半夏外植体诱导综述

半夏外植体诱导影响因素综述

Xxxx

(XXXXX生命科学学院，杭州下沙，310018)

摘要：半夏[Pinellia ternate Briet]叶片、叶柄为外植体,用不同的方法接种于含有各种不同激素含量、微量元素含量的培养基中，进行诱导培养。对各种影响因素长生的实验结果进行分析比较。从而了解半夏外植体诱导的最佳环境。主要研究不同植物生长素（2,4-D、IAA、NAA），细胞分裂素（6-BA，KT），微量元素（Mn、Fe、Zn），以及不同的接种方式，不同年龄的外植体植株，对半夏外植体诱导产生的影响。

关键字：半夏植物组培外植体诱导MS培养基植物激素

Abstract：The explants that pinellia’s leaves, petioles, using different methods seeded in medium containing various hormone content of trace element contents in the induced culture. Were analyzed and compared to the experimental results of various factors affecting the longevity. To understand the of Pinellia explants induced the best environment. Mainly study the type of auxin (2,4-D, IAA, NAA) and cytokinin (6-BA, KT), trace elements (Mn, Fe, Zn), as well as the type of inoculation methods, of different ages explants pLANTS, Pinellia explants induced.

Key words：Pinellia Plant tissue culture Explants MS medium Phytohormone

半夏(Pinellia ternate Briet)是天南星科半夏属多年生草本植物，以块茎入药[1]，具有润燥化痰、降逆止呕、消痞散结之功, 为常用大宗中药材。半夏多为野生，由于药用和出口量大，加上大量的采挖和山区开发，使得野生资源日趋枯竭而难以满足目前的需求。随着灾害性气候的影响，加之人工栽培过程中多年沿用块茎和株芽无性繁殖的方法，植株感染病毒严重，产量质量下降，致使半夏的栽培生产受到较大的限制，造成半夏的贮量越来越少，而国内外对半夏的需求有增无减，市场价格逐年攀升[2]。

近年来，学者们对半夏的生物学特性、化学成分、炮制方法、药用功效、引种驯化栽培技术、组织培养技术等方面进行了广泛的研究，尤其在植物生长调节剂对半夏组织培养和植株再生快速繁苗方面做了大量研究[3-4]。还有少量对半夏组培快繁中微量元素的影响研究[5]。

1.生长素对半夏外植体诱导的影响

以MS培养基为基本培养基，单独使用不同浓度的2,4-D、IAA、NAA 三种生长素进行诱导培养，对外植体诱导的不同影响。

1.1 2,4-D的诱导效应

实验证明，不同浓度2,4-D对半夏外植体的诱导效应不同。较低浓度的2,4-D有利于小块茎及根的诱导，如某实验[6]，当2, 4-D浓度为0.2mg/L时，叶柄、叶片小块茎的诱导率分别为100%和89.4%；当2,4-D浓度为0.5 mg/L 时，叶柄、叶片根的诱导率分别为80.6% 和88.9%。较高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导，当浓度为1.0mg/L时诱导出淡黄色疏松愈伤组织，叶柄、叶片诱导率分别为93.3% 和63.6%. 当2,4-D浓度升高到2.0mg/L 时，愈伤组织再分化形成粗短并带有绒毛。

1.2 IAA的诱导效应

IA对半夏块茎的诱导率较高，大部分块茎外植体先脱分化成白色带突起状的胚性愈伤组织，突起的上端逐渐变绿长成小块茎，并产生细长根。比较适合用于半夏的无性快繁，浓度0.5/L的效果较好，小块茎诱导率为67.6% 。高浓度的IAA 较有利于根的诱导和愈伤组织的形成，抑制块茎的分化[7]。

1.3 NAA 的诱导效应

NAA可促进块茎和根的大量形成，当浓度0.2m/L时,叶片、叶柄的小块茎诱导率分别为94.5%和96.0%,根的诱导率分别为90.9%和96.0%。随着NAA浓度的增高，小块茎和根的诱导率逐渐降低，而愈伤组织诱导率升高。当NAA浓度为2.0m/L时，叶片和叶柄的愈伤组织诱导率分别为91.0%和36.0%。说明低浓度的NAA利于根的分化和苗的形成。

1.4 小结

低浓度的生长素均有利于小块茎的产生和根的形成。当 214-D、IAA、NAA 浓度为0.2mg/L 时，均有大量小块茎产生,不同生长素诱导的小块茎产生的植株的形态不同。2,4-诱导时,根数量较少,被绒毛；IAA诱导时，根数目较少,生长较慢；NAA诱导时，根细长，数量多，且叶柄粗壮。

2.分裂素对半夏外植体诱导的影响

以MS培养基为基本培养基，单独使用不同浓度的6-BA,KT,ZT 三种分裂

素进行诱导培养，对外植体诱导的不同影响。

2.1 6-BA的诱导效应

较低浓度6-BA有利于小块茎的诱导。当6-BA浓度为0.2-0.5mg/L时，叶柄、叶片小块茎诱导率分别94.1%-100%和96.0%-100%，当浓度为1.0mg/L时，叶柄的小块茎诱导率为73.3%；随着浓度的升高,在叶片边缘和叶柄的两端产生生绿色的愈伤组织，且生长分化缓慢。当浓度为2.0mg/L时，叶片愈伤组织的诱导率为70.0%。

2.2 KT的诱导效应

当KT浓度为0.2mg/L时，叶柄和叶片的小块茎诱导率分别为80.7%和35.3%,生根率分别为75.0%和9.8%，说明较低浓度的KT有利于叶柄进行植株再生。当浓度增高时，叶柄产生愈伤组织，当浓度为2.0mg/L时，叶柄和叶片的小块茎诱导率生根率分别83.0%和58.0%、62.3%和32.0%，叶柄愈伤组织的诱导率为50.9%，叶片未见愈伤组织产生。

2.3 ZT的诱导效应

0.2-0.5mg/L的ZT对半夏外植体小块茎诱导率分别为73.8%和80.0%，但随着浓度的升高生根率和愈伤组织诱导率都有所增加，叶柄外植体根的诱导率由19.0%增加为64.5%，愈伤组织诱导率由11.9%增至16.7%。当ZT浓度继续升高时，根的诱导率降低，而愈伤组织诱导率提高。当浓度为1.0mg/L时叶柄和叶片生根率分别为46.7%和34.0%,愈伤组织的诱导率分别为25.0%和10.0%；当浓度为2.0mg/L时叶柄和叶片的生根率分别为2.2%和37.3%，愈伤组织的诱导率分别为48.9%和29.4%。

2.4 小结

低浓度的细胞分裂素均有利于植株的再生，且生长势比单因素低浓度的生长素处理长势好，外植体先在边缘产生绿色突起，再由绿色突起分化为大量的小块茎，6-BA效果较好，但叶较小；KT诱导的小块茎萌发的植株叶柄较细，叶片较大。

不同浓度的激素搭配也会有不同的影响，以半夏顶芽为外植体诱导愈伤组织，在接种3-5d后，顶芽两端向上跷起，随后有切口的一端膨大。接种10-12d 后，可见顶芽有所增长，其切口端出现白色绒毛状物。第15天后，渐渐出现淡黄或透明的松散型愈伤组织。将愈伤组织切下于同样的培养基中进行增殖培养。出愈率可以看出，当NAA浓度相同时，6-BA浓度越大，愈伤组织出愈率越高；当6-BA浓度相同时，NAA为0.2mg/Ｌ时，出愈率普遍较高，且试验中观