移液器(枪)使用-实验报告-XIANG

Quantitative Biochemical Analysis

一、目的

學習使用pipetman的正確方法并瞭解如何校正，可使實驗結果準確性提高。Pipetman是最常用於biochemistry及molecular biology實驗的基本必須工具，一般有p2、p10、P20、p100、P200、P1000、P5000、P10mL等規格，不同規格型號的pipetman所及取的體積各有不同，在記錄結果時需注意單位變化。

二、原理

Pipetman是一種取樣量連續可調的精密取液儀器，基本原理是依靠活塞的上下移動。其活塞移動的距離是由調節輪控制螺杆機構來實現的，推動按鈕帶動推杆使活塞向下移動、排除了活塞腔內的氣體。鬆手後，活塞在復位彈簧的作用下恢復其復位，從而完成一次吸液過程。

三、材料、藥品

Pipetman、tube、tip、蒸餾水、蒸餾水、燒杯、精密電子秤。

四、步驟

1、分別進行P20、P200、P1000的吸取動作和讀取方式。

（1）将一个tip装在pipetman上，推到套紧位置以保证气密性。

（2）转动调节轮，使读数显示为所要取液体的体积。

图1 移液器的使用

（3）轻轻按下推动按钮，将推动按钮由位置“0”推到位置“l”。

（4）手握移液器，将吸液尖垂直浸入待取液体中，浸入深度为2~4mm。

（5）经2~3s后缓慢松开推动按钮，即从推动按钮位置“1”复位到“0”位，完成吸液过程，停留1~2s后将pipetman移出液面。

（6）用纱布或滤纸将粘在tip外表面的液体擦掉。注意不要接触到吸液尖头部的

孔表面。

（7）将tip头部放入被分配的容器中，使尖贴着容器的内壁，然后慢慢按下推动

按钮至位置“1”，继续按至位置“2”，此时液体应全部排净。

（8）将tip口部沿着容器内壁滑动几次，然后移走pipetman，松开推动按钮，按

卸尖按钮推掉tip，即完成一个完全的操作过程。

2、再分別進行校正，先拿取一個tube稱重后，將電子秤歸零。

3、pipetman（P20/P200/P1000）吸取蒸餾水至tube中，再放置於電子秤稱重。

4、將此時tube的重量記錄下來，差值即為稱取的水的體積，可換算pipetman所

吸取的水的體積

5、重複上述步驟三次，得到三組數據

6、將此三組說句平均后所得的數值對照此款pipetman的Maximum permissible errors表中的Gilson，確定此次操作是否在可接受誤差範圍內。

7、若超過了誤差範圍，則需進行校正。

五、實驗結果

P20

tube重(g) 蒸餾水+tube重(g) 蒸餾水重(g) 蒸餾水體積(μL) 1st 1.1043 1.12430.020.02

2nd 1.1067 1.12720.02050.0205

3rd 1.1089 1.12870.01980.0198

平

1.1066333 1.1267333330.02010.0201

均

P200

tube重(g)蒸餾水+tube重(g)蒸餾水重(g)蒸餾水體積(L) 1st 1.1092 1.31220.2030.203

2nd 1.11 1.31350.20350.2035

3rd 1.1044 1.30780.20340.2034

平

1.1078667 1.3111666670.20330.2033

均

P1000

tube重(g)蒸餾水+tube重(g)蒸餾水重(g)蒸餾水體積(L) 1st 1.1058 2.1114 1.0056 1.0056

2nd 1.1102 2.1138 1.0036 1.0036

3rd 1.1167 2.1233 1.0066 1.0066

平

1.1109

2.116166667 1.005266667 1.005266667均

(Reference Extent)

Model Volume(μL)Maximum Permissible Errors(Gilson)

(Accuracy) (Precision)

Systematic error(μL)Random error(μL) Min 2 ±0.10 ≤0.03

5 ±0.10 ≤0.04

P20 10 ±0.10 ≤0.05

Max 20 ±0.20 ≤0.06

Min 50 ±0.50 ≤0.20

P200 100 ±0.80 ≤0.25

Max 200 ±1.60 ≤0.30

Min 200 ±3 ≤0.6

P1000 500 ±4 ≤1.0

Max 1000 ±8 ≤1.5

本次實驗的目的是學習pipetman使用方法和判斷pipetman是否需要校正。我們

通過tube裝水前後的質量之差，以差量法為手段，得出pipetman吸取最大量程

時候的體積與理論吸取體積的誤差是否在可接受的參考量程之內，來判定此pipetman的可用性。

（1）P20為例：其平均的誤差值為0.1μL，小於其可接受誤差為±0.20μL。說明

此pipetman不需要校正。

（2）而P200的平均的誤差值為3.3μL，而可接受誤差為±1.60μL，超過了可接

受誤差的範圍。說明此pipetman需要校正。

（3）P1000：其平均的誤差值為0.1μL，而可接受誤差為±0.20μL。說明此pipetman

不需要校正。