天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定-精品文档

天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定

Determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules

XUWenfeng XUShuo HE Xiaorong JIANG Wenqing WUXuejun KUANG Yongmei JIN Pengfei

Department of Pharmacy ，Beijing Hospital National

China

Center of Gerontology ，Beijing 100730

[] Objective To establish a high performance liquid chromatography ( HPLC) method for the determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules. Methods An Alltima C18 column (150 mnX 4.6 mm , 5 卩m) was used for the separation ，with methanol as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 285 nm. Results The method showed good linearity with correlation coefficient of 0.9999 for vitamin E. The assay method showed good specificity. The

precision and stability were satisfactory with the respectively. The average spiked recovery was 100.8% = 6)，the recovery rate wasgood. The determination results was 101.2%，100.8% and 102.7% of the labeled amount of the three batches of samples respectively. Conclusion The established method is accurate ，simple and fast ，and can be used for determination of narural vitamin E in Natural

relative standard deviations RSD) of 0.17% and 0.87% Vitamin E Soft Capsules.

维生素E为微黄色至？S色澄清的黏稠液体，几乎无臭，遇

光色渐变深，不溶于水，溶于无水乙醇、丙酮等有机溶剂，在空气中会缓慢氧化，紫外线照射可使其分解。维生素E分为合成型或天然型，合成型为dl- a -生育酚醋酸酯，d-a -生育酚醋酸酯[1] 。大量研究表明，维生素E 具有抗氧化、调节机体免疫力、促进生育、抗衰老、细胞保护等生物学功能[2-5] 。维生素E 属

于人体必需的植物源脂溶性维生素，机体不能合成，必须从膳食

中获取。植物油中富含天然维生素E，是膳食维生素E的主要来源⑹，同时维生素E也常被作为药品、营养保健品和食品添加剂使用。维生素E的定量方法有气相色谱法[1，7-11]、气相色谱-质谱法[12-13] 、高效液相色谱法[14-17] 、高效液相色谱-

质谱法[18] 、毛细管电泳法[19] 、红外光谱法[20] 等。杨红娟等

[21]采用高效液相色谱法对天然维生素E软胶囊中a -生育酚的

含量测定进行了研究，但高效液相色谱法测定天然维生素E软胶

囊中d- a -生育酚醋酸酯的含量尚未见报道。本实验应用高效液

相色谱技术建立了天然维生素E软胶囊中维生素E含量测定的方

法，对于补充其质量控制具有一定参考价值。

1 仪器与试药

1.1 仪器

1260 型高效液相色谱系统，配有四元梯度泵（型号：G1311C, 自动进样器（型号：G1329B，柱温箱（型号: G1316A），DAD 检测器（型号：G4212B （安捷伦科技XX公司，美国）；Mettler XP-205 型电子天平（精密度为十万分之一，梅特勒-托利多集团，瑞士）；KQ-800KDE型超声仪（昆山市超声仪器XX公司，中国）；Milli-Q 超纯水系统（密理博中国XX公司，美国）。 1.2 试药

无水乙醇（分析纯,批号：20141113,国药集团化学试剂

XX公司）；甲醇［色谱纯，批号：164787,赛默飞科技（中国）

XX公司］;实验用水为纯净水；甘油［批号：20851101,国药控

股星鲨制药（厦门）XX公司］;大豆油（批号：20170519,益海

嘉里食品营销XX公司）；维生素E对照品购自中国食品药品检

定研究院（批号：100062-201110，含量为97.7%）；天然维生

素E 软胶囊［每粒含有天然维生素E 400 IU （相当于维生素E 294.1 mg）[22] ,批号：450279-12、442049-17、423022-11 ,

美国“天然素”药厂］。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱选择十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Alltima ，150 mmx 4. 6 mm, 5 m ；甲醇为流动相；检测波长为285 nm；

流速为1.0 mL/min ;进样体积为10卩L; 28C。所用溶液进样

前均经0.22 U m孔径尼龙滤膜过滤。

2.2对照品溶液的制备

避光操作，取维生素E对照品约250 mg,精密称定，置于50 mL 量瓶中，加适量无水乙醇，振摇使溶解，加甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，即为维生素E 储备液( 5.0 mg/mL )。精密量取维生素E储备液1、2、3、4、5 mL,分别置于10 mL容量瓶

中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，获得维生素E质量浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL的对照品溶液。取中间浓度(1.5 mg/mL的对照品溶液用作含量测定时的对照品溶液。

2.3供试品溶液的制备

避光操作,精密称取天然维生素E 软胶囊内容物约0.1 g( 约振摇使溶解,甲醇稀释并定容至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

相当于维生素E 75 mg,置50 mL容量瓶中,加适量无水乙醇,

2.4阴性对照溶液的制备

取说明书中的辅料，制备不含维生素E的阴性空白？悠罚？按“2.3”项下操作,得到阴性对照溶液,用于本实验的专属性研究。

2.5专属性及系统适应性实验分别取阴性对照溶液、维生素E

对照品溶液和供试品溶液进

样分析，考察样品中辅料及其他成分对维生素E色谱峰的干扰。上述3 种溶液的色谱图(图1)显示,样品辅料和其他成分不干

扰维生素E的测定。理论板数按维生素E计算应＞4000。