大鼠侧脑室穿刺给药方法

Part III: The disadvantage
• 麻醉，立体定位仪固定时对动物的外耳道 及鼓膜的损伤，颅骨钻孔以及穿刺导管进 入脑实质造成的损伤等，使动物在术后几 天内都处于应激状Hale Waihona Puke Baidu，可能干扰甚至掩盖 给药早期动物对药物的反应。
• 针道损伤破坏了血脑屏障的完整性，使血 细胞及血中的各种免疫因子进入脑，干扰 了神经元和胶质细胞周围的微环境，背离 了使结果接近正常生理状态反应的初衷。
• 手术步骤
• 1.用10%的水合氯醛麻醉大鼠（SD，250-350克），使动 物呈俯卧姿势，将大鼠头部固定于脑立体定位仪上，门齿 杆-3.3mm，三个标准检测是否固定成功，鼻对正中，头 部不动，提尾不掉。 • 2.头顶皮肤剃毛，消毒，在头部正中做一长约0.5-1cm切 口，分开头骨上附着的骨膜及肌肉，撕开颅顶筋膜，以棉 球蘸少量双氧水涂擦颅骨表面，清楚暴露前囟点，并用墨 水标记。
• 3.以前囟点为0点寻找进针点，其坐标为：AP:1.0mm， L:1.5mm，H:4.5mm，墨水标记。 • 4.用牙科钻将标记点钻开至硬脑膜，用针尖刺破硬脑膜， 消毒棉签止血，干燥术野。 • 5.将穿刺导管垂直插入约4.5mm，用95%的酒精涂搽，使 颅骨表面干燥。
• 6.将牙托粉粉剂和水剂按比例混合调匀后涂到导管周围， 等待牙托粉完全凝固。 • 7.缝合大鼠头皮切口，保证头皮完整，同时更好地固定导 管。 • 8.术毕，单笼饲养，青霉素8万单位肌肉注射连续3天。一 周后可给大鼠微量泵灌注给药。
大鼠侧脑室穿刺给药方法
李嘉翔 中山大学附属第一医院心内科科研型研究生
Part I: Introduction
• 侧脑室置管穿刺给药是神经生物学研究中 常用的实验手段，多用于观察目的核团或 脑区对某些药物刺激的反应。
Part II: The advantage
• 将药物直接注入脑内可以直接作用于在体 状态下感兴趣的神经元及胶质细胞，比其 他给药途径更直接，得出的结果较体外实 验，如细胞培养等更接近生理状态下的反 应。
Part v: Materials and Methods
• 实验器材
• 1.套管系统：在SD大鼠上进行侧脑室置管给药使用的外管， 相配套的内芯和内针均购自深圳市瑞沃德生命科技有限公 司。并用该公司配套的PE管给药。 • 2.管道系统的直径和长度的选择：应根据需注射的脑区的 坐标进行选择。
• 外管，相配套的内芯和内针如下图所示
Part Iv: The solution
• 目前国际上公认的脑内给药方法为：在立 体定位仪的引导下，将一合适直径和长度 的带内芯的管道埋置于需要的位置，用牙 托粉将管道的外露部分固定于颅骨表面。
• 术后5到10天，手术应激已经基本消失，血 脑屏障基本恢复。此时，可以在动物清醒 状态下把内芯抽出，将一内针插入管道达 目的部位注射给药后将内针抽出，再插入 内芯封闭管道以再次给药。此法基本避免 了应激及血液因素的干扰，可以得到比较 可信的结果。
• 9.手术固定好大鼠的图片
• 10.术后大鼠刚苏醒的图片