组织培养 植物组织培养基本操作
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2020/3/24
一、培养基的成分 培养基一般包括无机盐、有机化合物和生长调
节剂三大基本组成成分。 1、无机盐类 功能 离体组织生长发育的基本成分
根据植物对必需元素需要的量，可以分为以下两 类：
2020/3/24
大量元素—植物所需元素的使用量一般在每升几十 -几千毫克，有C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。
盐酸硫胺素-VB1、盐酸吡哆醇-VB6、烟酸-Vpp、 生物素-VH、维生素C-Vc。
⑶肌醇 功能 促进糖的转化、维生素和激素的利用，对 胚状体和芽的形成有良好影响。 用量一般50-100mg/L。
2020/3/24
⑷腺嘌呤 合成各种细胞分裂素的前体物质之一，利于细 胞分裂，促进芽的形成和生长。 ⑸氨基酸 蛋白质的成分，是有机氮化合物，常用甘氨酸 和多种氨基酸混合物如水解酪蛋白、水解乳蛋白。 ⑹其它复合成分 成分尚不清楚的天然提取物，如椰乳、香蕉汁、 酵母提取液、番茄汁、麦芽糖等。
休眠以及诱导单性结实等。 与生长素协调作用对形成层分化有影响，刺激体细胞
胚进一步发育成植株。 有20多种，目前主要是赤霉酸GA3。
2020/3/24
4、水 离体培养中，既是培养基营养成分的溶剂，又
是培养基的重要组成部分，占培养基成分的95%。 原生质体培养、细胞培养及分生组织培养一般
应用双蒸水或超纯水 大批量快速繁殖培养，可用一般蒸馏水或纯净
水。
2020/3/24
5、其它附加成分 ⑴琼脂
功能 来自海藻的多糖类物质，组织培养中 最常用作凝固剂，是最方便、最好的凝固剂和支 持物。
常用量0.6%-1.0%，不是培养基必需成分。 卡拉胶 海藻提取物，含杂质少纯度更高， 凝固后培养基透明，利于材料观察。
2020/3/24
⑵活性炭 功能 常用的吸附剂，某些培养类型中，可
以吸附培养过程中产生的一些有毒物质（酚类物 质），有利于培养物的生长。常用浓度1～5mg/L 左右
其吸附作用选择性较差，使用应慎重。常受 温度影响，低温吸附效果好，高温吸附能力降低 甚至解吸附。
2020/3/24
⑶抗生素 培养基中添加抗生素可防止菌类污染，常用
的抗生素有青霉素、链霉素、庆大霉素等，用 量一般为5～20mg/L。大部分抗生素需要过滤除 菌。
外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤组织，或顶芽、腋 芽直接萌发形成芽。
将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官原基 或形成胚状体，最后发育形成再生植株。 （4）增殖培养
分化形成的芽、原球茎数量有限，采用适当的增殖培 养基经反复多次切割转接。
当芽苗繁殖到一定数量后，再将一部分用于壮苗生根， 另一部分保存或继续扩繁。进行脱毒苗培养的还要进行病 毒检测。
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（5）生根培养 刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降
低或不加细胞分裂素浓度，提高生长素浓度，促进芽苗 生根，提高其健壮度。 （6）炼苗移栽
选择生长健壮，有3～5条根的生根苗进行炼苗，移 栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫。当苗 完全成活后，再移向大田。
2020/3/24
5、将母液混合液加入到加热容器中，搅拌混 匀。
6、蒸馏水定容至所需体积。 7、测试培养基溶液的PH值(5.8-6.0)，过高滴 加 0 . 1 mol/L 的 HCL调 整 ，过 低 滴加 0 . 1 mol/L的 NaOH调整。 8、迅速分装到培养瓶中，备用。
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培养基是离体培养物赖以生存和生长的人工环境 的重要组成部分，常用的培养基依据其物理状态的 不同分为固态培养基和液态培养基。
容至需要的体积。 （三）药品用量的计算：
配制母液时药品用量(mg)=配方用量(mg)×浓 缩倍数×制备容量（L）
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二、培养基的制作 （一）母液取用量的计算
制 备 培 养 基 时 母 液 取 用 量 （ ml） =1000÷浓缩倍数×制备培养基数量（L）
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（二）培养基制作程序 1、按大量元素、微量元素、铁盐、有
拟定培养方案
外植体预处理
外植体无菌接 种
启动培养
分化出芽、胚 状体或原球茎
继代增殖培养
生根培养
炼苗移栽
成活供生产使 用
2020/3/24
培养基配制灭菌
植物组织培养的一般程序
第一节 培养基成分、种类及特点
植物生长必需16种基本元素： N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、 Cl、C、H、O。 离体培养条件下，各元素主要从培养基中获得： H和O来源于水，C来源于添加的糖类，其它矿质元 素来源于组成培养基的无机盐。 培养基是根据植物生长所需营养成分，配制成的 供植物生长的人工制作的营养物质。
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一、培养基母液的配制 （一）营养成分的配制
根据药品性质将母液配制成以下四类： 1、大量元素
可以混在一起配制成10—20倍液，硫酸镁和氯 化钙Ca２+和Mg2+会与磷酸盐混合，产生不溶性沉淀， 要分别单独配制Ca２+与PO4-一起混合易沉淀，定容 后消失。
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2、微量元素 可配成100—200倍混合母液，KI可单独配。 3、铁盐 硫酸亚铁和EDTA钠盐易沉淀，需单独配制，配成 100—200倍鳌合剂不易沉淀。 4、有机化合物 维生素、肌醇、氨基酸等一起配成100或200倍液， 也可分别配制。
培养失败，因而还要对培养基进行灭菌处理。 （一）高压蒸汽灭菌 培养基的灭菌一般采用湿热灭菌法： 1、培养瓶及培养器械放入高压灭菌锅。 2、灭菌锅加水至淹没电热丝。
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3、封闭高压灭菌锅各出气口。 4、接通电源加压至49kPa（0.05MPa） 5、打开排气阀，排冷气至压力0 kPa。 6、继续加压至108kPa（0.11mPa-0.12Mpa，即121℃ ） 7、压力至108kPa（0.11mPa-0.12Mpa，即121℃）时 ，稳压在此压力15-20min。 8、关闭电源自然冷却至压力为0 kPa。 9、取出培养基和器械冷却，贮存于30℃以下室内。
常用6-BA、ZT、KT、2iP。
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细胞分裂素的生理效应
植株的形态建成是CTK和IAA的比值调控的 CTK/IAA高，诱导愈伤组织形成芽 CTK/IAA低，诱导愈伤组织形成根
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2020/3/24
烟草 在不 同细 胞分 裂素 与生 长素 浓度 下的 生理 效应
⑶赤霉素类 功能 促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子
所需的培养基，并经高压灭菌或过滤除菌后备用。 （2）外植体的选择与消毒 选择合适的部位作为外植体，采回后经过处理，然后进
行消毒处理。 将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块，
或剥离出茎尖、挑出花药，接种到启动培养基上。
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（3）启动培养 接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养，促使
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3、生长调节物质
⑴生长素类
功能 促进细胞脱分化和细胞伸长， 诱导愈伤组织产生
生长素与细胞分裂素协调作用，在 离体培养中，生长素促进根的形成， 抑制芽的形成。
液体培养中利于体细胞胚胎发生。 常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。
IBA促进生根
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⑵细胞分裂素类
功能 促进细胞分裂和扩 大，调节器官分化，延缓组 织衰老，增强蛋白质合成。 离体培养中，促进不定芽的 发生，与生长素协调作用可 有效控制培养物的生长与分 化。
⑴糖类 功能 离体培养物生长与发育不可缺少的有机成分 ，即作为碳源，又维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。 多使用蔗糖，试管苗生长与繁殖浓度2-3%，幼胚培 养4-6%，某些特殊培养中用8-10%。 细胞和原生质体培养还用麦芽糖、葡萄糖、果糖。
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⑵维生素类
功能 参与酶的形成、蛋白质、脂肪代谢，明显 的促进离体培养物的生长。
培养基。
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3、根据作用分：
诱导培养基-诱导外植体启动生长 增殖培养基-诱导离体培养苗扩大繁殖。 生根培养基-诱导离体培养苗生根 4、根据营养水平分： 基本培养基-包含无机盐等基本营养成分。 完全培养基-包含使植物离体生长全面营养。
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（二）几种常用培养基 细胞工程常用的基本培养基有： MS、MT、White、Nitsch、 Blaydes、N6、B5、NT、 SH、Miller、Heller等。
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第一节 培养基成分、种类及特点 第二节 培养基的制备 第三节 外植体无菌接种 第四节 外植体培养 第五节 试管苗的驯化与移栽
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组织培养步骤图
（1）准备阶段 查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合
实际制定出切实可行的培养方案。 根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段
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（三）几种常见培养基的特点 1、富盐平衡培养基
无机盐浓度高，元素比例适当，离子平衡 好，具有较强的缓冲性，培养中维持较好的稳定性 ，含高量氮、钾，营养丰富，元素种类齐全，MS培 养基使用最广泛。
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2、低盐培养基 无机盐浓度低，有机成分含量低，多数作为
生根培养基、胚胎培养使用，常用White培养基。 3、高硝态盐培养基
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（二）植物生长调节物质的配制 植物生长调节物质分别配成母液储于冰箱，
浓度一般为0.5－1mg/ml。 1、IAA、NAA： 先用少量95%酒精使之充分溶解。 2、2,4－D： 可用少量0.1mol/L的NaOH溶液充分溶解，再缓缓
加蒸馏水定容至需要的体积。
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3、KT和BA等细胞分裂素类： 先用少量0.1mol/L 的HCl溶解，再用蒸馏水定
⑷抗氧化物 抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸、聚乙烯
吡咯烷酮（PVP）及抗坏血酸（Vc），可用50～ 200mg／L的浓度洗涤刚切割的外植体伤口表面， 或过滤除菌后加入固体培养基的表层。
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二、常用培养基的种类、配方及特点 （一）培养基种类 1、根据态相分：
固体培养基-加凝固剂的培养基 液体培养基-不加凝固剂的培养基。 2、根据培养过程分： 初代培养基-初次接种外植体的培养基。 继代培养基-接种初代培养之后培养物的
4、中盐培养基 大量元素无机盐为MS的1/2，微量元素种类
减少含量增高，无肌醇维生素种类多，增加生 物素、叶酸，有H、Hitsch、Miller、Blaydes 等培养基，适用于特殊细胞培养。
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第二节 培养基的制备
制作一升培养基所需药品20多种，为节省时间和 配制的准确，需将各种药品浓缩成一定倍数，并且 混合成一定母液，进行保存。制作培养基时根据需 求制培养基数量取用母液。
机成分顺序将母液取出，混合。 2、适量蒸馏水放入加热容器，蒸馏水
应少于所制培养基数量，约终体积的2/33/4，接通电源加热。
3、向加热容器中加入称量好的琼脂（ 0.6-0.8%），搅拌加热，至完全溶化。
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培养基制作程序图
4、琼脂熬化后，称取相应量的蔗糖（2-3%） ，加入加热容器中至溶解。
第二章 植物组织培养基本操作
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宜职院08.9
目的与要求
了解植物组织培养的培养基种类、成分及其特点， 学习植物组织培养基本操作，了解离体培养环境条 件，以及炼苗移栽基本方法。
具有植物组织培养基本操作程序的认知。能够识 别各类培养基特点，熟悉MS培养基成分；具有制 作培养基能力，具有选择外植体、表面灭菌、无菌 接种等基本能力；具有植物组织培养条件控制基本 能力；有进行组培苗驯化练苗的基本能力。
微量元素—植物所需元素的浓度小于10-5～107mol/L，Fe、Cu、Zn、Mn、Mo、B、Cl。
除C、H、O外，其它矿质元素通常以离子态吸收 N-硝态氮和铵态氮
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2、有机化合物 培养基中只有无机盐叫做基本培养基，为使培养
物更好的生长，还需添加有机成分，常用有糖类、维生 素、醇类、嘌呤、氨基酸等。
固态培养基一般使用琼脂为凝固剂，也有使用 卡拉胶或魔芋粉为凝固剂的。
液态培养基不使用凝固剂，但需要在容器中 置入适当的支撑物，试管为培养容器的支撑物可 用滤纸桥，底面积较大的培养容器，支撑物可选 用脱脂棉等。
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固体培养基
三、培养基及培养器械的灭菌 制备好的培养基如果带菌，会导致植物离体
较低铵盐，高硝酸盐和盐酸硫胺素B5培养基 适合双子叶植物特别是木本植物的生长。
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N6培养基为水稻等禾谷类花药培养设计， KNO3和（NH4）2SO4含量高,不含钼。SH培养基 (NH4)H2PO4代替（NH4）2SO4,矿质浓度较高， 多数单子叶和双子叶植物上使用较好。
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一、培养基的成分 培养基一般包括无机盐、有机化合物和生长调
节剂三大基本组成成分。 1、无机盐类 功能 离体组织生长发育的基本成分
根据植物对必需元素需要的量，可以分为以下两 类：
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大量元素—植物所需元素的使用量一般在每升几十 -几千毫克，有C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。
盐酸硫胺素-VB1、盐酸吡哆醇-VB6、烟酸-Vpp、 生物素-VH、维生素C-Vc。
⑶肌醇 功能 促进糖的转化、维生素和激素的利用，对 胚状体和芽的形成有良好影响。 用量一般50-100mg/L。
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⑷腺嘌呤 合成各种细胞分裂素的前体物质之一，利于细 胞分裂，促进芽的形成和生长。 ⑸氨基酸 蛋白质的成分，是有机氮化合物，常用甘氨酸 和多种氨基酸混合物如水解酪蛋白、水解乳蛋白。 ⑹其它复合成分 成分尚不清楚的天然提取物，如椰乳、香蕉汁、 酵母提取液、番茄汁、麦芽糖等。
休眠以及诱导单性结实等。 与生长素协调作用对形成层分化有影响，刺激体细胞
胚进一步发育成植株。 有20多种，目前主要是赤霉酸GA3。
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4、水 离体培养中，既是培养基营养成分的溶剂，又
是培养基的重要组成部分，占培养基成分的95%。 原生质体培养、细胞培养及分生组织培养一般
应用双蒸水或超纯水 大批量快速繁殖培养，可用一般蒸馏水或纯净
水。
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5、其它附加成分 ⑴琼脂
功能 来自海藻的多糖类物质，组织培养中 最常用作凝固剂，是最方便、最好的凝固剂和支 持物。
常用量0.6%-1.0%，不是培养基必需成分。 卡拉胶 海藻提取物，含杂质少纯度更高， 凝固后培养基透明，利于材料观察。
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⑵活性炭 功能 常用的吸附剂，某些培养类型中，可
以吸附培养过程中产生的一些有毒物质（酚类物 质），有利于培养物的生长。常用浓度1～5mg/L 左右
其吸附作用选择性较差，使用应慎重。常受 温度影响，低温吸附效果好，高温吸附能力降低 甚至解吸附。
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⑶抗生素 培养基中添加抗生素可防止菌类污染，常用
的抗生素有青霉素、链霉素、庆大霉素等，用 量一般为5～20mg/L。大部分抗生素需要过滤除 菌。
外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤组织，或顶芽、腋 芽直接萌发形成芽。
将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官原基 或形成胚状体，最后发育形成再生植株。 （4）增殖培养
分化形成的芽、原球茎数量有限，采用适当的增殖培 养基经反复多次切割转接。
当芽苗繁殖到一定数量后，再将一部分用于壮苗生根， 另一部分保存或继续扩繁。进行脱毒苗培养的还要进行病 毒检测。
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（5）生根培养 刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降
低或不加细胞分裂素浓度，提高生长素浓度，促进芽苗 生根，提高其健壮度。 （6）炼苗移栽
选择生长健壮，有3～5条根的生根苗进行炼苗，移 栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫。当苗 完全成活后，再移向大田。
2020/3/24
5、将母液混合液加入到加热容器中，搅拌混 匀。
6、蒸馏水定容至所需体积。 7、测试培养基溶液的PH值(5.8-6.0)，过高滴 加 0 . 1 mol/L 的 HCL调 整 ，过 低 滴加 0 . 1 mol/L的 NaOH调整。 8、迅速分装到培养瓶中，备用。
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培养基是离体培养物赖以生存和生长的人工环境 的重要组成部分，常用的培养基依据其物理状态的 不同分为固态培养基和液态培养基。
容至需要的体积。 （三）药品用量的计算：
配制母液时药品用量(mg)=配方用量(mg)×浓 缩倍数×制备容量（L）
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二、培养基的制作 （一）母液取用量的计算
制 备 培 养 基 时 母 液 取 用 量 （ ml） =1000÷浓缩倍数×制备培养基数量（L）
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（二）培养基制作程序 1、按大量元素、微量元素、铁盐、有
拟定培养方案
外植体预处理
外植体无菌接 种
启动培养
分化出芽、胚 状体或原球茎
继代增殖培养
生根培养
炼苗移栽
成活供生产使 用
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培养基配制灭菌
植物组织培养的一般程序
第一节 培养基成分、种类及特点
植物生长必需16种基本元素： N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、 Cl、C、H、O。 离体培养条件下，各元素主要从培养基中获得： H和O来源于水，C来源于添加的糖类，其它矿质元 素来源于组成培养基的无机盐。 培养基是根据植物生长所需营养成分，配制成的 供植物生长的人工制作的营养物质。
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一、培养基母液的配制 （一）营养成分的配制
根据药品性质将母液配制成以下四类： 1、大量元素
可以混在一起配制成10—20倍液，硫酸镁和氯 化钙Ca２+和Mg2+会与磷酸盐混合，产生不溶性沉淀， 要分别单独配制Ca２+与PO4-一起混合易沉淀，定容 后消失。
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2、微量元素 可配成100—200倍混合母液，KI可单独配。 3、铁盐 硫酸亚铁和EDTA钠盐易沉淀，需单独配制，配成 100—200倍鳌合剂不易沉淀。 4、有机化合物 维生素、肌醇、氨基酸等一起配成100或200倍液， 也可分别配制。
培养失败，因而还要对培养基进行灭菌处理。 （一）高压蒸汽灭菌 培养基的灭菌一般采用湿热灭菌法： 1、培养瓶及培养器械放入高压灭菌锅。 2、灭菌锅加水至淹没电热丝。
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3、封闭高压灭菌锅各出气口。 4、接通电源加压至49kPa（0.05MPa） 5、打开排气阀，排冷气至压力0 kPa。 6、继续加压至108kPa（0.11mPa-0.12Mpa，即121℃ ） 7、压力至108kPa（0.11mPa-0.12Mpa，即121℃）时 ，稳压在此压力15-20min。 8、关闭电源自然冷却至压力为0 kPa。 9、取出培养基和器械冷却，贮存于30℃以下室内。
常用6-BA、ZT、KT、2iP。
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细胞分裂素的生理效应
植株的形态建成是CTK和IAA的比值调控的 CTK/IAA高，诱导愈伤组织形成芽 CTK/IAA低，诱导愈伤组织形成根
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烟草 在不 同细 胞分 裂素 与生 长素 浓度 下的 生理 效应
⑶赤霉素类 功能 促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子
所需的培养基，并经高压灭菌或过滤除菌后备用。 （2）外植体的选择与消毒 选择合适的部位作为外植体，采回后经过处理，然后进
行消毒处理。 将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块，
或剥离出茎尖、挑出花药，接种到启动培养基上。
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（3）启动培养 接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养，促使
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3、生长调节物质
⑴生长素类
功能 促进细胞脱分化和细胞伸长， 诱导愈伤组织产生
生长素与细胞分裂素协调作用，在 离体培养中，生长素促进根的形成， 抑制芽的形成。
液体培养中利于体细胞胚胎发生。 常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。
IBA促进生根
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⑵细胞分裂素类
功能 促进细胞分裂和扩 大，调节器官分化，延缓组 织衰老，增强蛋白质合成。 离体培养中，促进不定芽的 发生，与生长素协调作用可 有效控制培养物的生长与分 化。
⑴糖类 功能 离体培养物生长与发育不可缺少的有机成分 ，即作为碳源，又维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。 多使用蔗糖，试管苗生长与繁殖浓度2-3%，幼胚培 养4-6%，某些特殊培养中用8-10%。 细胞和原生质体培养还用麦芽糖、葡萄糖、果糖。
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⑵维生素类
功能 参与酶的形成、蛋白质、脂肪代谢，明显 的促进离体培养物的生长。
培养基。
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3、根据作用分：
诱导培养基-诱导外植体启动生长 增殖培养基-诱导离体培养苗扩大繁殖。 生根培养基-诱导离体培养苗生根 4、根据营养水平分： 基本培养基-包含无机盐等基本营养成分。 完全培养基-包含使植物离体生长全面营养。
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（二）几种常用培养基 细胞工程常用的基本培养基有： MS、MT、White、Nitsch、 Blaydes、N6、B5、NT、 SH、Miller、Heller等。
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第一节 培养基成分、种类及特点 第二节 培养基的制备 第三节 外植体无菌接种 第四节 外植体培养 第五节 试管苗的驯化与移栽
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组织培养步骤图
（1）准备阶段 查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合
实际制定出切实可行的培养方案。 根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段
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（三）几种常见培养基的特点 1、富盐平衡培养基
无机盐浓度高，元素比例适当，离子平衡 好，具有较强的缓冲性，培养中维持较好的稳定性 ，含高量氮、钾，营养丰富，元素种类齐全，MS培 养基使用最广泛。
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2、低盐培养基 无机盐浓度低，有机成分含量低，多数作为
生根培养基、胚胎培养使用，常用White培养基。 3、高硝态盐培养基
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（二）植物生长调节物质的配制 植物生长调节物质分别配成母液储于冰箱，
浓度一般为0.5－1mg/ml。 1、IAA、NAA： 先用少量95%酒精使之充分溶解。 2、2,4－D： 可用少量0.1mol/L的NaOH溶液充分溶解，再缓缓
加蒸馏水定容至需要的体积。
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3、KT和BA等细胞分裂素类： 先用少量0.1mol/L 的HCl溶解，再用蒸馏水定
⑷抗氧化物 抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸、聚乙烯
吡咯烷酮（PVP）及抗坏血酸（Vc），可用50～ 200mg／L的浓度洗涤刚切割的外植体伤口表面， 或过滤除菌后加入固体培养基的表层。
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二、常用培养基的种类、配方及特点 （一）培养基种类 1、根据态相分：
固体培养基-加凝固剂的培养基 液体培养基-不加凝固剂的培养基。 2、根据培养过程分： 初代培养基-初次接种外植体的培养基。 继代培养基-接种初代培养之后培养物的
4、中盐培养基 大量元素无机盐为MS的1/2，微量元素种类
减少含量增高，无肌醇维生素种类多，增加生 物素、叶酸，有H、Hitsch、Miller、Blaydes 等培养基，适用于特殊细胞培养。
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第二节 培养基的制备
制作一升培养基所需药品20多种，为节省时间和 配制的准确，需将各种药品浓缩成一定倍数，并且 混合成一定母液，进行保存。制作培养基时根据需 求制培养基数量取用母液。
机成分顺序将母液取出，混合。 2、适量蒸馏水放入加热容器，蒸馏水
应少于所制培养基数量，约终体积的2/33/4，接通电源加热。
3、向加热容器中加入称量好的琼脂（ 0.6-0.8%），搅拌加热，至完全溶化。
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培养基制作程序图
4、琼脂熬化后，称取相应量的蔗糖（2-3%） ，加入加热容器中至溶解。
第二章 植物组织培养基本操作
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宜职院08.9
目的与要求
了解植物组织培养的培养基种类、成分及其特点， 学习植物组织培养基本操作，了解离体培养环境条 件，以及炼苗移栽基本方法。
具有植物组织培养基本操作程序的认知。能够识 别各类培养基特点，熟悉MS培养基成分；具有制 作培养基能力，具有选择外植体、表面灭菌、无菌 接种等基本能力；具有植物组织培养条件控制基本 能力；有进行组培苗驯化练苗的基本能力。
微量元素—植物所需元素的浓度小于10-5～107mol/L，Fe、Cu、Zn、Mn、Mo、B、Cl。
除C、H、O外，其它矿质元素通常以离子态吸收 N-硝态氮和铵态氮
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2、有机化合物 培养基中只有无机盐叫做基本培养基，为使培养
物更好的生长，还需添加有机成分，常用有糖类、维生 素、醇类、嘌呤、氨基酸等。
固态培养基一般使用琼脂为凝固剂，也有使用 卡拉胶或魔芋粉为凝固剂的。
液态培养基不使用凝固剂，但需要在容器中 置入适当的支撑物，试管为培养容器的支撑物可 用滤纸桥，底面积较大的培养容器，支撑物可选 用脱脂棉等。
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固体培养基
三、培养基及培养器械的灭菌 制备好的培养基如果带菌，会导致植物离体
较低铵盐，高硝酸盐和盐酸硫胺素B5培养基 适合双子叶植物特别是木本植物的生长。
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N6培养基为水稻等禾谷类花药培养设计， KNO3和（NH4）2SO4含量高,不含钼。SH培养基 (NH4)H2PO4代替（NH4）2SO4,矿质浓度较高， 多数单子叶和双子叶植物上使用较好。
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