BD资料-临床检验质量控制的基本知识

临床检验质量控制的基本知识
一、 质量控制的意义
现代医学关于疾病的诊断、治疗方案的制定已经越来越依赖科学的检查和实验手段。

作为临床检验工作，其工作的质量标准就是使检验的结果最佳地符合病人有无病变的实际情况，也是实验室能对临床要求最大的满足。

为此，从临床医师开出化验单，直至拿到检验报告的整个过程都在质量控制的范畴之中，即所谓全面质量控制。

所谓全面质量控制，在临床检验中分为分析前、分析中、分析后的质量控制。

分析前的质量控制主要内容是病人准备和标本采集、保存和传送等。

分析中的质量控制即分析过程的控制。

在检验操作中，将质控标本（即质控品）和病人标本一起操作，完全一样的分析条件，从质控品的检验结果了解分析过程中质量控制情况。

分析后的质量控制，主要是对数据结果的处理，对检验报告单的校对和及时将报告单送给临床并听取反馈意见。

现代医学也强调临床医师对检验质控的参与。

临床医师应该熟悉各项实验对各种疾病诊断的预期效果，不同用途时参考值确定，病人个体内及个体间的生物变异等。

此外，质量控制也必须重视检验方法学的选择和评价。

任何1次检验都有误
差，在一定意义上可以将误差分为实验方法学的“固有”误差及除此之外的“外加”误差。

质量控制的方法和手段都只能减少或消除“外加”误差，但不能作用于方法学的“固有”误差。

要使检验结果的误差控制在临床可接受的低水平或者允许的误差限度内，必须使用总误差水平（方法学“固有”误差）符合临床要求的检验方法（方法学、试剂、仪器），才能保证检验结果在质量控制下符合临床要求。

二、临床检验的分析过程的质量评价
进行临床检验内部质量控制的最通用做法是将质控品和病人一起进行常规检验，从质控品测定的结果了解检验质量。

首先，应准备质控品（可从B-D公司直接购得）。

在开始使用质控品的第一个月内，检验人员每天将质控品随机插入病人标本中进行控制项目的测定。

月末对当月的测定结果（n≥20）做简单统计，求出均值x和标准差s。

有95%的可能性，当月的所有测定值在x ±1.96s之间。

若第一个月的所有标本测定结果均符合临床要求，实验工作正常，这样均数反映了该检验项目在第一个月内对质控品测定的平均水平，标准差反映每天测定值对于均数的离散程度。

以后每天、每周、每月的测定结果重复于这一范围，说明日常测定结果在控制之下。

为便于观察质控品的测定结果，及时了解有何失效情况，常使用质控图。

一
般质控图是测定时间（次数）和测定值的关系图（见插图），图中标出x 、x±2s、x ±3s的横线。

x±2s为上下警告限，x±3s为失控限。

质控图建立后将每次质控品测定值点绘在图上。

按照正态分布规律：①所有测定值应均匀分布于均值两侧，不应有明显不均
之感；
②质控品测定值有95%可能性在x±2s范围之内；
③不应有连续6次以上的结果一直大于或小于均值；
④不能有连续5次以上的结果有逐渐增高或降低的倾
向；
⑤不应有连续两次结果在x±2s范围之外；
⑥没有一次测定结果在x±3s范围之外。

如果不符上述规律，说明测定结果失控。

只有证实当天质控结果在控制之下时才能发出检验结果。

一旦出现失控须查明原因，采取措施重新检验。

下面介绍一种质量控制方法：Westgard多规则控制法
该控制法以A L及R L表示控制规则。

L是控制限，A代表控制观察数，R是两个控制结果的绝对差异。

12s表示有1次控制结果超出均数2个标准差范围。

是一个警告规则。

13s表示有1次控制结果超出均数3个标准差范围。

是失控规则之一。

22s表示同批实验中2个质控品的结果同方向超出均数2个标准差范围；或者连着2批实验中同方向超出均数2个标准差范围。

也是失控规则之一，对检出系统误差灵敏。

41s表示连续4次控制结果同方向超出均数1个标准差范围。

也是失控规则之一，对检出系统误差灵敏。

10x表示连续10次控制结果在均数的一侧（高于或低于均数，不管差异大小）。

也是失控规则之一，对检出系统误差敏感。

R4s表示同批实验中2个质控品的结果超出4个标准差范围。

也是失控规则之一，对检出随机误差敏感。

Westgard多规则控制方法：
① 使用高、低两种浓度的质控品，随病人标本一起每批测定1次。

积累20次 以上的数据，计算各自的均数和标准差。

② 每种质控品绘制一份质控图。

③ 下一周期的每次质控品测定值点绘于各质控图上。

④ 若两个质控品的测定值都在各自的x±2s限值内，说明标本测定结果在控
制之下，可以发出报告。

⑤ 若有一个质控品测定值超出2s限值，符合12s规则有可能失控，保留检验
结果。

检查当天及前一时期的质控品测定值结果是否符合13s、22s、41s、10x、R4s规则中的任一个。

若有，说明结果失控，不能报告；若没有，说明结果仍在控制之中，可发报告。

⑥ 有失控出现，按照控制规则确定发生的误差类型，寻找误差原因，纠正后
重新测定。

三、 开展室间质量评价
开展内部的质量控制使实验的受控项目达到一定的精密度。

临床上往往只对
实验结果是否可重复较敏感，若实验结果存在较稳定的系统误差，临床和实验室一般不易察觉，因此内部的质量控制还在于控制结果的不精密度。

由专门机构定期向临床实验室分发标本（即质控品），要求各单位检测后返回测定结果，经过整理和统计，以数据和报告形式反映各实验室间及各分析方法间的差异，根据各单位测定结果与靶值的离散程度，计算出该实验室所的分数，及
时反馈给参加者，便于改进工作。

这就是室间质量评价的基本形式。

室间质量评价主要是控制实验室工作的不准确度，是对室内质量控制的补充。

流式细胞仪质控品简介之一
CD-Chex
Immunology Control for Cluster Designation
分化决定簇(CD)抗原检测质控物
•用途
CD-Chex是稳定后的正常人外周血白细胞样本，用做流式细胞仪检测CD系列抗原表达时的质量控制品。

C D-Chex适用于附录表格中所列出的单抗。

CD-Chex可以在Becton Dickinson，Coulter 和Ortho的流式细胞仪上用手动或自动的设门方式进行检测分析。

•原理
用流式细胞仪检测免疫表型为我们分析血标本中白细胞的类型和数量提供了一个快速而准确的方法。

测定外周血白细胞亚型已经被广泛用于免疫缺陷病、自身免疫病和肿瘤等疾病的诊断和治疗监控。

CD-Chex质控细胞包含了可用单克隆抗体检测的表面抗原，用荧光抗体染色后，CD-Chex质控细胞将为正常白细胞亚群提供参考值，与说明书提供的范围比较可以得到系统质量控制的结果。

•试剂
CD-Chex由稳定的人白细胞悬浮在含有防腐剂的培养基中构成。

•贮存与稳定期
在2~8℃中，可贮存至说明书中的有效期。

开盖后，可稳定14天。

CD-Chex不能冷冻，不能用红细胞裂解液进行处理。

•使用方法
1、轻轻混匀，使细胞悬浮。

2、加100ul细胞入分析管中。

3、加入指定量的抗体。

（加入量与常规标本相同）
4、按照抗体试剂说明书孵育一定时间。

5、加入1mlPBS，300g离心5分钟。

6、去掉上清液。

7、重复5、6步一次。

8、加入1mlPBS，轻轻混匀。

9、用与病人样品同样的方法上流式细胞仪分析。

10、WBC的绝对计数要在另一台校正过的血球计数仪上进行。

•操作步骤
仪器及试剂的操作步骤分别按照流式细胞仪和单抗试剂的说明书。

•注意事项
1、不能用红细胞裂解液处理。

2、不能固定。

3、CD-Chex未用Ficoll离心分离单个核细胞的方法测试过。

4、CD-Chex 不能被用做校正品。

•实验结果
说明书中提供的每个抗原的期望值是在标准校正的流式仪上三次检测的平均值。

一般建议使用时用连续五次的分析平均值。

实验结果要在靶值和允许的误差范围内，否则应评估仪器状态、操作员技术、操作过程以及产品影响因素，排除问题后才能检测病人标本，以保证病人报告结果的准确性。

•质量控制正规操作规程
1、正规流式细胞仪开机程序。

2、正规流式细胞仪校正程序（FACSComp软件校正通过）。

3、每天作常规病人样品前，先做CD-Chex样品分析，检查是否在允许误差范围内，
并绘制质控图。

4、如出现失控情况，检查所有实验步骤，包括仪器状态和试剂质量。

5、如质量控制正常，可常规检测病人样品。

6提醒广大用户注意的是：为保证质控和病人结果的准确性，建议使用可用于体外诊断的试剂。

•附录1 CD-Chex 参考值范围：（批号：92420050 有效期：06-SEP-99）
Antibody Specificity %Positive Cell±Expected Range Absolute Number ±Expected Range CD2 T Cells 78.5 10.0 ---- ----
CD3* T Cells 73.3 10.0 ---- ----
CD4* T helper 51.8 6.0 ---- ----
CD5 T,B subset 69.5 10.0 ---- ----
CD8* T cytotoxic 21.0 6.0 ---- ----
CD19 B Cells 18.3 5.0 ---- ----
CD20 B Cells 17.0 5.0 ---- -----
CD56/CD16+5
6
NK Cells 9.5 4.0 ---- ----
HLA-DR Activated
LC
24.5 6.0 ---- ----
CD14 Monocyte 90.0 10.0 ---- ---- CD45 Leucocyte
CD45仅仅用于设“门”。

Lymphocyte% 37.0 10.0 ---- ---- Monocyte% 7.5 5.0 ---- ---- Granulocyte% 55.5 10.0 ---- ---- Absolute WBC
(×109/L)
---- ---- 6.4 0.5 *△T Sum = 1±5
△ T Sum =%CD3-(%CD4+%CD8)
附录2下表中所列标记物均未通过FDA用于临床诊断，只用于研究。

（批号：92420050 有效期：07-NOV-99）
Antibody Specificity % Positive Cell ± Expected Range
CD7 T-Cell 73.5 15.0
CD22 B-Cell 18.5 4.0
CD10 Granulocyte 85.0 15.0
CD13 Granulocyte 90.0 10.0
CD33 Monocytes 90.0 10.0
CD45 Leucocytes 90.0 10.0
流式细胞仪质控品简介之二
CD-Chex PLUS
Immunology Control for Cluster Designation
分化决定簇(CD)抗原检测质控物
•CD-Chex PLUS是稳定的正常人外周全血样本，可用做全血流式细胞仪分析的质量控制品。

可以测试的抗原包括：CD2，CD3，CD4，CD5，CD8，CD19，CD20，CD56/CD16+56，
CD14，CD45，HLA-DR，CD7，CD22，CD10，CD13，CD13，CD33，CD34，Kappa，Lambda
等。

•CD-Chex PLUS 是全血样本，所以制备时应加入溶血剂。

这也是CD-Chex PLUS 与CD-Chex最为不同之处。

其余注意事项参见CD-Chex介绍。

产品 包装 目录号 TESTS价格（US）CD-Chex PLUS
Single Vials 1 x 2.5mL IVD 213325 25 55
1 x 4.0mL IVD213321 40 65
Kits
2 x 2.5mL IVD213326 50 100
5 x 2.5mL IVD213327 125 215
2 x 4.0mL IVD213322 80 125
5 x 4.0mL IVD213323 200 305
CD-Chex
Single Vials 1 x 2.5mL IVD 213202 25 55
1 x 4.0mL IVD213101 40 65
Kits
2 x 2.5mL IVD213202 50 100
5 x 2.5mL IVD213205 125 215
2 x 4.0mL IVD213102 80 125
5 x 4.0mL IVD213105 200 305 CD-Chex PLUS CD4 Low
Single Vials 1 x 2.5mL IVD 213330 25 65 Kits
2 x 2.5mL IVD213331 50 120
5 x 2.5mL IVD213332 125 260 CD-Chex PLUS Combination Kits
1 x 2.5mL each Normal, Low IVD213331 50 120
2 x 2.5mL each Normal, Low IVD213332 125 260
5 x 2.5mL each Normal, Low IVD213322 80 125。