鸡白痢检疫 禽类实验室诊断技术课件
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加样：中心孔内加鸡白痢沉淀抗原，周围孔 加蛋黄，标记各孔内的蛋号，加蛋黄时将蛋 壳打破，倒去蛋白，用小铁丝环勾取蛋黄一 滴加于孔内，以满为度。
说明
全血平板凝集试验操作简便、反应速度快可在现场进 行 ，生产实践中应用最为广泛，适用于大群检疫；但 该方法灵 敏度有一定的局限性 ，只能检测到抗体滴度 较高的带菌鸡 。而血清中抗体含量较高，因此血清平 板凝集较全血平板凝集特异性强、敏感性高 、检出阳 性率高，但该方法操作相对复杂，且需要对待检鸡只 进行编号。血清平板凝集反应和琼脂扩散沉淀反应在 实验室内操作，不受外界气候条件影响，无非特异性 反应，结果易于判定，可用于可疑反应鸡的复检。
一、快速全血平板凝集反应
（三）实验器材
鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性血清、 生理盐水、洁净玻璃板、采血针、75%酒 精棉球、滴管、铂金耳等。
（四）实验操作
1、用蜡笔将玻璃板分成3格。 2、将抗原瓶充分摇匀，在3格内分别滴加
一滴鸡白痢全血凝集反应抗原。 3、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，用
实验作业
1、写出鸡白痢全血平板凝集试验的操作方 法及结果判断
2、采用全血平板凝集试验检疫鸡白痢时， 应注意哪些问题？
3、查阅资料，写出种鸡场如何做好鸡白痢 的检疫、净化？
3、本实验应在20℃以上室温中进行。冬季 检疫室内温度达不到20℃时， 应先将载玻 片在酒精灯加热达30℃左右。
（六）注意事项
4、采血针与铂金耳每次使用都要用酒精棉 球擦去血液或火焰上烧灼后，再采取第二只 鸡的血液。
5、实验完后应迅速止血，以减少失血。再 给鸡饮电解多维，以减少应激。
6、鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏杆菌具 有相同的“O”抗原，故成年鸡感染鸡伤寒 检疫时也出现阳性反应。
2、2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一 致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出 现絮状者判为阴性反应。
3、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴 性者，判为可疑反应。
（六）注意事项
1、抗原应在2～15℃冷暗处保存，用时要 充分振荡均匀 。
2、本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡， 幼龄鸡敏感度较差。
（二）操作方法
在玻板上加被检鸡血清一滴和抗原一滴，用 牙签将抗原与血清充分混合。
（三）结果判定
观察30～60秒钟，凝集者为阳性，否则 为阴性，此试验应在10℃以上室温中进 行。
三、卵黄平板凝集反应
（一）实验材料
1. 抗原：同鸡白痢标准全血板凝集抗原 2. 待检鸡卵：预先编号，同种鸡号一致，或
随机采集待检鸡群同一日内所产新鲜鸡卵。
（二）操作方法
先在蛋壳上打一约蚕豆大小的孔。放尽蛋清， 用1毫升注射器插入卵黄中，吸取0.5毫升卵黄 液与等量16%氯化钠溶液中，混匀后用滴管吸 取一滴于玻板上，再加标准染色抗原一滴，与 其充分混合，在22～25℃室温下观察反应。
（三）结果判定
“＋＋＋＋”2分钟内出现大片的凝集，背景澄清 “＋＋＋”2分钟内出现较大的凝集 “＋＋”2分钟内凝集明显。但凝集颗粒较小 “＋”2分钟内出现微量的细小颗粒 “±”2－3分钟之后出现微量细小的凝集颗粒。 “－”滴加抗原后不出现凝集。 凡在两个“＋”以上者均判为白痢阳性。
鸡白痢的检疫
张桂枝
Hale Waihona Puke Baidu
鸡白痢
由鸡白痢沙门氏杆菌引起的鸡的常见传染病，主 要侵害雏鸡，可引起大批死亡。成年鸡中多属慢 性经过，并可经病鸡所产卵传染下一代。构成连 续的传染链锁。
本病目前尚无有效的免疫方法。只有采取有计划 的检疫，及时淘汰带菌鸡与综合性卫生防疫措施 相结合，才能控制或消灭此病。
血清学检疫的方法有全血平板凝集反应，血清平 板凝集反应，卵黄平板凝集反应和卵黄（血清） 琼扩沉淀反应等。
二、血清平板凝集反应
（一）实验器材
1. 抗原：与全血平板凝集反应相同。 2.玻璃板 3. 待检血清：以内径2毫米，长10～12厘米的聚
乙烯塑料管引流采血，先用三棱针刺破翅下静 脉，立即用塑料管引流血液至6～8厘米长度， 在火焰下将管一端烧融封口，用胶布标明鸡号， 置37℃温箱中2小时，待血清析出后备用。
四、蛋黄（或血清）琼脂扩散试验
（一）实验材料
1. 抗原：采用一般的鸡白痢诊断液，其中既有 沉淀原，又含凝集原；也可将诊断液离心后取 上清液作为可溶性抗原。其中含有沉淀原、无 凝集原。
2. 鸡蛋：白痢病阳性鸡及阴性鸡所产的蛋。 3. 优质琼脂、NaCL、蒸馏水、打孔器、平皿等。
（二）操作方法
滴管吸取全血一滴（或用灭菌铂耳，环径约 4～5mm，取血满环）加入第1格内。
（四）实验操作
4、用滴管吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第 2格内作阳性对照，吸取生理盐水一滴加入 第3格内作阴性对照。
5、以上3格用牙签随即搅拌均匀，并使散 开至直径约2cm为度；
6、仔细观察并判定。
（五）结果判定
1、抗原与血清混合后在2min内发生明显 颗粒状或块状凝集者为阳性。
说明
全血平板凝集试验操作简便、反应速度快可在现场进 行 ，生产实践中应用最为广泛，适用于大群检疫；但 该方法灵 敏度有一定的局限性 ，只能检测到抗体滴度 较高的带菌鸡 。而血清中抗体含量较高，因此血清平 板凝集较全血平板凝集特异性强、敏感性高 、检出阳 性率高，但该方法操作相对复杂，且需要对待检鸡只 进行编号。血清平板凝集反应和琼脂扩散沉淀反应在 实验室内操作，不受外界气候条件影响，无非特异性 反应，结果易于判定，可用于可疑反应鸡的复检。
一、快速全血平板凝集反应
（三）实验器材
鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性血清、 生理盐水、洁净玻璃板、采血针、75%酒 精棉球、滴管、铂金耳等。
（四）实验操作
1、用蜡笔将玻璃板分成3格。 2、将抗原瓶充分摇匀，在3格内分别滴加
一滴鸡白痢全血凝集反应抗原。 3、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，用
实验作业
1、写出鸡白痢全血平板凝集试验的操作方 法及结果判断
2、采用全血平板凝集试验检疫鸡白痢时， 应注意哪些问题？
3、查阅资料，写出种鸡场如何做好鸡白痢 的检疫、净化？
3、本实验应在20℃以上室温中进行。冬季 检疫室内温度达不到20℃时， 应先将载玻 片在酒精灯加热达30℃左右。
（六）注意事项
4、采血针与铂金耳每次使用都要用酒精棉 球擦去血液或火焰上烧灼后，再采取第二只 鸡的血液。
5、实验完后应迅速止血，以减少失血。再 给鸡饮电解多维，以减少应激。
6、鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏杆菌具 有相同的“O”抗原，故成年鸡感染鸡伤寒 检疫时也出现阳性反应。
2、2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一 致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出 现絮状者判为阴性反应。
3、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴 性者，判为可疑反应。
（六）注意事项
1、抗原应在2～15℃冷暗处保存，用时要 充分振荡均匀 。
2、本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡， 幼龄鸡敏感度较差。
（二）操作方法
在玻板上加被检鸡血清一滴和抗原一滴，用 牙签将抗原与血清充分混合。
（三）结果判定
观察30～60秒钟，凝集者为阳性，否则 为阴性，此试验应在10℃以上室温中进 行。
三、卵黄平板凝集反应
（一）实验材料
1. 抗原：同鸡白痢标准全血板凝集抗原 2. 待检鸡卵：预先编号，同种鸡号一致，或
随机采集待检鸡群同一日内所产新鲜鸡卵。
（二）操作方法
先在蛋壳上打一约蚕豆大小的孔。放尽蛋清， 用1毫升注射器插入卵黄中，吸取0.5毫升卵黄 液与等量16%氯化钠溶液中，混匀后用滴管吸 取一滴于玻板上，再加标准染色抗原一滴，与 其充分混合，在22～25℃室温下观察反应。
（三）结果判定
“＋＋＋＋”2分钟内出现大片的凝集，背景澄清 “＋＋＋”2分钟内出现较大的凝集 “＋＋”2分钟内凝集明显。但凝集颗粒较小 “＋”2分钟内出现微量的细小颗粒 “±”2－3分钟之后出现微量细小的凝集颗粒。 “－”滴加抗原后不出现凝集。 凡在两个“＋”以上者均判为白痢阳性。
鸡白痢的检疫
张桂枝
Hale Waihona Puke Baidu
鸡白痢
由鸡白痢沙门氏杆菌引起的鸡的常见传染病，主 要侵害雏鸡，可引起大批死亡。成年鸡中多属慢 性经过，并可经病鸡所产卵传染下一代。构成连 续的传染链锁。
本病目前尚无有效的免疫方法。只有采取有计划 的检疫，及时淘汰带菌鸡与综合性卫生防疫措施 相结合，才能控制或消灭此病。
血清学检疫的方法有全血平板凝集反应，血清平 板凝集反应，卵黄平板凝集反应和卵黄（血清） 琼扩沉淀反应等。
二、血清平板凝集反应
（一）实验器材
1. 抗原：与全血平板凝集反应相同。 2.玻璃板 3. 待检血清：以内径2毫米，长10～12厘米的聚
乙烯塑料管引流采血，先用三棱针刺破翅下静 脉，立即用塑料管引流血液至6～8厘米长度， 在火焰下将管一端烧融封口，用胶布标明鸡号， 置37℃温箱中2小时，待血清析出后备用。
四、蛋黄（或血清）琼脂扩散试验
（一）实验材料
1. 抗原：采用一般的鸡白痢诊断液，其中既有 沉淀原，又含凝集原；也可将诊断液离心后取 上清液作为可溶性抗原。其中含有沉淀原、无 凝集原。
2. 鸡蛋：白痢病阳性鸡及阴性鸡所产的蛋。 3. 优质琼脂、NaCL、蒸馏水、打孔器、平皿等。
（二）操作方法
滴管吸取全血一滴（或用灭菌铂耳，环径约 4～5mm，取血满环）加入第1格内。
（四）实验操作
4、用滴管吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第 2格内作阳性对照，吸取生理盐水一滴加入 第3格内作阴性对照。
5、以上3格用牙签随即搅拌均匀，并使散 开至直径约2cm为度；
6、仔细观察并判定。
（五）结果判定
1、抗原与血清混合后在2min内发生明显 颗粒状或块状凝集者为阳性。