植物细胞染色体制片及有丝分裂观察
植物细胞染色体标本的制作与观察-教案
植物细胞染色体标本的制作与观察1. 实验背景与原理染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。
因此，染色体标本的制备技术是遗传学、细胞生物学、染色体工程、分类学等众多学科的基本实验技术。
物种细胞内染色体数目、形态、长度等信息的总和根据实验的观察和测量绘制成的模式图称为核型（karyotype）。
核型分析在物种亲缘鉴定，染色体变异分析，杂种分析，细胞分裂过程分析，孤雌生殖等研究中均有重要的作用。
染色体标本的常规制片方法有切片法、涂片法、压片法、滴片法（空气干燥法）等。
压片法操作简单，是常用的植物染色体标本制备的方法。
不过，该法在制备中要注意避免压片所造成的染色体的扭曲、变形和丢失的现象。
染色体制备的重要环节如下：（1）取材：应取分生旺盛的组织或细胞。
在植物中通常取根尖，在分裂高峰时取材，可得到大量分裂相细胞。
而在动物细胞中通常选取骨髓等分裂活跃的细胞，或是植物血球凝集素等刺激下的淋巴细胞，也可选取分裂旺盛的体外培养的癌细胞或转化细胞等。
（2）预处理：使用秋水仙胺等药品破坏纺锤体形成，不但可得到大量分裂相细胞，而且可使染色体缩短变粗，有利于观察。
（3）固定：渗透力强的固定液将细胞迅速杀死，蛋白质沉淀，并可尽量保持细胞原有状态。
（4）解离或低渗：植物细胞要除去细胞间的果胶层，并使细胞壁软化，从而使细胞得以膨胀，为染色体的分散提供了空间。
常用解离方法有酸解法和酶解法。
动物细胞无细胞壁，通常不需解离，而是用低渗液使细胞膨胀。
（5）染色体分散：通过压片、滴片等机械力量使染色体分散, 有利于观察。
2. 实验目的（1）掌握常规压片技术制作植物染色体标本的一般方法。
（2）了解显微镜下常规显色的植物细胞染色体的形态特点,熟练掌握显微镜的使用。
（3）理解染色体与生命遗传的意义及染色体核型检查的应用。
3. 实验材料与试剂（1）材料：市售大蒜、洋葱。
（2）设备与用品：普通光学显微镜，水浴锅，盖玻片，载玻片，异物针，镊子，平皿，滤纸等。
实验一-植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持活体的形态；
使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定； 使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色； 防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。
醋酸洋红
将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中，边煮边搅拌， 煮沸(沸腾时间不超过30s)，然后悬入一生锈的小铁钉 于染液中，过1min取出，或加入1%～2%铁明矾水溶液 5-10滴，至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。静置 12h后，过滤于一棕色试剂瓶中，储存备用。
卡宝品红
配制方法： 先配成三种原液,再配成染色液 原液A: 3 g碱性品红溶于100 ml 70%酒精中. 原液B: 取原液A 10 ml加入到90 ml 5%石炭酸水溶液中. 原液C:. 取原液B 55 ml,加入6 ml 冰醋酸和6 ml福尔马林(38%的甲醛). (原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用). 染色液:取C液10—20 m1,加45%冰醋酸80～90 ml,再加山梨醇1.8 g,配成 10%～20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则 着色能力差). 适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使 用2—3年不变质.山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨
6.镜检
• 压好的片先在低倍镜下镜检，找到分裂细胞后，再转换成 高倍镜观察染色体动态变化。 • 如果染色体分散良好，图像清晰，可以进行显微照相保存。
一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻敲打盖玻片，分生组织细胞就可以铺 展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液吸干，经显微镜检查后，选择理 想的分裂细胞，再在这个细胞附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能 得到理想的分裂相。
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得体会
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得
体会
观察植物细胞有丝分裂是高中时期生物学科的重要实验之一，在实验中能够让我们清楚地观察到植物细胞有丝分裂中不同时期展现
出来的特点，帮助提高我们对于有丝分裂的理解，提高生物学习兴趣。
本文分析了植物细胞有丝分裂实验的描述和体会，希望能够让植物细胞有丝分裂实验的变得更加完善和精准。
植物细胞的有丝分裂是把母细胞中的遗传物质，通过分裂的方式平均分配到两个字细胞中的过程。
母细胞的遗传物质主要是存在于细胞核的染色体上，在有丝分裂过程中，染色体形态并不是固定的，而是连续变化的，因此染色体的有丝分裂分为间期、前期、中期、后期等阶段，不同的是其中染色体的差别比较大，因此通过实验，能够让我们更加清晰的观察和理解植物细胞有丝分裂的变化过程。
实验材料选择
大蒜根尖培养。
想要看到染色体的行为变化，选择材料是最关键的一步，材料选择中需要考虑各种因素，例如说洋葱，生长容易受到季节的影响，同时染色体的体积较小，因此在这次试验中我选择了大蒜作为实验材料，大蒜的根尖细胞中染色体的体积比较大，便于观察，同时培养期比较短，不用受到季节的限制。
在室内温度 15-26C的环境中，大蒜根部生长速度较快，首先把蒜瓣用铁丝串号，放在装满水的韶破上，这趟能够让大蒜的底部接触到水面同时不会被水淹没，然后把烧杯放到 25C的恒温箱中，每隔六个小时就需要换睡衣次，不
到两天的时间，根部就会长出根尖。
必须要注意经常换水，否则容易因为阳气不足导致生长缓慢或者是腐烂。
实验二 植物根尖细胞有丝分裂及染色体制片技术
后期：每一条染色体的着丝粒分裂，两条染色单体彼
此分开形成两条子染色体，子染色体在纺锤丝的牵引下， 分别移向两极。 末期：移向两极的染色体逐渐松散成染色质，纺锤丝 逐渐消失，在赤道面上开始出现细胞板，把一个细胞分隔 成两个子细胞，核膜重新形成，核仁出现，逐渐进入间期 状态。
三 实验材料
洋葱(2n=16)的鳞茎
尖。 2 预处理
将剪取的洋葱根尖(0.5-1cm)放入0.1%秋水仙素溶液中
室温下处理3-4小时，然后用水冲洗几次。 3 固定 将经过预处理的根尖放入卡诺氏固定液中固定3-24小时。
4 解离
将固定液中的洋葱根尖取出，在蒸馏水中洗净，然后放 入1N的盐酸中，室温下处理10-15min。目的是使胞间层的果
四 实验器具及药品
药品：蒸馏水、卡诺氏固定液(无水乙醇：冰醋
酸=3:1)、45%醋酸、 1N盐酸、秋水仙素、改良
苯酚品红染色液或1%醋酸洋红染色液等。
用具：显微镜、刀片、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、酒精灯、吸水纸等。
五 实验步骤
1 根尖培养
将洋葱鳞茎下部浸入水中，当根长出1-2cm时，切下根
六 观察结果
七 实验作业 1 在上述实验过程中，固定、解离的作用是什么？ 2 绘制出所观察到的有丝分裂各时期的染色体行 为图像。
胶物质解体，使细胞易于分散，便于压片。
5 软化 将解离好的根尖冲洗后，放入45%的醋酸中软化10min左 右。 6 染色 将洋葱根尖置于载玻片上，用小刀片将根冠和伸长区切 除，只留下1-2mm左右的生长区，然后滴一滴1%醋酸洋红染 色液或改良苯酚品红染色液，染色5-10min。
7 压片
加盖玻片，用手指垂直瞬间用力压片(切勿移动盖玻 片)，这样得到的染色体才能在一个水平面上。为了使细 胞质透明增加染色效果，将载玻片在酒精灯上微微加热， 吸去多余的染液。最后用吸水纸将周围染色液吸干。 8 镜检 先在低倍镜下找到细胞，找到分裂相后再换成高倍 镜，仔细观察有丝分裂各个时期染色体的行为。
实验二植物染色体制片及有丝分裂观察
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ遗传学实验
植物染色体制片及有丝分裂观察
实验目的：
① 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; ② 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色 体行为；
预习要求
实验目的
• 学习并掌握植物染色体玻片标 本的制作方法;
预习要求
流程: 材料要求,取材方法,实验 流程和各操作步骤实施原因 发根→预处理→固定→解离→ 低渗→ 软化→染色→压片→镜 检
解离的目的？如何判断解 离的效果？其他的解离方 法？
5 软化：将解离好的根尖冲洗后，放入45%醋酸 中软化10min左右。
请问解离与软化 的目的是什么？
6 染色：切取1-2mm的分生区，用改良苯酚品 红染液染色10-20min。
为保证染色的 充分要注意哪 些问题？
7 压片：盖上盖玻片，在酒精灯上烤片。然后 固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片几下，将 材料压成一层细胞。
取材时间？
• 2 预处理：将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶 液中室温下处理3-4h。
预处理的目的？ 还有其他方法吗？
实验步骤：
3 固定：将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中，室温下处理24h。水 洗放入70%乙醇中保存。
固定的作用？固定剂的组 成？对固定剂配制的要求？
4 解离：将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl 中， 60℃下处理8-10min（可视具体情况而定）。
实验材料
• 洋葱、大蒜的鳞茎，玉米、蚕豆的种子等。本实 验选用大蒜。
实验用品
• 用具：显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 • 药品：蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水 仙素、改良苯酚品红染液等。
植物有丝分裂过程中染色体行为的观察
植物有丝分裂过程中染色体行为的观察摘要培养植物获取良好的根尖;学习制片;观察植物的有丝分裂的连续、动态过程；分辨各时期染色体形态。
1.引言有丝分裂是真核生物细胞分裂的基本形式。
也称间接分裂或核分裂。
在这种分裂过程中出现由许多纺锤丝构成的纺锤体，染色质集缩成棒状的染色体。
1882年W.弗勒明最先将此种分裂方式命名为有丝分裂。
通过有丝分裂,作为遗传物质的脱氧核糖核酸(DNA)得以准确地在细胞世代间相传。
通过有丝分裂和细胞分化才能实现组织发生和个体发育。
有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。
它是一个连续过程，可分为前期、中期、后期、末期。
这次实验中，以植物根尖为材料，观察有丝分裂过程中染色体的动态变法，同时也练习用压片法制备染色体标本的技术。
植物材料的取材相对容易。
最常用的植物材料是植物根，且由根尖得到的结果也最可靠。
2.实验材料2.1 试验材料显微镜，载玻片、盖玻片；眼科镊一只，单面刀片；吸水纸片（约3cm×5cm），吸管；醋酸地衣红染液；解离液（1mol/L HCL,对小麦、大麦根尖，可用95%乙醇：浓盐酸=1:1混合解离液）；废液缸。
洋葱2.2试验方法2.2.1 获取生长良好的根尖洋葱洋葱因取材方便、发根条件简单、染色体数目少 (2n=16)，因此常作为有丝分裂实验的首选材料。
但在实际操作过程中，常会遇到洋葱发根难且发根少。
经资料查询，找到了一种洋葱快速发根的方法，即洋葱发根前放人冰箱的冷藏室中处理一段时期，再放人清水中发根。
购买洋葱时，挑选个小、无腐烂且老根少的洋葱，发根前将洋葱放人冰箱中进行低温处理，从冰箱中取出后，将老鳞片剥去，用刀子稍稍削去根基部的老根，再放人清水中发根。
水以浸没根基部为宜，每天换1次清水，3~4d后，根基部长出了大量的根（洋葱经一定时期的低温处理，打破了根的休眠期，从而促进了根的萌发和生长）。
培养至根长1~2cm时，切取根尖，，一部分进行预处理，一部分直接固定。
植物染色体常规分析技术
植物染色体常规分析技术植物染色体常规分析技术是一种用于研究植物基因组结构与功能的重要手段。
在植物遗传学和分子生物学研究中，通过对植物染色体的观察和分析，可以揭示植物的遗传特性、染色体的结构与功能，并为植物育种和基因工程提供实验依据。
本文将重点介绍植物染色体常规分析技术的原理、方法和应用。
染色体制片是最基本的植物染色体常规分析技术。
它通过对植物组织进行处理和解离，将解离的细胞制作成染色体悬滴或薄片，再通过染色体标记技术进行染色和观察。
染色体制片的制备方法有多种，如固定-解离-染色法、醋酸不敏感-解离-染色法、花草植物花蕾组织研磨法等。
G-显带和C-显带染色技术是常用的染色体染色技术，可用于对植物染色体的结构和功能进行分析。
G-显带染色技术主要通过染色体在酸性条件下的显色性质差异来观察和比较染色体的组织型结构，得到染色体的G-带。
C-显带染色技术则通过对染色体进行DNA硫酸基蛋白酶酶解和碱处理，使DNA与染色体分离，再通过DNA染色剂进行染色，得到染色体的C-带。
染色体定位可通过显微术观察染色体位置和形态的变化，以及采用染色体标记和探针技术的方法，精确定位和描绘染色体的分布情况。
常用的方法有细胞核型分析、Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) 技术等。
染色体行为观察是研究染色体变化和功能的重要手段。
通过观察染色体在有丝分裂和减数分裂过程中的行为，可以揭示染色体的形态变化、染色体的遗传性状等。
常用的方法有染色体标记和染色体芯片技术。
基因组分析是通过对植物基因组的染色体进行分析，揭示植物基因组的组成、结构和功能，并进一步阐明基因功能和基因组演化规律。
常用的方法有荧光原位杂交（FISH）、光学显微镜观察、超高分辨率的二次离子反射质谱成像技术等。
植物染色体常规分析技术在植物遗传学研究和育种实践中得到广泛应用。
通过对植物染色体的观察和分析，可以解决植物遗传问题、揭示植物遗传基础、鉴定染色体缺陷和异常等。
有丝分裂实验
Ⅰ、实验原理
有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。用碱 性染料对染色体进行染色，通过高倍镜观察细胞 中染色体的存在状态，判断细胞所处的分裂时期
Ⅱ、方法步骤
（1）根尖培养: 应每天换水 (防止水中缺氧烂根) （2）实验步骤：解离→漂洗→染色→制片 （3）观察：低倍镜观察 →高倍镜观察 （4）绘图：
观察根尖分生组织细胞有丝分裂
1.解离 10%盐酸解离洋葱根尖 (2—3mm) 使细胞互相分离开来。
2.漂洗
放入清水中漂洗
洗去盐酸，便于染色。
3.染色
龙胆紫或醋酸洋红染色
使染色体着色，便于观察
4.制片
用镊子压扁根尖，加载 玻片压散细胞 先用低倍镜观察
使细胞分散，有利于观察
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
5.观察
找到分生区细胞：正方形， 排列紧密。
④染色：染液（0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸 洋红）;时间为3－5分钟；目的是使染色体或染色质 被碱性染料染成深色，便于观察。
⑤压片：目的是使细胞分散开。方法（用镊子弄碎根 尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，用拇指轻轻按 压载玻片）（压片过重会将组织压烂；过轻则细胞未 分散开而重叠。） ⑥低倍镜观察：找到分生区细胞（特点：细胞呈正方 形，排列紧密。） ⑦高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间期的细 胞最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过 程，因细胞在解离时已被杀死。
Ⅲ、 注意事项
①取材：取生长旺盛、带有分生区的根尖，长度为根 尖的2-3mm。 ②解离：解离液（15%盐酸∶95%酒精溶液＝1∶1）； 时间：室温3-5分钟，至根尖酥软； 目的：使组织细胞分离开，避免细胞重叠 （时间过短则细胞没有完全分离，过长则解离过度， 染色体成分被破坏。通过解离，细胞会被解离液杀 死。） ③漂洗：用清水漂洗10min，洗去组织中的解离液， 防止解离液（盐酸）继续破坏细胞，同时便于染色。
实验一 植物有丝分裂过程中染色体行为的观察
实验原理及目的
实验原理：植物根尖细胞的有丝分裂，在适当的 时间对其进行固定，经染色和压片，镜检，可看 到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
实验目的：掌握有丝分裂各时期的特点和根尖染 色体压片法，此法是观察植物染色体最常用的方 法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体 畸变和姊妹染色单体交换的基础。
卡诺固定液：3份无水酒精＋1份冰醋酸。 酒精：有固定、硬化和脱水作用，可以固
定多种材料，但对核蛋白固定效果较差； 冰醋酸对材料有膨胀作用，对核蛋白的固
定效果好。 固定时间:3-24小时.
解离
使分生组织细胞间的果胶质分离，细胞壁 软化或部分分解，使细胞和染色体容易分 散压平。
酶解：纤维素酶和果胶酶，所需时间较长， 成本高，一般不用。
植物根尖的分区
flash
实验材料
蚕豆的种子 洋葱
蚕豆根尖的准备
吸胀24h
盖上双层纱布
铺上双层纱布
蚕豆根尖的准备
20-25℃培养
洋 葱 根 尖 的 准 备
实验步骤
材料准备
固定
水洗 制片
解离染色 镜检
作业及思考题
实验材料为什么要进行固定? 绘制你所观察到根尖染色体的分裂相。
固定
酸解：1份浓盐酸＋1份无水酒精（解离 液），处理时间依不同材料而有差别。
水洗
水洗作用是什么？如果不水洗会有什么 后果？
水洗至少3次.
染色
将水洗后的根尖切去伸长区等，留下 分生区段染色.
染色液：改良石碳酸品红溶液. 染色时间：一般10-15min左右（但也
需依不同材料而定）.
遗传学实验整理
实验02、有丝分裂染色体制片及观察原理2 步骤1 注意1二、实验原理 2有丝分裂是一个连续过程，可分为分裂间期和分裂期，分裂期又分为前期、中期、后期、末期。
植物细胞有丝分裂主要在根尖、茎间、芽的生长点、幼叶叶缘及茎间形成层等分生组织，将生长旺盛的植物分生组织经过取材、固定、解离、染色、压片等处理，就可以观察到植物细胞的有丝分裂现象。
由于植物根尖容易取材、操作方便，经常被用来进行植物细胞有丝分裂过程的观察：①根尖取材容易，操作和鉴定也比其它器官与组织方便；②实验室内采用种子萌发后所长出的新鲜幼嫩根尖，不受植物生长季节的影响和限制，并且可以大量获得；③对于某些珍贵而又稀少的试验材料，取用自然条件下生长植株的根尖，比取用茎尖、花器等对材料的伤害要小得多；④采用实验室内种子发根，切取根尖后的种苗通常还可以进行正常种植，利于后续研究进行。
五、实验方法11.发根：①水培法②砂培法取材：上午10:00～11:00；下午4:00～5:002.预处理：将剪下的根尖立即放入0.1％秋水仙碱水溶液中，以药液浸没根尖为度，处理3～4h。
抑制和破坏纺锤丝的形成，使根尖细胞延迟其染色体的分离，增加中期分裂相，并使染色体分散于细胞中，以便观察计数。
3.固定材料经预处理后用流水冲洗，然后投入卡诺液(3份甲醇:1份冰乙酸，现配现用)中固定20～24h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保存备用。
固定的目的是将材料迅速杀死，并使染色体形态、结构尽可能保持不变和便于染色。
4. 解离常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖→流水冲洗3min→吸水纸吸干→放入盛有适量1mol/L HCl，60±0.5℃水浴保温的青霉素瓶中→解离10min。
5.染色与压片（改良石炭酸品红染色）：解离后材料水洗3min并吸干，取1/2个根尖的乳白色分生组织于载玻片上夹碎捣烂，滴加1～2滴染液，染色10～15min，将滤纸放在盖玻片上，用拇指用力压盖玻片，再用手固定住盖玻片，同时用铅笔的橡皮头在材料部位垂直轻敲几下，使材料分散均匀。
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享
植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组）.参考分享植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组）同组成员：曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞一、中文摘要：染色体（ Chromosome ），是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，又叫染色质。
其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。
这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。
二、关键词：染色体洋葱压片法三、引言：洋葱（ onion ）是百合科（ Liliaceae ）葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的 2 年生草本植物，其学名为Allium cepa L ，染色体数为2n=2x=16 。
由表 1 和图 1 可见 ,洋葱的 8 对染色体中 ,有 7 对 (第 1~7 对 )染色体 ,臂比在1·01~1 ·70 之间 ,为中部着丝点染色体 ,1 对 (第 8 对 ),臂比为 4 ·74, 为近端部着丝点且带随体的染色体 ; 依据 STEB-BINS[4] 的核型分类标准 ,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的 2A 型。
100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一，现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图，因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义，陈瑞阳教授历时 25 年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国 2834 种植物染色体数目进行了报道，完成了 1045 种植物的核型分析，积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。
研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系, 国际对染色体的化学成分,DNA 含量 ,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料，总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。
实验二植物细胞有丝分裂制片和观察
实验二植物细胞有丝分裂制片和观察一、实验目的与要求1.实验目的：理解植物有丝分裂各个时期规律性的变化；掌握植物细胞有丝分裂的制片技术；学会用显微镜观察植物细胞染色体在不同分裂时期的分裂相及其特点。
2.实验要求：必做实验。
二、实验类型本实验为验证型实验。
三、实验原理及说明生物在体细胞产生体细胞的过程中，主要采用有丝分裂方式。
母细胞将核内的染色体均等地分配给子细胞，母细胞的染色体数目与子细胞一致，因为分裂过程中可形成纺锤丝，故称为有丝分裂。
染色体在细胞分裂的间期、前期、中期、后期、末期具有不同的行为。
在此过程中，细胞核和细胞膜也呈规律性变化。
各种分裂旺盛的组织经过适当的取材处理，加以固定、离析、染色、压片，可以迅速将细胞分散在载片和盖片之间，进行有丝分裂和染色体观察。
四、实验仪器序号仪器名称台数1 显微镜202 培养箱 2五、实验内容和步骤1.准备（1）材料准备：将洋葱去皮后，放在盛满水的烧杯中25℃左右培养，每天换水一次，待长出根尖3-5厘米后，在上午10：50和下午5：20，细胞处于分裂高峰期，用刀片取下，放在广口瓶中，进行预处理。
图2-1 元葱的根尖培养（2）用具：眼科镊子，刀片，广口瓶，解剖针，盖玻片，大培养皿，小培养皿，立式染缸，染色板，酒精灯，量筒100毫升、10毫升。
（3）所需药品及配制：无水乙醇，二甲苯，醋酸洋红。
2.预处理：用0.05-0.2%秋水仙素处理根尖，2-4h。
3.固定：用Carnoy固定液(卡诺固定液，冰醋酸：95%酒精=1：3）固定2-24 h，再放在95%、85%、75%酒精中各0.5 h，最后在70%的酒精中保存2个月。
一般是新固定的材料为好。
保存在乙醇里的材料，在观察前最好用Carnoy固定液再固定1-2 h。
4.水解：将固定材料加一滴离析液（95%乙醇：浓盐酸=1：1）离析10 min，然后用水反复冲洗，材料为白色，用针易压碎。
5.染色：在载片上滴一滴醋酸洋红染色15 min左右，待根尖为暗红色时，将染色后的根尖放在一清洁的载片上，去除根冠和伸长区，再加少量染液染色。
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读一、实验原理1．在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。
由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
2．染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。
二、实验材料及其准备实验材料：洋葱根尖分生区。
因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
洋葱根尖的培养：在室温为10℃～25℃条件下，实验前3～5天将洋葱鳞茎剥去一层外皮，用刀片切去鳞茎底部陈根或削去一薄层，露出新的细胞有利于洋葱鳞茎尽早生根。
将鳞茎放在盛满水的烧杯上，使其底部接触水面，放在温暖、向阳处。
每天换水，以免氧气不足导致根尖腐烂；温度过低会使细胞生长缓慢，影响细胞有丝分裂的观察。
三、实验步骤：解离→ 漂洗→ 染色→ 制片→ 观察四、思考与分析例1、用洋葱为实验材料，观察植物细胞的有丝分裂。
（1）培养洋葱根尖时，如果没有经常换水，常会出现烂根现象，原因是 。
（2）制作装片时，如果用质量分数为5％的盐酸在10℃下解离5min ，然后按正常要求进行漂洗、染色、制片。
结果在观察中，发现根尖细胞没有较好地分散开，原因是 。
（3）如果观察的某细胞在视野右上方，要把物像移到视野中央，应把玻片向 方移动。
解析：（1）在培养洋葱根尖过程中，不注意经常换水，水中氧气不充足，根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精可导致烂根。
（2）配制解离液应该是质量分数为10％的盐酸，题目中用的解离液不符合要求，原因是盐酸的质量分数太低；解离的时间太短，一般用10%盐酸在室温下要解离10～15min （3）因为显微镜视野中的物像是实物的倒像，要使右上方的物像沿左下移至视野中央，则应把玻片向右上方移动。
答案：（1）水中氧气不足，根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精，毒害细胞 （2）解离液不合要求，特别是盐酸的质量分数太低（应为10％），且解离的时间不够 （3）右上例2、在进行“观察植物细胞的有丝分裂”实验中，甲～戊五位同学在剪取洋葱根尖后立即进行的操作步骤如右表。
染色体标本制作与观察实验报告
染色体标本制作与观察实验报告实验报告：染色体标本制作与观察一、实验目的1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。
2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。
3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。
二、实验原理染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术，其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。
染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化，进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。
本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本，并通过显微镜观察其形态和分布。
三、实验步骤1.准备试剂和器材：碱性染料（如龙胆紫溶液）、生理盐水、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2.选取植物根尖：选择新鲜的植物根尖，长度约为5-10mm。
3.预处理：将根尖放入冰箱冷藏（4℃）约24小时，然后放入25℃的温水中浸泡约6小时。
4.固定：用镊子将根尖取出，放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时，然后转移到70%酒精中保存。
5.解离：将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中，在60℃的水浴中解离10分钟。
6.漂洗：用镊子取出根尖，用清水冲洗3次，每次5分钟。
7.染色：将根尖放在载玻片上，用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上，染色3-5分钟。
8.制片：盖上盖玻片，避免产生气泡。
然后在显微镜下观察。
四、实验结果与讨论1.实验结果：通过显微镜观察到清晰的染色体形态，可以看到细胞分裂的不同阶段，如前期、中期和后期。
在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板上，而在后期则可以看到染色体的分离和移动。
这证明了实验方法的可行性。
2.结果讨论：实验中观察到的细胞分裂过程与教科书中的描述基本一致，说明我们的实验方法是有效的。
此外，通过观察不同阶段的细胞分裂，我们可以更好地理解细胞周期和遗传物质的复制、分配等过程。
然而，我们也注意到实验过程中存在一些问题。
例如，解离过程中可能会出现过度解离的情况，导致染色体形态不完整。
植物细胞有丝分裂染色体制片及观察
三、实验材料
洋葱（Allium cepa）及蚕豆（Vicia faba） 等
四、实验用具及药品
1．用具：显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、 刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 2．药品：无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、 饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、 0.1N盐酸。
五、实验步骤
酸解: 取材 固定 解离 酶解 染色 压片 镜检
六、制作永久玻片
冷冻脱片封片法 酒精一叔丁醇脱水封片法 酒精—二甲苯脱片封片法
七、作业及思考题
1.根据你的实验情况总结出制备好一张优 良的细胞分裂标本应注意哪些问题？ 2.常用染料的特点如何？ 3.绘制2～3个有丝分裂典型时期简图。
实验一 植物细胞有丝分裂染色 体制片及观察
一、实验目的
学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色 体压片技术；观察有丝分裂过程中染色 体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有 丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制， 并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去，使 子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而保证 了性状的发育和遗传的稳定性。 有丝分裂是一个连续的过程，可分为前期、中 期、后期和末期。高等植物的有丝ห้องสมุดไป่ตู้裂主要发 生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经 过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片 等步骤，可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色 体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体 动态的观察。
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实验报告
学生姓名：学号：
专业: 年级、班级：
课程名称：遗传学实验实验项目：植物细胞染色体制片及有丝分裂观察
一、实验目的
1.学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色体压片技术
2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化
二、实验原理
1.在有丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去，使子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而保证了性状的发育和遗传的稳定性。
2.有丝分裂是一个连续的过程，可分为前期、中期、后期和末期。
高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。
经过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片等步骤，可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色体动态变化的装片。
三、实验材料
无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、0.1N盐酸、洋葱根尖
四、实验步骤
材料培养取材预处理固定解离（酸解）
醋酸洋红染色
五、实验结果
染色
改良品红染色
压片镜检
图1 染色后低倍镜下洋葱根尖细胞全视野图图2 处于分裂间期的洋葱根尖细胞图3 处于有丝分裂前期的洋葱根尖细胞图4 处于有丝分裂中期的洋葱根尖细胞
六、 思考与分析
1. 根据你的实验情况总结出制备好一张优良的细胞分裂标本应注意哪些问题？
1. 预处理方面
由于正常情况下细胞分裂中期持续的时间很短，且分裂现象较少，因此在预处理时可采用化学或物理方法使细胞分裂停止于中期，从而获得更好的观察效果。
2. 解离方面
在酸解过程中一定要掌握好温度和时间，若解离不够，则压片不易分散，若解离过长则
图5 处于有丝分裂后期的洋葱根尖细胞 图6 处于有丝分裂末期的洋葱根尖细胞 图7 有丝分裂中期的洋葱根尖细胞绘制图（10x40） 图8 有丝分裂后期的洋葱根尖细胞绘制图（10x40）
在下一步处理时由于材料过软而易将根尖丢失。
3.取材方面
⑴只取2mm～3mm长的分生区
⑵要细心区别根尖的前端和后端，若误取了根尖的后端，在观察时，则只会见到长方
形的成熟区细胞，见不到方形的分生区细胞。
材料经解离、冲洗后根尖前端分生区部分呈乳白色、比较圆滑，后端部分则较透明和粗糙（取根时不用剪刀而改用镊子夹取则更明显）。
4.染色方面
⑴使用醋酸洋红染色时，可以在酒精灯上稍加热，这样可以使材料更易着色和染色背景更清晰。
⑵媒染一定要充分，媒染后的水洗也要充分，洗不足时影响染色效果，并会在组织内外产生大量沉淀，制成的片子污浊。
5.压片方面
压片时将根尖放在载玻片中央，盖上盖玻片，用食指和拇指固定在盖玻片，再用镊子钝部或带有橡皮头的铅笔对准材料部位轻轻敲击盖玻片，使根尖细胞均匀地扩散成淡淡的云雾状，铺展呈单层，若压片不当，则会观察到根尖细胞不是铺展呈单层，而是有重叠或太密集。
2.常用染料的特点如何？
⑴本身是具有颜色的
⑵为碱性染剂，与染色体之间有亲和力
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