而这两项出结果时间分别为３ ｄ和
７
２０１４年１０月－２０１５年３月来黑龙江省农垦总 局总医院就诊的１７～７５岁布病患者３５０例，其中男 性２３３例，女性１１７例，平均年龄５７．８３岁。空腹采 集静脉血５ ｒｎＬ，分离血清。布病诊断参照《布鲁氏 病诊疗指南（试行）》（中华人民共和国卫生部２０１２ 年１０月８日）。本研究符合医学伦理学标准，受检 者均知情同意。在各组间年龄、性别及病程情况等 方面比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
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・技术与方法・
布病快检三项在布鲁杆菌病中的临床应用
刘景瑶赵冬梅毕惠梅何晶晶
张柠
１５００８８哈尔滨，黑龙江省农垦总局总医院检验科 通信作者：刘景瑶，Ｅ－ｍａｊｌ：６０２０９６６９８＠ｑｑ．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４３９４．２０１６．０２．０１ １
【摘要】
目的探讨布病快检三项在布鲁杆菌病诊断中的临床应用意义。方法选取来黑龙江
省农垦总局总医院就诊布鲁杆菌病患者和健康体检者为研究对象，分别用间接酶联免疫吸附试验 （ＩＥＬＩＳＡ）、荧光偏振检测方法（ＦＰＡ）、传统虎红试验（ＲＢＰＴ）和试管凝集试验（ＳＡＴ）检测布鲁杆菌病。
结果布病快检三项与试管凝集试验（ＳＡＴ）检测方法的检测结果均有较好的一致性（Ｋａｐｐａ值均≥
ｍｐ为可疑，检测值＞９３ ｍｐ，为阳性结果，有抗布
３讨论 我国的布病疫情自２０世纪的９０年代中期以来 一直处于上升趋势旧Ｊ，布鲁杆菌病的准确检疫和快 速诊断是预防和控制布鲁杆菌病的关键环节。目前 实验室的诊断方法主要有传统的血清学和血培养检 测。病原的分离为确诊布鲁杆菌病的金标准，由于 病原的分离率较低，不便于普遍的应用，因而血清学 诊断方法得到广泛的应用¨Ｊ。传统ＳＡＴ是我国布 病诊断的法定正式试验，因ＳＡＴ检测ＩｇＭ敏感性较 高，用时较长，不适于现场采用，也受人为主观因素 的影响。此法优点是操作简便，判定容易，具有较高 的诊断价值，但单独使用时特异性较差，且不能区分 人工免疫和自然感染。而且部分感染动物的抗体滴 度达不到诊断水平，因而也易造成误诊和漏诊。仅 用凝集反应对畜群进行多次检查，仍有许多布氏菌 病病畜检查不出来；对部分慢性期布氏菌病患者得 不出阳性反应结果；还有一些其他疾病患者，在血清 学上与布氏菌病存在交叉凝集反应，因而做本试验 是难于排除的。因而有必要做多种血清学实验检 查，以便综合性判定，获得正确结果。因此找到快速 简便，适用于基层的诊断布病的方法，对于降低诊疗 费用，节约患者诊治时间，提高布病治愈率，具有积
９８．３％
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ９７．２％ｏｆ Ｂｒｕｅｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｓｔ（ＳＡＴ）ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｄｕ－
ｓｉｏｎｓ
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｍｏｒｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ，Ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ
Ｚｈｅｎｇ
ＷＹ，Ｚｈａｎｇ ＺＣ，ＱＲ Ｆ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ ｉｎ ２０
Ｄｉｓ
ｃａｓｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ
Ｉｎｆｏ，２０１１，２４（１）：３７－３９．ＤＯＩ：１００７－８１３４
（２０１１）０１－００３７－０３． ［２］ 熊玮仪，李昱，周航，等．２００４－２０１２年全国布鲁氏菌病网络直
ｄ。布病快检三项由虎红滴度、布鲁杆菌病间接酶
联免疫吸附试验（ＩＥＬＩＳＡ）、布鲁杆菌病荧光偏振测 定法（ＦＰＡ）组成。我们通过对布病患者的血清做虎 红滴度、荧光偏振和酶联免疫法联合快速检测，能在
３
ｈ内报告结果，为临床对疾病的诊断和治疗节约宝
贵的时间。
万方数据
・１４７・
１．２主要仪器与试剂 荧光偏振仪（德国苏黎世大学），ＦＰＡ试管型抗 体检测试剂盒（黑龙江省平河生物技术研究所）；布 鲁氏菌病ＩＥＬＩＳＡ抗体检测试剂盒（黑龙江省平河生 物技术研究所）；虎红试剂（中国ＣＤＣ传染病预防
注：ＳＡＴ：试管凝集试验；ＲＢＰＴ：虎红凝集试验；ＩＥＬＩＳＡ：间接酶 联免疫吸附试验；ＦＰＡ：荧光偏振检测方法，下同 ２．２
布病的确证试验，又可以作为筛选试验。Ｃａｒｌｓｓｏｎ 等＂１提出用ＩＥＬＩＳＡ诊断人布病。最常用的设计是 使用聚苯乙烯包被光滑型脂多糖抗原（ＳＬＰＳＡｇ）诊 断羊种布病、猪种布病，（ＲＬＰＳＡｇ）诊断绵羊附睾种
ｔｅｓｔ（ＳＡＴ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ
ｔｅｓｔｓ
ａｎｄ ｔｅｓｔ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ
ｒａｔｅ
（ＳＡＴ）ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ
ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｈａｖｅ ｇｏｏｄ
ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ（ＫａｐｐａＩ＞０．７５）．Ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ
极的意义。
鲁氏菌抗体；ＩＥＬＩＳＡ抗体检测，血清ＯＤ比值／阳性 对照ＯＤ值＞２４％为阳性结果；虎红滴度参照试剂 说明书，根据是否产生凝集现象判断阴阳性。如为
阳性，则取３０ ｕＬ血清加入下一个３０ ｕＬ生理盐水
中，依次倍比稀释，再向稀释好的血清中加入虎红凝 集抗原３０
ｕＬ，５
ｍｉｎ内出现肉眼可见的凝集反应判
０．７５）。布病快检三项的符合率９８．３％和灵敏度９７．２％要稍高于试管凝集试验（ＳＡＴ）检测方法。结论
布病快检三项较传统的血清学方法操作简单、快速，为临床布鲁杆菌病诊断和治疗节省了时间，值得 在临床布鲁杆菌病诊断中推广应用。 【关键词】布病快检三项；人布鲁氏菌病；传统血清学试验
ＣＨｎｉｃａｌ ａｐｐＨｃａｆｉｏｎ ｏｆ Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｔｅｓｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｒｕｃｅＨｏｓｉｓ Ｌｉｕ
ｓａｖｅｓ
ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ
ｔｉｍｅ．Ｉｓ ｗｏｒｔｈ ｐｏｐｕｌａｒｉｚｉｎｇ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｆａｓｔ ｔｈｒｅｅ ｔｅｓｔｓ；Ｈｕｍａｎ ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ；Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ
ｈｏｓｐｉｔａｌ ｂｒｕｃｅｌｌａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ
ａｓ
ｔｈｅ ｌ＇ｅｓｅａｌｒｃｈ
ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ、ＩＥＬＩＳＡ、Ｒｏｓｅ Ｂｅｎｇａｌ ｐｌａｔｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｓｔ（ＲＢＰＴ）ａｎｄ
ｓｔａｎｄａｒｄ ｔｕｂｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ＳＡＴ和布病快检三项符合率与特异度的比较
结果显示，布病快检三项组的符合率为９８．３％ 稍高于ＳＡＴ组９８．０％；灵敏度９７．２％也稍高于ＳＡＴ
万方数据
・１４８・
布病特异性较高。ＩＥＬＩＳＡ的缺点是不能分辨出接 种牛种布氏菌Ｓ１９或羊种Ｒｅｖｌ疫苗与自然感染产 生的抗体。目前只有牛种和猪种布鲁氏杆菌的 ＩＥＬＩＳＡ试验已成为国际贸易中的指定试验，其敏感 性比试管凝集试验高１０—１００倍，较传统的补体结 合反应敏感并且特异性也高。ＩＥＬＩＳＡ不仅可以应 用于血清抗体的检测，还可应用于乳样中抗体的检 测∞１。ＩＥＬＩＳＡ检测样本的时间只需３ ｈ左右，缩短 了检验时间。荧光偏振测定法是一种简单的用于检 测抗原抗体相互作用的检测技术，世界动物卫生组 织（ＯＩＥ）标准规定采用ＦＰＡ作为国际贸易中指定的 布病初步检测方法之一。ＦＰＡ是均一、无需清洗步 骤或去除未反应的成分的检测方法。试管型可用于 田问牧场的快速诊断，当检测血清或奶液时，孵育时 间最少为２ ｒａｉｎ．以上，而全血检测最多需要１５秒的 孵育。因为只有２种试剂，即标记抗原和稀释液，该 方法技术上简单，成本低廉，结果准确，敏感性达到 ９９．９％以上。有文献报道，用ＦＰＡ检测布鲁氏杆菌 病有较高的特异度和灵敏度，是最有实用价值的布 鲁菌血清学抗体检测方法Ｌ６ Ｊ。ＦＰＡ操作简单易行， 快速准确，大量节省了检测时间，适合批量检测，患 者接触感染病原菌５～７ ｄ，试验即可为阳性，可用于 布病的早期诊断。ＦＰＡ方法因其敏感性高、特异性 强、检测时间短，将成为布病检测的重要手段之一。 按照《布鲁氏菌诊断标准》，莱特实验≥１００＋＋时 即可判定为阳性，但由于莱特实验用时较长，不能为 临床提供快速的实验室诊断，因此，我们结合布鲁氏 菌病ＩＥＬＩＳＡ和ＦＰＡ这两项目前国际国内均较为先 进的两项检验技术，组合成布病快检三项，旨在能快 速的为临床提供布病诊断和治疗的依据。在我们的 研究中分别用虎红滴度、布鲁氏菌病ＩＥＬＩＳＡ、布鲁 氏菌病ＦＰＡ三种实验与莱特实验进行比较，结果显 示各检测组之间的一致率分别为０．９６６、０．９０３、 ０．８０６，有较高的一致性。布病快检三项的符合率 ９８．３％和灵敏度９７．２％要稍高于ＳＡＴ检测方法。 ＩＥＬＩＳＡ、ＦＰＡ可以弥补虎红特异性不高，易受到试验 温度、凝集时间相对较短和人为主观因素影响的缺 点，而高滴度虎红阳性较原倍虎红特异性显著提高， 又可初步提示医生莱特凝集实验的结果。布病快检 三项检测结果与诊断的一致率要稍高于莱特实验，
２结果
２．１
ＳＡＴ与布病快检三项检测结果的比较 布病快检三项分别与ＳＡＴ的检测结果进行比
较，各检测组之间的Ｋａｐｐａ值分别为０．９６６、０．９０３、 ０．８０６，Ｋａｐｐａ值均＞０．７５有较好的一致性（表１）。
表１ ＳＡＴ与ＲＢＶｒ、ＩＥＬＩＳＡ、ＦＰＡ检测结果的比较
虎红滴度为平板凝集试验，反应敏感稳定，可抑 制引起非特异性反应的ＩｇＭ和增强特异性ＩｇＧ的活 性，特异性优，是我国常用的布病初筛实验方法ＨＪ。 布鲁杆菌病ＩＥＬＩＳＡ，操作更为方便，它既可以作为
定为阳性；莱特实验≥１００＋＋为阳性结果。
１．４统计学方法
采用ＳＰＳＳｌ０．０软件进行数据分析，分别比较试 管凝集试验（ＳＡＴ）与虎红滴度、布鲁杆菌病 ＩＥＬＩＳＡ、布鲁杆菌病荧光偏振测定法检测方法的一 致性，一致性系数（Ｋａｐｐａ值）＜０．４为较差，０．ｇ一＜ ０．７５为一般，＞１０．７５为较好。比较ＳＡＴ和布病快 检三项的诊断符合率和灵敏度。
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