特殊染色

43、组织中铁质的显色法

44、组织中铜的显色法

罗丹明染色法

1、[试剂配制]：（1）DMAB-罗丹明贮备液：对二甲氨基苄罗丹明饱和于无水乙醇中，贮存液4℃保存。（2）DMAB-罗丹工作液（充分摇动）：DMAB-罗丹明贮备液3ml，蒸馏水47ml，使用前现配现用。

2、[染色步骤]：（1）切片脱蜡至蒸馏水。（2）用DMAB-罗丹明液60℃染色3小时（1小时后显微镜下检查）。（3）用蒸馏水冲洗。（4）对比染色（颜色要浅些）用苏木精染5秒。（5）盐酸乙醇分化。（6）流水冲洗5分钟。（7）脱水，透明，风骨。

3、[结果]：铜沉积物-砖红色，核-蓝色，胆汁-绿色。

Timm's铜染色法

1、[试剂配制]：（1）液体A：5%硝酸银水溶液，液体B：对苯二酚

2.0g，柠檬酸5.0g，蒸馏水100ml，液体可以贮存在4℃暗处一个月。

2、[染色步骤]：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%硫化铵5min （3）充分水洗。（4）用0.1N盐酸2-3min祛除铁和硫化锌液(15%三氯醋酸也可以使用)。（5）水洗。（6）切片置新鲜1份A液和5份B液过滤后使用，将硫化铜转化为硫化银3min就可以完成。（7）水洗。（8）脱水，透明，封固。

3、[结果]：铜沉积物被染成黑色。

Howell氏红氨酸铜的显示法

1、[固定]：10%甲醛液（体内与蛋白质相结合的铜损失较少），亦可用无水酒精溶液固定。

2、[试剂]：红氨酸染液：0.1%红氨酸无水酒精溶液 5ml，10%醋酸钠溶液 100ml，70%酒精溶液。

3、[操作步骤]：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）红氨酸染液37℃12~24小时。（3）70%酒精溶液换洗2次，15~30分钟。（4）无水酒精溶液6小时至过夜（可加入醇性伊红复染）。(5)脱水、透明、封固。

4、[结果]：铜呈绿黑色颗粒；背景呈粉红色。

45、组织中铅的显色法：Mallory-Parker氏铅的显示法

1、[固定]：10%甲醛液。

2、[试剂]：0.1%美蓝酒精（20%）溶液

3、[操作步骤]：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.1%美蓝酒精染液内10~20分钟。（3）95%酒精溶液分化。（4）脱水、透明、封固。

4、[结果]：铅呈深蓝色；铜呈淡蓝色。

46、组织中砷的显色法：Castel氏砷的显示法

1、[固定]：10%甲醛液。

2、[试剂]：硫酸铜-甲醛液：硫酸铜 2.5g，10%甲醛溶液 100ml，1%番红花溶液；

3、[操作步骤]：（1）组织在硫酸铜-甲醛液内5天。（2）流水洗涤24小时。（3）脱水、透明、石蜡包埋。（4）石蜡切片脱蜡至水。（5）1%番红花溶液作对比染色。（6）脱水、透明、封固。

4、[结果]：组织中的砷呈绿色颗粒状。

47、组织中尿酸盐显色法：Gomori-Burtner氏六胺银染色法

1、[组织固定]：信息组织块无水乙醇固定24h，更换2-3次新液，以后用无水酒精脱水、二甲苯透明，石蜡包埋。

2、[试剂配制]：六胺银原液：5%硝酸银水溶液5ml，3%鸟罗托品水液100ml，两液混合发生白色沉淀，震荡后溶解而澄清，该液置冰箱后能放数月。六胺银染液：六胺银原液30ml，硼酸-硼酸盐缓冲液（PH7.8）8ml。硼酸-硼酸盐缓冲液（PH7.8）M/5硼酸溶液16ml，M/20四硼酸钠溶液4ml。

3、[操作步骤]：（1）石蜡切片5-7μm，漂浮于95%酒精液上，稍加温展平切片，并粘贴在玻片上，然后置37℃烤箱内烘干。（2）汽油脱蜡，并用无水酒精洗涤。（3）切片置于37℃温箱内用六胺银染色，染20-60分钟，镜检尿酸盐沉淀变为黑色为止。（4）5%硫代硫酸钠处理2-3分钟。（5）蒸馏水洗。（6）用0.5%伊红酒精溶液1分钟。（7）无水酒精脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。

4、[结果]：尿酸盐结晶体黑色，其他组织呈复杂的颜色。

48、组织中脂类物质染色：苏丹-Ⅲ染色法

1、[ 与染色相关的问题]: (1)在石蜡包埋组织处理过程中,要用一些有机溶剂，所以石蜡切片不能用于脂类染色，通常用冰冻切片或炭蜡包埋切片。切片厚5～15微米。(2)切片选用中性甲醛、钙甲醛或锇酸固定液固定。单纯甲醛固定会丢失一些磷质。脂类物质不溶于水，易溶于有机溶剂。所以显示脂质时不能用含有有机溶剂的固定液固定。

2、[配制]：苏丹-Ⅲ 0.15g，60-70%酒精 100ml，将染料溶于60-70%酒精中，临用前过滤。密闭保存。

3、[染色步骤]: (1) 冰冻切片5-10微米。漂于水中或粘贴在载玻片上。(2) 蒸馏水洗。(3) Harris苏木精液 1 min。(4) 水洗3-5min。

(5) 蒸馏水洗。(6) 70%酒精迅速洗,约20-30秒。(7) 苏丹-Ⅲ液置于56℃温箱内浸染 30 min。(8) 70%酒精分化数秒。(9) 切片入蒸馏水。(10) 用滤纸吸干切片上的水分，待干。(11) 甘油明胶封固。

4、[结果]：脂类物质呈红色,细胞呈蓝色，粘液物质染色。

49、组织中胆固醇及胆固醇酯的显色法

50、组织中磷脂的显色法：Beker氏染色法

1、[固定]：10%甲醛-钙溶液固定6~12小时，移入新鲜的后铬化液18小时/室温，入新鲜的后铬化液中60℃，24小时，流水洗过夜，冰冻切片10μm。

2、[试剂]：后铬化溶液：重铬酸钾 5g，氯化钙 1g，蒸馏水 100ml，酸性苏木因溶液：苏木因 5g，1%碘酸钠 1ml，蒸馏水 48ml，硼砂-铁氰酸盐溶液：铁氰化钾 2.5g，四硼酸钠 2.5g，蒸馏水 100ml。

3、[操作步骤]：（1）冰冻切片入后铬化液60℃，1小时；蒸馏水充分洗。（2）酸性苏木因溶液37℃染5小时。（3）硼砂-铁氰酸盐溶液37℃分化18小时。（4）自来水洗10分钟；甘油明胶封固。

[结果] 磷脂质呈暗蓝色。

51、胆色素显色法