细胞培养实验室的设备配置及用途
细胞培养用的仪器
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细胞培养用的仪器摘要:1.细胞培养的重要性2.细胞培养所需的基本设备3.常用的细胞培养仪器及其功能4.细胞培养仪器的选择与维护5.结论正文:细胞培养在生物科学和医学研究中具有重要地位,它是研究生物系统基本功能和疾病机制的有效手段。
为了保证细胞培养的质量和效果,选用合适的仪器设备至关重要。
本文将介绍细胞培养所需的基本设备、常用的细胞培养仪器及其功能、细胞培养仪器的选择与维护。
一、细胞培养的重要性细胞培养技术是实验室研究和临床应用的基础,通过对细胞进行体外培养,可以更好地了解细胞生长、分化和功能调控等方面的知识。
此外,细胞培养技术还在药物筛选、组织工程、基因治疗等领域发挥着重要作用。
二、细胞培养所需的基本设备进行细胞培养需要以下基本设备:1.培养箱:用于提供恒定的温度和湿度环境,维持细胞生长所需的稳定条件。
2.培养皿:用于放置细胞,通常由玻璃或塑料制成。
3.培养液:为细胞提供生长所需的营养物质。
4.移液器:用于准确地移取和分配培养液。
三、常用的细胞培养仪器及其功能1.显微镜:观察细胞形态和生长状况。
2.培养箱:提供恒定的温度和湿度环境。
3.恒温摇床:用于细胞培养过程中的摇晃培养,有助于细胞生长和药物筛选。
4.细胞计数器:用于细胞数量的快速测定。
5.凝胶成像仪:用于观察和分析细胞培养过程中产生的凝胶图像。
6.实时定量PCR 仪:用于检测细胞培养过程中的基因表达。
四、细胞培养仪器的选择与维护在选择细胞培养仪器时,应根据实验需求和预算选择合适的设备。
在日常使用过程中,要注意仪器的清洁和维护,确保仪器性能稳定。
对于高精度仪器,如显微镜和实时定量PCR 仪,需要定期进行校准,以保证数据准确性。
细胞培养仪器设备的选择和使用对细胞培养的质量和效果具有重要影响。
细胞培养实验室建设基本要求
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细胞培养实验室建设基本要求.txt
细胞培养实验室建设基本要求
细胞培养实验室是进行细胞培养研究和实验的重要场所,为确
保实验的准确性和顺利进行,以下是细胞培养实验室建设的基本要求:
1. 设备和设施:
- 实验室应具备适当的面积和布局,确保实验操作的顺利进行。
- 实验室内应配置细胞培养箱、恒温培养箱、显微镜等必要的
设备。
- 实验室内应具备合适的洗手设施,并配备必要的实验室安全
设备。
2. 环境控制:
- 实验室应具备良好的通风系统,确保空气流通和污染物的排除。
- 实验室内的温度、湿度和光照条件应适宜,以满足细胞培养
的要求。
- 实验室内应设置适当的防护措施,避免细菌和真菌的污染。
3. 材料和试剂:
- 实验室应配备高质量的细胞培养耗材,如培养基、培养皿、
培养液等。
- 实验室应储备必要的实验试剂,如抗生素、细胞凋亡试剂等,并确保其保存和使用符合规范。
4. 实验操作:
- 实验室应建立严格的实验操作规范,包括细胞培养的标准操
作流程。
- 实验人员应接受相应的培训,熟悉和掌握细胞培养实验的技
术要求。
- 实验操作过程中应注意卫生和安全,遵守实验室操作规程。
细胞培养实验室建设的基本要求对于确保实验结果的准确性和
可靠性非常重要。
建立符合标准的实验室能够为科研工作提供良好
的支持,确保实验顺利进行。
细胞培养实验室的设置及设备
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一、细胞培养实验室的设置及设备(一)细胞培养实验室的设置组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响.目前,超净工作台的广泛使用,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养.细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
1.无菌操作区(1)无菌操作室:无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。
理想的无菌操作室应划为三部分:a)更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)缓冲间—―位于更衣间与操作间之间,目的是为了保证操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。
其大小要适当,且其顶部不宜过高(不超过2.5m)以保证紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洁和消毒.工作台安置不应靠墙壁,台面要光滑压塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
无菌操作间的空气消毒:紫外线灯—-产生臭氧,并且室内温度及湿度均较高,不利于工作人员健康。
空气过滤的恒温恒湿装置—-最好。
表1 洁净室(区)空气洁净度级别表洁净度级别尘粒最大允许数/立方米微生物最大允许数浮游菌/立方米沉降菌/皿100级3,500 0 5 110000级350,000 2,000 100 3100000级3,500,000 20,000 500 10300000级10,350,000 60,000 - 15无臭氧紫外线消毒器电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。
臭氧是一种强氧化剂,能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的,消毒时没有死角。
消毒后空间的残留臭氧只需30~40min即能自行还原成氧气,空气不留异味,消毒物体表面不留残毒。
细胞培养的必备设施、常用器材
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一、细胞培养的必备设施
(一)无菌实验室 防止微生物污染和有害因素的影响 工作环境清洁、空气清新、干燥和
无烟尘。
(二)超净工作台
(三)恒温培养箱 变通电热恒温培养箱 CO2培养箱
(四)其他设备 倒置显微镜 电热鼓风干燥箱 电子天平 恒温水浴箱 离心机 压力蒸汽消毒器 液氮储存罐
(三)血清
血清必须贮存于–20 ~ -70℃,若存放于4℃, 请勿超过一个月。
一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。 若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养 基内一起过滤,勿直接过滤血清。
瓶装(500ml) 血清解冻步骤(逐步解冻法): 20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶 后再分装,一般以50 ml 无菌离心管可分装40~ 45 ml。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度 改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。
二、 灭菌
实验用玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖, 高压蒸汽灭菌121℃, 15 lb, 20 分钟,置 于oven 中烘干。
实验用玻璃pasteur pipet 以干热灭菌 170℃, 4 小时。
吸管、培养瓶、手术器械等置饭盒内高 压蒸汽灭菌121℃, 15 lb, 20 分钟,置于 oven 中烘干。
(3)使用液(1×)配法
取母液甲和母液乙各一份,加双蒸水18份,以 115℃高压灭菌25分钟(以免葡萄糖破坏),置 室温后4℃保存
(二)培养基(维持液、营养液)
目前常用的基础培养液均已商品化,如 RPMI1640,MEM,DMEM,F12等,可 根据培养需求合理选择,主要成分是氨 基酸、维生素、碳水化合物、无机离子 及其他一些辅助物质。
(三)橡皮器材(各种瓶或试管的塞子、 盖子)
细胞实验室配置依据
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细胞实验室配置依据
(原创版)
目录
1.细胞实验室的配置目的
2.细胞实验室的配置要求
3.细胞实验室的配置建议
正文
细胞实验室是进行细胞研究和实验的重要场所,它的配置直接影响到实验结果的准确性和实验人员的安全。
下面我们将从细胞实验室的配置目的、配置要求和配置建议三个方面来详细介绍。
一、细胞实验室的配置目的
细胞实验室的配置目的是为了提供一个适合细胞生长和繁殖的环境,同时确保实验过程的安全和实验结果的准确。
二、细胞实验室的配置要求
细胞实验室的配置要求主要包括以下几个方面:
1.环境要求:细胞实验室应设在清洁、安静、光线适宜、通风良好的地方,并应避免与其他实验室共用通风系统。
2.设备要求:细胞实验室应配备细胞培养箱、显微镜、离心机、PH 计、冰箱等基本设备,并应根据实验需要配备相应的高级设备。
3.材料要求:细胞实验室应准备常用培养基、培养皿、培养瓶、细胞刮刀、移液器等实验材料和工具。
三、细胞实验室的配置建议
细胞实验室的配置建议主要包括以下几个方面:
1.人员配置:细胞实验室应配备专业的实验人员,他们应具备相关的
实验技能和安全知识。
2.安全配置:细胞实验室应设立紧急喷淋、洗眼器等安全设施,并应定期进行安全培训和演练。
3.实验流程:细胞实验室应制定规范的实验流程和操作规程,以确保实验的顺利进行和实验结果的准确性。
细胞工程实验室组成及无菌操作技术
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玻璃漏斗式滤器
微孔滤膜滤器
干热灭菌箱/烘箱
电热灭菌器
2.培养仪器设备
培养架、培养箱、摇床、生物反应器等。
3.细胞学观察设备
应备有普通显微镜和倒置显微镜。
4. 化学实验常规设备
主要用于试剂保存与称量、培养基配制与 分装和水处理等,根据实际需要予以配置。
冰箱、天平、酸度计、离心机、加热器、 纯水器、分装设备等。
操作的场所。 要求:封闭性好,干燥清洁明亮,防止空气
对流。外应设缓冲室、更衣室 。
基本的设备:超净工作台(接种箱)、电热灭菌器、喷雾
消毒器、紫外灯、酒精灯等。
③培养室 功能:是对接种到培养瓶的离体材料进行控制培养的 场所。 要求:是要能控制光照和温度,应保持干燥和清洁, 防止微生物感染。
培养室基本设备:培养架、摇床、光照培养箱、通 风设施、时间过程控制器、空调机、加湿器、除湿 机及温度感应器等。
▪ 灭菌(sterilization):是指用物理或化学的方法, 杀灭或清除传播媒介上的所有微生物,使之达到无 菌程度。
▪ 消毒(disinfection):是指杀死、消除或充分抑 制部分微生物,使之不再发生危害作用。经过消毒, 许多细菌芽孢、霉菌的厚垣孢子等不会完全杀死, 即消毒后的环境里、物品上还有活着的微生物。
4、滤 器
▪ 玻璃滤器:与玻璃器皿清洗相同。无论是水 浸泡还是酸浸泡,都可用抽滤法。
▪ 不锈钢滤器:使用后弃去石棉滤膜,金属部 分刷洗干净,最后用蒸馏水漂洗2~3次,晾 干备用。
▪ 微孔滤膜滤器:使用后弃去微孔滤膜,滤器 用清水充分冲洗,最后用蒸馏水漂洗,晾干 备用。
二、灭菌和消毒方法
灭菌和消毒是组织培养重要的工作之一 。
第二节、无菌操作技术
细胞工程实验室配置及基本技术
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用蔗糖调节外,常用的还有甘露醇,山梨
醇等。
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§3.培养条件
六.气体影响
CO2、 O2
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§3. 培养条件
六.气体影响
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§4.离体培养的营养需求
一.无机盐类 二.有机化合物 三.植物激素 四.其它附加成分
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§4.离体培养的营养需求
一.无机盐类
消毒器、紫外灯。
无菌操作设备 净化工作台、接种箱。 光温控制设备 时间程序控制器、空调及温度感应器。 细胞培养设备 培养设备根据需要而定,包括培养架、培养箱、
摇床、 生物反应器等。
细胞学鉴定设备 光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜。
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§2.实验室设置
二.基本设备配置
灭菌设备
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§3.培养条件
四.pH值
通常使用的pH值范围是5.0~6.5。pH在 4.0以下或7.0以上培养物就不能正常生长。
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§3.培养条件
五.渗透压
事实上为了某些培养需要,在设计培养基
时就应该考虑渗透压的问题,如White培
养基的渗透压为0.15个大气压,MS培养基
为1.9个大气压。此外,培养基的渗透压除
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§2.基本技术
一.洗涤技术
洗涤方法 玻璃器皿洗涤 新的玻璃器皿 已使用过的试管、烧杯、三角瓶 吸管、滴管等内径狭小的玻璃制品 塑料用品洗涤 一般用合成洗涤剂洗涤,因其附着力较 强,因此冲洗时必须反复多次,最后用 蒸馏水冲洗。 金属用品洗涤 金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤, 需要清洗时,一般用酒精擦洗,然后火 焰干燥。 第12页/共32页
细胞实验室配置依据
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细胞实验室配置依据细胞实验室是进行细胞生物学、分子生物学、生物化学等研究的重要场所,其合理的配置可以为科研工作提供高效便利的条件。
下面就细胞实验室的配置做一些简要的介绍。
1. 通风与洁净:细胞实验室的通风条件非常重要,可以通过安装空调新风系统、排风系统和净化器来保证实验室空气的流通和洁净度。
同时,还可以设置紫外线照射装置来杀死空气中的微生物。
2. 安全设施:细胞实验室需要配备安全设施,包括消防设备、紧急停电装置、安全疏散通道等,以应对突发事故和提供安全保障。
3. 实验台与设备:细胞实验室需要配置实验台和各种实验设备,如培养箱、离心机、显微镜、PCR仪、电泳仪等。
4. 培养室:细胞实验室需要配置培养室,用来培养和保存细胞。
培养室应具备严密无菌的条件,包括消毒装置、自来水处理设备、灭菌器等,以保证培养细胞的纯度和质量。
5. 试剂与材料储存:细胞实验室需要配置试剂储存区和材料储存区,用来存放各种试剂和实验所需的材料。
储存区应具备防火、防爆、防腐蚀等特性,保证试剂和材料的安全性。
6. 数据分析与处理:细胞实验室需要配置数据分析和处理设备,如计算机、数据处理软件等,以方便科研人员对实验数据进行整理和分析。
7. 垃圾处理:细胞实验室需要配置垃圾处理区,用于收集和处理实验产生的废弃物和污染物。
垃圾处理区应具备防臭、防滴漏等特性,以保证实验室的清洁和卫生。
8. 实验员办公区:细胞实验室需要配置实验员办公区,为科研人员提供一个舒适的工作环境,同时配置必备的办公设备,如电脑、打印机、复印机等。
9. 培训区:细胞实验室需要配置培训区,用于进行实验技术的培训和教育。
培训区应具备投影设备、展示板、多媒体设备等,以方便教学和培训。
10. 贮存区:细胞实验室需要配备样品和数据的长期贮存区,如冷冻柜、冷冻干燥机等,以保证实验数据的保存和长期使用。
细胞实验室的配置应该根据实际需要和经费限制来确定,能够满足科研工作的需求,并且具备一定的扩展性和灵活性。
细胞培养实验室的设备配置及用途
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细胞培养实验室的设备配置及用途以下是一个典型细胞培养实验室的设备配置及其用途:1.生物安全柜:生物安全柜是细胞培养实验室的核心设备,用于提供无菌和安全的实验环境。
生物安全柜分为三个级别,根据需求可以选择不同级别的生物安全柜。
2.培养箱:培养箱是用于维持细胞培养所需的适宜环境条件,例如恒定温度(通常在37摄氏度),适宜的湿度和二氧化碳浓度。
培养箱通常配备有温度、湿度和CO2的控制器,以确保细胞在适宜的培养环境中生长。
3.倒置显微镜:倒置显微镜是观察和检测细胞培养过程中的细胞形态、生长状态和细胞染色等的重要设备。
4.细胞培养罐:细胞培养罐是用来培养细胞的容器,通常分为培养瓶和培养皿两种。
培养罐通常由无菌塑料材料制成,能够提供适宜的培养条件和保护细胞。
5.离心机:离心机用于离心培养细胞和沉淀物,以便进行培养基的更换、细胞分离和沉淀物的收集等操作。
6.显微镜:显微镜用于观察细胞培养的细胞形态、细胞分裂和细胞染色等。
7.细胞离心机:细胞离心机是用于从细胞培养物中分离细胞、细胞沉淀和细胞富集的设备。
8.培养箱温度计和湿度计:用于监测培养箱中的温度和湿度,以保持适宜的培养环境。
9.细菌培养箱:用于细胞培养实验室中的细菌菌种的保存和培养。
10.无菌工作台:无菌工作台是一个封闭的工作空间,提供无菌环境,用于处理无菌操作和培养物的分装、传递和传染性较强的试样的操作。
11.水培养装置:水培养装置用于提供无菌水用于培养细胞。
12.酶消化仪:酶消化仪用于将培养物中的细胞分离成单个细胞,以便后续的实验操作。
13.细胞计数仪:细胞计数仪用于计算培养物中细胞的数量。
14.PCR仪器:PCR仪器用于进行细胞培养实验中的基因表达、基因检测和基因定量等相关实验。
15.洗鼓机:洗鼓机用于将细胞从细胞培养物中剥离,以便后续操作。
010细胞工程-第一章细胞培养室的设置和准备工作
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移液器 液体试剂精确 取量 电动移液器、 微量移液器、 多通道可调式 微量移液器
使用与校对 1、枪头:一次性 2、轴芯,密闭性 3、第一档、第二档(深入液体4毫米) 4、校对
培养用器皿: ①培养器皿:供细胞接种、生长等用的器皿,可由透明度好、 无毒的中性硬质玻璃或无毒而透明光滑的特制塑料制成。
精确的pH值测 定
注意事项:
1、不要用滤纸擦拭玻璃膜 2、严禁在脱水性介质如无水乙醇、重铬酸钾等中使 用
3、电极不能用于强酸、强碱或其他腐蚀性溶液
二、动物细胞工程实验室常用设备
• CO2培养箱:温度 湿度 酸度PH
CO2培养箱设定的条件为37 ℃ ,5% CO2 使用CO2培养箱培养细胞时应注意的问题:
注意事项:压力、消毒、蒸馏水
显微操作仪
细胞核移植、染色体操作、显微注射、胚胎切割必需之设备
细胞电融合仪
采用高频交 流波,使细 胞排列成双 体或串珠状, 再使用直流 方波长脉冲 使细胞融合。
摇 床:进行细胞悬浮培养,水平往复式或回旋式
• 细胞冷冻储存器:
• 细胞培养工作中常需储存细胞,常用的是 液氮容器。液氮容器根据使用需要分为不 同的类型及多种规格。
离子交换纯水尚不能有效去除有机物,因此用水 时尚需再次蒸馏。
进行细胞培养时,配制各种培养液及试剂等均 需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗, 也应使用2次以上蒸馏水。
• ,使用方便、安全,蒸馏速度快。
自动双重纯水蒸馏器
纯水仪
MRO反渗透系列纯水机 :出水量(25℃):8升/小时,15 升/小时 瞬间出水量:1.5升/分(需选配压力储水桶) 出水水质:反渗透水 Millipore公司:MPC超纯水系列标准型水源(一馏水或自 来水)→ 预处理(PP棉滤、活性碳。去除了水中的颗粒与 降低了自来水中余氯的含量) → 反渗透膜(去除绝大部分 的细菌,离子及有机物) → 储水箱 → 4组抛光混柱(除去 残留在水中的离子与有机污染物) → UV紫外灭菌(杀灭细 菌,进一步降低TOC)或超滤UF(滤掉内毒素同时去除大 量有机物) → 终端滤器(彻底除菌、除颗粒,极低TOC的 超纯水)
细胞培养实验室的设置及设备
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动物组织细胞培养实验室的设计姓名:梁洪学号:11310010214(一)环境要求组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。
要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘。
(二)面积与预算实验室总面积96用左右,大约耗资40万(不含特殊先进设备)。
(三)细胞培养实验室的布局细胞培养实验室布局大致为:无菌操作区、孵育区、制备区、清洗区、消毒灭菌处理区、储藏区。
1 •无菌操作区(1)无菌操作室:无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。
无菌操作间的空气消毒:紫外线灯,空气过滤的恒温恒湿装置。
(2)超净工作台:操作简单,安装方便,占用空间小且净化效果很好。
超净工作台工作原理(大致相同)一-通常是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。
2.孵育区本区对无菌的要求虽不比无菌区严格,但仍需清洁无尘,因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。
孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行,后者费用高,一般实验室多采用孵箱进行工作。
3.制备区在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
4.储藏区主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,此环境也需要清洁无尘。
5.清洗和消毒灭菌区清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开,主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
(四)细胞培养实验室的设备1.常用的基本设备(1)仪器:a显微镜:倒置显微镜一一是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
b)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是37C,温差变化一般不应超过土0.5 C。
恒温培养箱一一应选隔水式或晶体管自控温培养箱,此类培养箱灵敏度高,温度控制较稳定。
细胞工程实验室设计方案(3篇)
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第1篇一、前言细胞工程是一门应用现代生物技术手段,对生物体的细胞进行改造、利用和生产的科学。
随着生物技术的飞速发展,细胞工程在医药、农业、环保等领域具有广泛的应用前景。
为了满足我国细胞工程领域的研究需求,本文提出一种细胞工程实验室设计方案,旨在为相关研究提供有力支持。
二、实验室功能及布局1. 实验室功能细胞工程实验室主要功能包括:细胞培养、细胞分离与纯化、基因工程、蛋白质工程、细胞转染、细胞检测与分析等。
2. 实验室布局(1)实验室总面积:约200平方米。
(2)实验室分区:根据功能需求,将实验室分为以下几个区域:1)细胞培养区:约60平方米,包括无菌操作室、细胞培养室、细胞冻存室等。
2)基因工程区:约40平方米,包括PCR室、酶切室、连接室、转化室等。
3)蛋白质工程区:约30平方米,包括蛋白表达、纯化、检测等。
4)细胞转染区:约20平方米,包括转染操作室、转染培养室等。
5)细胞检测与分析区:约20平方米,包括显微镜室、图像分析室、流式细胞仪室等。
6)辅助区域:约10平方米,包括试剂储存室、仪器设备室、更衣室等。
三、实验室设施与设备1. 细胞培养区(1)无菌操作室:配备超净工作台、紫外线消毒灯、无菌操作柜等。
(2)细胞培养室:配备CO2培养箱、倒置显微镜、离心机、超低温冰箱等。
(3)细胞冻存室:配备液氮罐、低温冰箱等。
2. 基因工程区(1)PCR室:配备PCR仪、凝胶成像系统、紫外灯等。
(2)酶切室:配备酶切仪、酶切反应器、电泳仪等。
(3)连接室:配备连接仪、连接反应器、电泳仪等。
(4)转化室:配备转化仪、转化反应器、电泳仪等。
3. 蛋白质工程区(1)蛋白表达室:配备蛋白表达仪、蛋白纯化柱、蛋白纯化仪等。
(2)蛋白纯化室:配备蛋白纯化仪、蛋白纯化柱、电泳仪等。
(3)蛋白检测室:配备蛋白检测仪、蛋白检测板、酶标仪等。
4. 细胞转染区(1)转染操作室:配备转染仪、转染反应器、电泳仪等。
(2)转染培养室:配备CO2培养箱、倒置显微镜、离心机等。
细胞实验室配置依据
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细胞实验室配置依据
细胞实验室是进行细胞生物学研究的重要场所,为了确保实验结果的准确性和可重复性,实验室的配置需遵循一定的依据。
以下是细胞实验室常见的配置依据:
1. 温度控制:细胞生长需要在稳定的温度条件下进行,一般细胞实验室的温度配置应在 37°C ± 1°C,以模拟人体体温。
温度控制设备可以采用恒温培养箱或培养箱,保持稳定的温度环境。
2. 洁净度:细胞实验室要求高度洁净,以避免细胞污染。
实验室内部应定期清洁和消毒,尽量保持无尘、无菌的环境。
工作区域的台面、仪器设备、培养皿和试剂容器都需经常清洁和消毒。
3. 生物安全:细胞实验室必须遵守生物安全规范,在进行细胞实验时确保人员和环境的安全。
实验室应设立生物安全柜,用于处理有潜在危险的细胞样品,避免细胞材料外泄和交叉污染。
4. 实验设备:细胞实验室配置一些常见的实验设备,如显微镜、培养箱、离心机、PCR仪等。
这些设备能够满足细胞实验的基本需求,提供方便和准确的实验操作。
5. 储存和处理:细胞实验室需配置适当的储存和处理设施,以确保实验材料的保存和废物的处理符合规定。
冰箱和液氮罐可用于保存细胞培养物和样本,而生物废弃物处理设备则用于安全处理实验过程中产生的废弃物。
综上所述,细胞实验室的配置依据主要包括温度控制、洁净度、生物安全、实验设备以及储存和处理设施。
严格按照这些依据进行实验室的配置和管理,可确保实验结果的准确性和可重复性,为细胞生物学研究提供可靠的基础设施。
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细胞培养实验室的设备配置及用途
1. 超净工作台
目前绝大部分细胞实验室使用超净工作台实现无菌操作,具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。
安徽人和净化为您介绍两种主要超净工作台——侧流式(垂直式)和外流式(水平层流式)。
工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。
(1)侧流式工作台:空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧,也有从上向下或从下向上流向对侧,形成气流屏障保持工作区无菌,工作台结构为封闭式;
(2)外流式工作台:净化后的空气面向操作者流动,因而外方气流不致混入操作,工作台结构为开放式,但进行有害物质实验操作对操作者不利。
超净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度,符合要求的超净工作台其洁净度应达到100级,用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应超过3.5个/L;空气流量应控制在0.75-1.0m3/s;细菌菌落数平均<1个,根据无菌状况必要时需要置换过滤器。
2. 显微镜
倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备,主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。
如资金允许,建议选用配置有照相系统的高品质相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等,可随时拍摄并记录细胞生长情况。
3. 培养箱
体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,一般最适生长温度为37℃,温差变化不应超过±0.5℃。
温度升高2℃时,变不利于细胞生存,温度达到40℃以上细胞将很快死亡。
因此,可精确控温的恒温培养箱、CO2培养箱是最佳选择。
(1)恒温培养箱:应选隔水式或晶体管式自控温培养箱,此类培养箱灵敏度高,温度控制较稳定。
一般的恒温培养箱价格较便宜,其缺点是只宜于作密闭式培养。
(2)CO2培养箱:目前多数的细胞培养室已广泛使用。
CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2(常用浓度为5%),易于稳定培养液pH,适用于开放或半开放培养。
使用培养瓶时,为使培养瓶内与外界保持通气状态,可将瓶盖略微旋松,为避免细胞被污染,使用这种培养方式时,培养箱内空气必须保持清洁,需定期用紫外线照射或酒精消毒,同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽,防止培养液蒸发,保持箱内相对湿度在100%。
(3)细胞培养耗材:培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。
4. 烘箱(干燥箱)
用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。
干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。
其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。
升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。
需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。
消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。
5. 水纯化装置
细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。
目前有多种纯化方法相结合,可使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水装置使用非常灵活方便,可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液枪、还可根据各类实验用水要求选择配置杀菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水装置。
细胞培养实验室必备设备,应专用,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。
一般包括普通冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。
普通冰箱:储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品,可短期保存组织样本。
-20℃低温冰箱、超低温冰箱:用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂,如酶、血清等。
7. 细胞冷冻储存器
储存器常用的液氮容器,根据使用需要分为不同类型和规格。
选择液氮容器时需要考虑三个因素:容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。
液氮容器的大小一般在25-500L,可以储存1ml的安瓿250-15000个左右。
液氮温度最低文帝可达-196℃,使用时应注意避免冻伤。
由于液氮易挥发,需注意观察剩余液氮量,及时补充,避免液氮不足使细胞受损或死亡。
目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择,可配置有电子控制器的液氮储存器,实现冻存自动化;并可监测液氮水平和样品温度,确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统,设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警;同时具备热气体旁路系统,防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐,从而更有效地保护样品,防止容器内升温。
另外,可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮,保证样品安全。
8. 离心机
细胞培养时,通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。
一般常规配置4000rpm台式离心机;若要做细胞沉降,需要使用80-100G离心力,因为离心力过大会损伤细胞。
根据不同要求,有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。
常用的有精密天平和分析天平。
分析天平的精确度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。
一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平:取样量大于100mg宜选用精确度0.1mg的天平;取样量100-10mg,选用精确度0.01mg的天平;取样量10mg宜选用精确度0.001mg的天平。
天平需要定期校准,可选择有自动校准功能的天平,方便维护。
天平使用需要注意清洁,避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。